ТЕМА: микробиологична диагностика на коремен тиф и паратиф.
Цел: Да се изследва начина на бактериологични изследвания коремен тиф и паратиф в първата седмица на заболяването.
Коремен треска, паратиф А и В - остри заразни заболявания, подобни на техните клинични прояви, патогенеза, биологични свойства, характеризиращ се с лезии на лимфната система, на тънките черва, бактериемия възникнат с тежка интоксикация, увеличен черен дроб, далак, често с roseolous обрив. Ето защо, те се разглеждат заедно. Но това не зависи от заболяването. агент причинител на коремен Salmonella Typhi (Ebert-Gaffki коли), паратиф А - S.paratyphi А (стик-Brion Kaiser); възбудител paratyphi B - С. raratyphi B (придържаме Shotmyullera) принадлежат към рода Salmonella Enterobactericeae семейство. Названието на рода е дадено в чест на американския учен Дж сьомга.
Тези малки пръчици със заоблени краища, peritrichous, спори и не образуват капсули, грам.
Salmonella коремен тиф и паратиф - факултативни анаероби. Оптималната температура на растеж на 37 ° С за тях. На МРА форма кръгла, купол, влажна, гладка S-форма колония. S.paratyphi B (Shottmyullera коли) може да расте в големи колонии с лигавицата валяк периферно. В диференциално-диагностичен медиите Endo и Левин Salmonella колонии са безцветни, със синкав оттенък, при средни Wilson Blair (бисмут сулфит агар) чрез редукция с натриев сулфит да натриев сулфид - черно или кафяво-зелена; предизвика дори замъглено BCH. В номер Хис Salmonella Typhi разгражда от глюкоза, малтоза, манитол киселина, докато не газ, но Паратиф пръти - на киселина и газ.
Salmonella коремен тиф и паратиф А подкислява и паратиф в schelochat лакмус мляко. Желатин не втечнен, не образуват индол, произвеждат Н2 S.
Salmonella съдържа термостабилна соматични О-антиген, флагеларно, Н-лабилен антиген. Общият характер на антигенна структура води до факта, че салмонела коремен тиф и паратиф залепена не само хомоложни, но и в свързаните с антисеруми. За да се премахне напречно аглутинация група, подготвени monoretseptornye серуми, съдържащи специфични антитела срещу Salmonella фракции. Патогени partifov коремен тиф и А и В са антигенни свойства схема Kaufman-White.
Източникът на заболяването - болните хора и на медиите.
механизъм предаване: фекално-орален. Вода доминира пътя на предаването е по-рядко срещан храна и домакински контакт начин.
таблица 3
Схема патогенеза Typhi
Пълно възстановяване;
Усложнения, свързани с развитието на язва, перфорация, чревен кръвоизлив.
Преместването в bacteriocarrier.
Инкубационният период на коремен тиф е средно 14 дни. Началото на заболяването се характеризира с постепенно повишаване на температурата по време на нарастващите явленията на ендотоксин отравяне отразява в обща слабост, главоболие, объркване, безсъние, делириум. До края на първата седмица на болестта на телесната температура достигне 40-41 ° С През втората седмица на заболяването върху кожата на корема се появява roseolous обрив, симптоми на ентероколит, изразени. Отделителната фаза алергични фоликули лимфоидни тъкани и плаката се подлага на некроза, което може да доведе до допълнително перфорация на червата, перитонит и смърт (3-4 седмици на заболяването). Възможни усложнения: пневмония, миокардит, токсичен шок.
Тест материал в зависимост от етапа на патогенеза (изброени в Таблица 3).
Културата средства: жлъчна бульон, Rapoport среда (жлъчния бульон, глюкоза или манитол, индикатор Andred). Жлъчните е благоприятна среда за Salmonella. Диференциална диагностика среда Ploskireva, ендо, Левин.
В зависимост от етапа на развитие на болестта, диагностични методи са различни. През първата седмица на заболяването да се изследва кръвта и вземат кръвни култури, изолирани. През втората седмица на заболяването, когато се появи кръвта антитела дават Widal реакция - подробно аглутинация за определяне на антитела в серума на пациента. През третата седмица на заболяването - за потвърждаване на диагнозата в проучването, като изпражненията или урината и изпражненията култура или изолиран urinokulturu.Самостоятелна работа на студентите
За изучаване бактериологични изследвания на кръв веригата на пациента с коремен тиф (№2 схема).
Извършване на пациент кръвна култура на коремен тиф в бульон жлъчката или среда Rapoport.
Посява отново с хранителна среда Rapoport в сряда Ендо.
