Цвят реакции за протеини
Наличието на протеини в биологични разтвори, или могат да бъдат определени чрез цветна реакция, която протича в резултат на наличието на специфични протеинови групи и пептидни връзки.
Реагенти: воден разтвор на яйчен албумин (протеин от пилешки яйчен жълтък отделя от разтваря в 15-20 пъти обема дестилирана вода, след което разтворът се филтрира през тензух, сгъната в 3-4 слоя, и се съхранява в хладилник, 10% разтвор на хидроксид натриев, 30% разтвор на натриев хидроксид, 1% разтвор на меден сулфат, 1% разтвор на оловен ацетат, концентрирана азотна киселина, 0.5% разтвор нинхидрин-ти.
Оборудване: епруветки; водна баня или дух лампа.
Задача 1. биурет реакция.
В алкална среда протеини и техните хидролизни продукти - пептидите дават лилаво или червено-лилав цвят с медни соли. Реакцията се дължи на присъствието на пептидни връзки в протеини:
Интензитетът на цвета зависи от дължината на полипептида.
- Леярската тръба 5 капки яйчен протеин разтвор, а след това 10 капки от 10% каустик разтвор.
- Добавете 1-2 капки разтвор на меден сулфат, сместа се разбърква. Изглежда цвят червено виолетов.
Задача 2. ksantoproteinovaya реакция.
Реакционната характеристика на някои ароматни аминокиселини (фенилаланин, тирозин, триптофан), както и за пептидите, които ги съдържат. Когато действието на азотна киселина се образува нитро съединение с жълт цвят. Допълнителни нитро производни могат да реагират с основа за образуване на натриева сол, като жълто-оранжево оцветяване:
Тази работа трябва да се извърши в аспиратор, спазвайки изключително внимание!
- Тръбата се изсипва 5 капки разтвор на яйчен белтък и ВНИМАНИЕ стена добавят 3-4 капки концентрирана азотна киселина.
- Сместа беше внимателно топлина. Утайка, която се превръща в жълто.
- След охлаждане до стената на тръбата на ВНИМАНИЕ прилив 10 капки от 30% разтвор на NaOH, жълтият цвят се превръща в оранжев.
Задача 3. Реакция на сяра-съдържащи аминокиселини (REA ЛИЗАЦИЯ Nogier).
Остатъците на сяра-съдържащи аминокиселини цистеин и цистин сяра разцепват чрез алкална хидролиза, за да образуват сулфиди. Сулфидите, взаимодействащи с оловен ацетат за да се образува утайка от оловен сулфид черно или кафяво-черен цвят.
- Ин витро микс 5 капки разтвор яйчен протеин, 5 капки 30% каустик разтвор и 2 капки оловен ацетат разтвор.
- Сместа беше леко дух се загрява до кипене и къкри. След известно време, има кафяво-черен или черен цвят.
Реакционната характеристика на амино групи в α-позиция и се дължи на присъствието на а-аминокиселини в молекулата на протеин. Когато протеинът се нагрява с воден разтвор на нинхидрин аминокиселини се окислява и се разлага до образуване на въглероден диоксид, амоняк и съответния алдехид. Рециклирана амоняк кондензира с нинхидрин и нинхидрин молекула окислен до образуване на съединение с виолетово-синьо:
При извършването на тръбата 5 капки на 1% разтвор бял яйчен се прибавят 3 капки от 0.5% разтвор на нинхидрин разтвор и се нагрява до кипене. След 2-3 минути, има розово, червено и след това синьо-виолетов цвят.
Кандидатствайте за проучвания под формата на таблица.
Свързани статии