Бърза диагностика на холера. Холерата предизвиква две БИОВАРИАНТ Vibrio холерният. Един от тях, посветен Кох в Египет през 1883 г., наречен класически, другата получава F.Gotshlihom карантинен център El Tor в Северна Африка през 1906 г. V.eltor. И двете биовар nonagglutinating вибриони Наги, халофилни paragemoliticheskie вибриони произвеждат хемолизино и недопускане на холера вибриони-окислител включен в род Vibrio семейството на Vibrionaceae.
Това е остра чревна инфекция, придружени от остра дехидратация и обезсоляване на тялото. Източникът на инфекцията е болен човек или носител. Механизмът за предаване фекално-орален. Патогените са соматични О и флагеларно H антигени.
О-антиген има специфична и типичен специфичност. Според структурата на О-антиген разграничат вече 40 серотипа. Разработване на имунитета на холера е хуморален в природата. Материал за изследване изпражнения, повръщане, трупен материал. Метод на масови изследвания vibriononositelstvo. Материалът се взема директно от червата, използвайки стъклена тръба 0,5 см в диаметър за деца, 1,5 см за възрастни и 15 см дълъг с фритовани краища на тръби, използвани при липса на памучни тампони върху дървени пръчки.
Тръбна веднага се потапя във флакон, съдържащ 1 мл 100 200 пептонова вода и слепен холера О-серум в разреждане до половината от титър. В един и същ флакон вземе материал от 10 души. Ампулите се поставят в инкубатор при 370с. След 3 04:00 Vibrio холерният аглутинират и постепенно да започне в рамките на следващите 2 часа спада под формата на люспи на дъното на флакона. Проучване под микроскоп оцветени петна и капка висулка откриване на лепило и частично свободни вибриони.
След 6 часа, отговорът е даден в случай на откриване на V. холерният веднага инокулират поотделно от всяка от 10 лица. Този метод дава възможност да се проучи до 16 000 души в 3 4 дни. Микрофилм имунодиагностичен метод. Изследването на антигенните свойства на V. холерният се извършва чрез определяне на епруветка или реакционната плоча аглутинация използване сух лиофилизиран диагностичен аглутиниращ холера 0-серуми и серуми Ogawa и Inaba. Серумът се разрежда с физиологичен разтвор или дестилирана вода и се смесват при аглутинация състав на стъкло с Vibrio култура проучване.
При подготовката на серума използва допълнителни съдове, което усложнява работата на бактериолог и остатъка разреден серум бързо расте бактериална микрофлора и го инактивира. За изследването на антигенната структура на V. холерният имунодиагностика продукт под формата на единични приложения микрофилм са разработени, които притежават достатъчна специфичност, подчертано и икономичност.
Имунодиагностични холера IHMP микрофилм под формата на полимерен филм, покрит с изсушените капки, фиксирани върху хартия, съдържа минимално количество серум, филмообразуващият компонент и консервант. компонент образуващ филм се свързва, се придържа и фиксира следи съставки към повърхността на носителя елиминира разпада микрофилм консервант предпазва лекарството от разпадане по време на удължено съхранение.
Концентрацията на серум в диагностичен IHMP е достатъчно, тъй като, след емулгирането на спада на физиологичен разтвор, съдържащи се антитела при титър от 1100, които напълно осигурява реакцията. Това осигурява достатъчна концентрация на антитела намалява серумния консумация диагностика и изключва възможността за неговото неизползване. Това създава условия за бързо разтваряне IHMP, си контакт с Vibrio холерният и провеждане на реакцията директно с полимерен филм.
Готов IHMP съхранява на тъмно и сухо място при 4 до 7 ° С в картонени кутии срок на годност от 3 години за наблюдение и, ако е уместно IHMP използва за определяне на Vibrio холерният. За да се предотврати случайно заразяване на околните IHMP обекти, поставени в чиста чашка на Петри. IHMP прилага към повърхността на капка физиологичен разтвор, в който е разтворен. Разреденият серум се смесва с изследваните култури вибриони отстраняват бактериологично линия с хранителна среда.
В друго изпълнение, IHMP реакцията на формулировка се отстранява със скалпел от субстрата за хартия и се прехвърлят върху предметно стъкло, се разтваря в капка от физиологичен разтвор и се смесва с култура на Vibrio проучена. Ако положителна реакция в един 3 мин аглутинира зърна изглеждат оцветени в зелено и избелени капка. С отрицателна реакция спада остава хомогенно мътен. В използваната част на полимерен филм се нарязва и останалата част на филма с IHMP съхраняват в същото петриевата паничка за по-нататъшни изследвания.