Безцветни колонии върху Ендо среда да изготви намазка, оцветяване по Грам, promikroskopirovat, скица. Посява отново безцветни колонии върху околната среда на Ръсел или скосена ИПП.
Изследване на културата на чистотата в околната среда на наклон или IPA Ръсел. Изработване култури в IPA за определяне на чувствителност към метод хартия диск антибиотици култура на среда свистене или MTS-12Е, по ВСН за определяне на биохимични и протеолитични свойства.
Изработване аглутинация реакция на стъклото на чиста култура с поливалентен и monoretseptornymi серуми.
Направете списък на "пъстър серия" или MTS-5 - 12E (на демоса). Счетоводни antibiotikogrammy.
Подгответе доклад, бактериологично изследване на кръвта на пациента със съмнение за коремен тиф и да дава становища.
Графика на бактериологично изследване на изпражнения на пациента със съмнение за коремен тиф.
Насоки за самостоятелна работа
Бактериологично изследване на коремен тиф през първата седмица на заболяването проведе в няколко етапа.
1-ви ден - 5-10 мл кръв, взета от вената на пациента е стерилна до леглото, за да сее 50-100 мл бульон или жлъчния сряда Rapoport. Културите се поставят в инкубатор в продължение на един ден при 37 ° С
Rapoport среда се състои от месо-пептон бульон с 10% на жлъчката, 2% глюкоза или 1% манитол и 1% Andred индикатор. Когато се отглеждат в среда S. Typhi Rapoport маркиран мътност, зачервяване, няма газ. С развитието. S.paratyphi А и В, средата се оцветява в червено, в резултат на образуването на газ поплавъци поплавъка.
Ден 2. Rapoport субкултивират със средна до Ендо среда и се поставя в инкубатор в продължение на един ден при 37 ° С.
3-ти ден. безцветни колонии растат върху средата Ендо (защото те не ферментират лактозата), които се посяват отново в среда на Ръсел за изолиране на чиста култура.
4-ти ден. Изработване култури за сметка на околната среда на Ръсел, определи чистотата на културата. Ръсел на носител не се разлага лактоза (червено среда), глюкоза се разлага (синьо среда). Културата Net. Пригответе натривки, Цвят Gram, mikroskopiruyut определи мобилност. В намазки на грам-отрицателни пръчки от среден размер със заоблени краища, подвижни, peritrichous.
С чиста култура даде примерен реакция аглутинация с диагностичен аглутиниращ серуми коремен, паратиф А и Б. С серуми, което дава положителна реакция на аглутинация, дават разположени. Чиста култура посяват върху среда Хис или MTS-5U за определяне на биохимичните свойства на месо-пептон бульон - протеолитични свойства на МФК - за антибиотична чувствителност и идентифициране на връзки с коремен бактериофаг.
На медии Хис разлагат глюкоза, малтоза и манитол към киселината без газ. Лактоза и захароза не се разлагат. В МРВ освобождава сероводород. Културата е чувствителен към някои антибиотици и лизирани под действието на коремен бактериофаг. Разширена аглутинация положителен тест с серума на коремен.
Препарати за специфична терапия и профилактика на коремен тиф и паратиф А и Б
Показания
Бактериофагите - филтрат fagolizatov Salmonella Typhi на
За лечение и профилактика на аварийно
Имунитетът не създава механизъм на действие - специфично лизиране на бактерии вируси
Какви са причинители на коремен тиф и паратиф.
Различното Salmonella Typhi Salmonella паратиф А и В на биохимичните свойства?
Каква е структурата на антигенен причинител на коремен тиф?
Патогенеза Typhi (етап заболяване).
От какъв материал е взет от пациента за ранна диагностика на коремен тиф и как този материал се изследва?
Какъв е съставът на хранителната Rapoport?
От какъв материал е взет за бактериологично изследване на пациент със съмнение за коремен тиф в продължение на 3-4 седмици на заболяването?
сесия 3
ТЕМА: микробиологична диагностика на коремен тиф (продължение). Серологично диагностика на коремен тиф. За серология и откриване на оздравяващи пациенти bacillicarriers реакция се използва пасивна Vi-хемаглутинация за определяне на серумните VI-антитела. Диагностична стойност има титър пасивен Vi-хемаглутинация 1:40 и по-висока.
Самостоятелна работа на студентите
Създаване на реакционната схема Widal.
Сложете аглутинация Видал за диагностициране на коремен тиф и паратиф.
Видал направи опис на реакцията на извадковите данни, за да даде становище.
Сложете TPHA (RNGA) - пасивна реакция (непряко) с еритроцитите хемаглутинационната diagnosticum.
Изработване PHA сметка, да даде становище.
