За получаване на тънък (до 6 микрона) хистологични секции трябва да се определят и се промиват материал се излива в плътна среда предварително накиснати в своите филийки тъкани. В зависимост от метода на разтваряне на всички капсулиращ среда разделена на разтворими и водоразтворими органични разтворители. Първите включват парафин, пластмасови полимери базирани восък, целоидин, на втория - желатин, полиетилен гликоли, полиетери, някои метакрилати.
Парафин - смес от високо молекулно наситени въглеводороди, петролни дестилати; Той се разтваря в анилин, бензен, бергамот масло, целосолв, хлороформ, декалин, диоксан, бутанол, пропанол, толуол, trihlorietilene, ксилен. Всяка от тези разтворители може да се използва като междинно средата между алкохол и парафин.
Точката на топене на различни парафини в диапазона от 27 до 62s. Хистологичният използваната техника 56s парафин с точка на топене.
Редица чужди фирми, които произвеждат специално парафин хистологично съдържащ различни пластмасови полимери, такива като диметилсулфоксид ( "Paraplast", "Gistoplast C", "Gistozes"). Отделно е необходимо да се разпределят нова среда за хомогенизира восък леене Histomix®, съдържаща в състава си на природен восък и синтетични полимерни добавки.
По отношение на хистологични техники условия втвърдяване чрез изливане восък обект е много важно. Когато разтопен восък започва да се втвърди, има филм на повърхността под формата на люспи облаци, и след това започва да се образува кристали, която се състои от парафинов восък. Това състояние води до промяна парафин намаляване на обема си с около 5-10%, в резултат на постоянно напрежение тъкан поставени в парафин. парафинови кристали са във формата на плочи или игли повече или по-малко добре, в зависимост от охлаждане. Колкото по-бавно охлаждане, по-тънките кристали. Трябва да се отбележи, че кристалите, които попадат в тъканни пространства в края на един обект в парафин, не разполагат с ефекта на деформиране, поради малкия им размер. Когато восък започва да се втвърди - е непрозрачен, след това става прозрачен, с лъскава повърхност. В този момент, компресиране на восък спира.
Много важна роля в восъкът се втвърдява играе разтворени в него въздух. При охлаждане, определен обем на восък се втвърдява първия повърхностен слой. Тъй като разтворимостта на въздуха в лечимо восък се понижава, въздух се освобождава в точката на контакт на течен парафин и втвърдения слой. Част от този въздух се разтваря в топъл и повече течност център маса, а от друга страна остава в газообразно състояние между кристали восък. По този начин може да се създаде кухина напълнени с въздух. Това води до появата зърнеста в центъра на блока след втвърдяване. За да се избегне подобна гранулиране парафин по време на запечатването на обекта, можете да използвате най-различни начини. Малки парчета тъкан (2-3 mm) могат да бъдат запечатани в часовниково стъкло в малко количество восък, които бавно се излива с пипета. Когато по-големи обекти добри резултати, които се изсипват дълбок и тесен съд; където втвърдяването на восък започва от дълбочината и се простира нагоре въздух прави свободно и са разпределени на повърхността.
За изливане парафин обект първо трябва да се обезводнява и след това се движите постановка среда, разтворим в парафин и алкохол.
Така в процеса на изливане на восък обект се разделя на четири основни етапа:
- алкохол дехидратация,
- импрегниране на междинно съединение среда (ксилен, толуен, бензен и т.н.),
- импрегниране с парафин,
- окончателно заключение в парафин.
Целоидинът - добре нитроцелулоза разтваря в етер. Хистологичният практика с използване на 2%, 4% и 8% разтвори целоидин, която се получава от tselloidinovyh плочи или емулсия от промива и суши лъчи филм.
Наливане тъкан целоидин в момента по-малко популярен от восък, и тя се използва главно за пълнене trudnorezhuschihsya тъкани и големи обекти, с които е трудно да се направят добри парафинови блокчета. Tselloidinovuyu запълване се използва също и в случаите, когато това е необходимо да се избягва излагането на материала за изпитване при високи температури. В допълнение, материалът за напълване в целоидин ви позволява да получите най-добри резултати в присъствието на обекти в големите кухини, пропуските и слоеве от различни консистенции.
Етер и суха целоидин запалим, така че трябва да се внимава, когато се работи с тях.
Изливане в целоидин-парафин препоръчва за лечение на обекти, които са лесно сгъстен когато отливката восък, например хематопоеза, мезенхимни тъкани, както и на органите и тъканите, с многослойна структура (трахеята, кожа и т.н.). Така благоприятно използване на двата метода.
Изливане в желатин се използва широко за проучване обекти, лесно разпадащи в рязане на крио-микротом, в производството на секции с органи богати на съединителната тъкан, проучването на ембрионални обекти, както и мазнини и липоидни включвания. Използване на кристален прозрачен желатин, която се получава от 25% и 12.5% разтвори.
Напълнете в vodorastvormye пластмаса работи добре в хистохимия, по-специално за откриване на липиди и ензими. Използвани синтетични пластмаси - полиетиленгликол polivaks, метил метакрилат и други.
Свързани статии