Използването IHMP изследвания вибрион и други микроорганизми дава възможност да се получат статистически значими резултати, освен скъп диагностичен серум, подобряване на качеството и ефективността на разследванията. Аглутинация мик. Наскоро, бактериологични практика намерих доста широко използван метод за microvolume изпълнения на серологични тестове с помощта на специални микротитърни планшети и игли. Аглутиниране тестове дават микрометод с холера аглутиниращи референтни серуми в микротитърна polistrolovyh planchette плосък или V-дъно Nym изображение предназначени за имунологични реакции, използвани mpkrotitrovalnye микротитърни ямки с обем от 0.4 мл в епруветки и паралелно.
Предварително planchette promyvfyut внимателно с течаща вода, всяка ямка се промива с дестилирана вода и се суши добре, след това се надпис на молив.
Във всички ямки четири серии капкомер е направен от микротитърна Такач разтвор на хлорид 0,85 натриев на рН 7.2 в обем от 0.05 мл, след първото гнездо на всеки ред, съответстващ на същия обем от серум при разреждане 125 и изпълнява своята титруване mikrotitroval солна игла с обем главата на 0.05 мл, чрез отстраняване на последните от ямките в 0.05 мл. След титруване на серумите към всички кладенчета, освен от техния контрол, получаване на суспензия от 0,05 мл проучване агар култура.
Тази манипулация се извършва върху поднос. В края на плочата титруване се покрива с капак и се поставя в тава в пещ при 37 С. След експозиция 2 часа записва крайния Реакцията се провежда под стереомикроскоп MBS 1, MBS 2 kosoprohodyaschem светлина. Когато се осчетоводява капака от реакцията на planchette не са отстранени, заменя друг в случай на мъгла. След като реакционната planchette и подредени в ров покритие, и се изсипва 5 хлорамин така че всички ямки бяха напълнени с дезинфекциращ разтвор планшети.
Проучванията показват, че всички Vibrio холерният El Tor и класически холера биоварианти слепени видове 0-серум в микро. Относно agglyutinabelnosti тип-специфични серуми, следния модел се проследява във формулировката в серум Inaba микрометод аглутинират 100, и тръби 90 щамове на Vibrio холерният класически Inaba серотип. Биовар V. холерният El Tor Inaba серовар аглутинират в планшети и тръби, съответно 95 и 96 случаи.
В Vibrio холерният класически и El Tor серотип Ogawa биоварианти съотношение на двата метода са почти еднакви. Интересното е, че при определянето на реакцията на аглутинация с RO-серум-голям брой щамове аглутинирани RO-серум с титър се открива в микрометоди аглутинация в тръби, монтирани в един щам. Всички щамове на Vibrio 040,056 серотипа в микрометод не аглутинират холера аглутиниращ серуми и епруветки щам II 258-1099 040 серовар аглутинират всички холера серуми.
Повечето Enterobacteraceae семейните представители на щамовете изследваните не са слепени холера аглутинатен серуми, освен Sh. flexneri 2503, която е намерена в тръби аглутинация с всички серуми и S. Typhimurium щам 21, който е маркиран неспецифична аглутинация с всички серуми ин витро и в Ouija борда.
Когато се използва този метод, консумация аглутинация серуми се намалява с 10 пъти, значително намаляване на времето, необходимо за реакцията на настройка време и се ускорява период на издаване на отговор. Също така описан метод е по-труден. По този начин, стандарт, точността на резултатите, с висока ефективност на метода позволява да го препоръча за идентификация на Vibrio холерният и щамове на популацията на проучването на Vibrio холерният натоварва допълнително въз основа agglyutinabelnosti.
И за обездвижване на вибрион холера серуми и типични холера фаги. Капки или фекалии материал от повърхността на пептонова вода третира холера О-серум типичен серуми Ogawa и Inaba холера типични или фаги. Получава се от тези състави смачкани слама, които се разглеждат от метода на тъмното поле и фазово контрастна микроскопия. В положителен случай, след 3-5 минути движение вибрион спира. RIF. Препарати от изпитваното вещество се обработва с флуоресцентен холера серум и се изследват под флуоресцентен микроскоп.
Положителният резултат се счита за откриване дори единични подготовка вибриони ярко жълто-зелен емисии в блестящ ръб около периферията на клетката. Положителен резултат може да се получи след 1-2 часа след началото на изследването при концентрация от вибриони малко 106 клетки в 1 мл Следователно се препоръчва предварително отглеждане на материала на хранителни среди.
Свързани статии