Насоки за самостоятелна работа
За да се активира Widal реакция като кръв от пръст или единична игла от вената на лакътния в количество не по-малко от 1-1,5 мл при началото на втората седмица на заболяването. Кръвта се събира в стерилна епруветка, която се поставя в инкубатор в продължение на 30-60 минути. Сиренината се отдели от стените на тръбата с пипета на Пастьор, епруветката се поставя в хладилник. След уреждане, серумът пълнене и се използва за реакцията на производство.
От серум, разреден с физиологичен разтвор стерилна от 1:50 до 1: 800. Реакцията се използват две контроли: първа контролна група - контролен антиген (CA) съдържа физиологичен разтвор (1 мл) и diagnosticum (2 капки); втората контрол - контролен серум (KS), съдържащ 1 мл серум при разреждане 1:50. Наблюдението следва да бъде абсолютно прозрачна.
Таблица 5
Widal реакция постановка схема
След прибавяне diagnosticums епруветки се разклащат и поставят в инкубатор в продължение на един ден при 37 ° С
Реакцията се измерва по тяхната +. ++++ - рязко положителен, +++ - положително, ++ - съмнителен - отрицателна.
Височината на аглутин от титърът не може да бъде доказателство за болест. Надеждни резултати се постигат чрез аглутинация тестове повтарят серум на интервали от 5-7 дни. Ясно увеличение в титъра на аглутинация показва наличието на инфекция.
За да се открият реакционните bacillicarriers оздравяващи пациенти използват пасивен Vi-хемаглутинация, от които определят VI-антитела в серума. Тъй като антиген използва Vi-еритроцитен diagnosticum, която е суспензия на човешките еритроцити I (0) на групата, третирана с формалин и Vi-антиген чувствителни тифоид бактерии.
От пръст да вземе 1 мл кръв. Преди да реакции изследвани серуми нагрява при 56 ° в продължение на 30 минути, за да унищожи аглутинин на група.
Схема пасивна хемаглутинация
В пещ при температура 37 ° С в продължение на 2 часа.
Забележка. хемаглутинин титър от серум 1:80.
Реакционната Аглутинацията се поставя в епруветки или ямки на полистиренови плаки. Серумът се разрежда от 1:10 до 1: 160-1: 320. Еритроцитни diagnosticum трябва да бъдат внимателно се разклаща и се прибавя към всяка ямка 0.5 мл. Lune тръби и се поставя в инкубатор в продължение на един и половина до два часа при температура от 37 °. Отчитане на реакцията се извършва не по-рано от момента на утаяване на еритроцитите в контролните тръби (над 2 часа) и отново след 24 часа престояване при стайна температура.
Постановка на реакцията с адсорбирания monoretseptornoy Vi-серум. Реакцията трябва да е положителен серум титър да се ограничи, отбелязан върху етикета на ампулата.
Постановка на реакцията с О-серум и физиологичен разтвор. Резултатите трябва да са отрицателни.
Положителна реакция се характеризира с хемаглутинацията на червените кръвни клетки утайка на дъното на Lune или флакони под формата на "чадър" с назъбени краища. При отрицателен отговор, както и в контролите, червени кръвни клетки се утаяват и компактен утайка има формата на диск с гладки ръбове и гладка повърхност ( "бутони") (Таблица 6). Диагностична стойност има титър пасивен Vi-хемаглутинация с 1:40 и по-висока.
Въпроси за самоконтрол
На какво седмица на коремен тиф сложи Видал реакция?
Защо когато серологичната диагностика на коремен използва О и Н антигени?
Каква е анамнезата, инфекция, ваксинацията Видал?
Посочете методите на диагностика коремен тиф носител състояние.
Какви са лекарства, използвани за специфична превенция на коремен тиф.
Програмата на подготовка за изпити по медицинска микробиология и вирусология.
Л. Пастьор, основател на науката за микробиология. Влиянието на работата на Пастьор за развитието на медицинската микробиология
Методически указания за лабораторни упражнения по обща микробиология.
Лабораторни изследвания на микробиология, вирусология и имунология започват от запознаване на студентите с организирането на микробиологична и логична.
Вродена токсоплазмоза и превенция (за да помогне на лектора)
Доцент, Катедра по микробиология, имунология и вирусология DSMA Саидов, MS доцент по ОМЗ и създаване помощник DSPU Rabadanova PM.
Русия
Шевченко AA доктор по ветеринарна наука, професор, ръководител на катедра по микробиология, вирусология и epizootology Кубан членка.
Курсът и лечението на микробна екзема сред жителите на региона Архангелск
Работа, извършвана върху столове кожни и венерически болести микробиология и вирусология и имунология SEI HPE