ТЕМА: микробиологична диагностика на бактериална дизентерия.
Насочете. разгледа етиологичната структура на бактериална дизентерия, биологичните свойства на патогени. Научете основните принципи на диагностика и да е в състояние да извърши идентификация на изолирани култури.
Шигелоза - polietiologic anthroponotic заболяване, което се причинява от няколко вида Shigella и най-вече засяга дебелото черво. Общи характеристики на всички Shigella - липса камшичета, по-слабо изразени в сравнение с други ентеробактерии ензимна активност, наличието на само О-антиген.
От биохимична активност и антигенна структура на всички Shigella разделени в 4 групи: А, В, С, D. Всяка група включва един вид различни серотипове.
Международна класификация на Shigella
A - Shigella dysenteriae
Б - Shigella flexneri
С - Shigella boydii
D - Shigella sonnei
Shigella вирулентни фактори, определени от присъствието на адхезия и колонизация от Shigella, които проникват в епитела на дебелото черво и се размножават в него. По-късно разработена свръхчувствителност от забавен тип (DTH), или инфекциозна алергия, която води до развитието на язвен колит.
Генотоксичност Shigella, свързани с образуването на ендотоксин (LPS) и екзотоксини 2 вида: ентеротоксин и цитотоксин. Цитотоксин произведени Shigella dysenteriae (Shiga Grigoreva-).
Отличителна черта на епидемиологията на дизентерия е изчезването на 40-те години на dysenteriae Shigella, а след това се върнете към 60-80h, съответно.
Лабораторна диагностика на бактериални дизентерия извършва от трите основни метода: бактериологично, серологични и алергични. Основният метод diagnostiki- bakteriologicheskiy- инокулира изпражнения на избираем диагностика и диференциална медийна култура (средно selenitovaya обогатяване, Ploskireva среда, Ендо и Levine). Имайте предвид, че екстрахиране antibiotikozavisimyh увеличава Shigella щамове когато посяват върху среда, съдържаща хлорамфеникол изпражнения и тетрациклин (25mkg / L).
С цел да се даде реакция serodiagnosis индиректен хемаглутинационен (IHA).
Allergodiagnostika- сложи интрадермален тест с dizenterinom от 3 - 5 - ия ден на заболяването (Tsuverkalova тест).Самостоятелна работа на студентите
Разглобяване и скица в бележника верига микробиологична диагностика на бактериална дизентерия.
Изработване семена екскрети пациент със съмнение за бактериална дизентерия в диференциално-диагностичен медиите Ploskireva или Endo.
За проучване на модела на растеж в средносрочен Ploskireva (изследването на културни ценности).
Част от S- форма на безцветни колонии (колонии на L-дефектен) в сряда Ploskireva подготви намазка, петна от Грам и promikroskopirovat (изследване на морфологичните и багрилни свойства).
Формулиране на ориентиране реакция аглутинация на стъкло със смес от дизентерия серуми (flexneri, sonnei) и monoretseptornoy серум.
За изолиране на чиста култура от останалите laktozodefektivnoy на колония (LD-колонии) са субкултивирани върху околната среда Ръсел.
Микроскопско изследване на избрани културно чистота.
Изследването на ензимните свойства на избрания kultury- презасяване на диференциална диагностика среда Хис.
Определяне на избран културна чувствителност към метод антибиотици диско дифузия (хартиени дискове) и fagolizabelnosti.
Схема 3. Микробиологично изследване дизентерия
тест за аглутинация (Widal тип реакция) с dizentiriynymi diagnosticums, с TPHA
Засяване на диференциала среда (Ploskireva и др.)
Характерът и цвета на колониите
Намажете, оцветяване по Грам
аглутинация тест върху стъкло със смес от дизентерия серуми
колонии на Ръсел в сряда или сряда trehsaharnuyu
Намажете, оцветяване по Грам
Засяването на "цветна" серия
аглутинация реакция на стъкло със смес dizentiriynyh серуми, а след това с видове и видове
Насоки за самостоятелна работа
Ден 1: изпражненията на пациента се инокулира върху диференциално-диагностичен медии Ploskireva или Endo. В присъствието на изпражненията за изпитване или лигавицата-гнойни кървави бучки са избрани бактериологично контур, промива се в изотоничен разтвор на натриев хлорид и се прилагат към повърхността на средата или Ploskireva ендо след това се пулверизира с помощта на шпатула. Културите се инкубират в инкубатор при т - 37 ° С за 24 часа.
Ден 2: а) прозрачни безцветни колонии посяВат на среда Ръсел за изолиране на чиста култура;
б) остатъкът от изолираните колонии се използват за определяне на реакцията на ориентация аглутинация на стъкло със смес от дизентерия серуми и серуми със смес от анти-Salmonella (коремен да се избегне и Salmonella).
3-ти ден: а) 24 часа в среда на Ръсел - агар колона превръща сини.
б) изолиран култура се субкултивират на диференциално диагностични носители Хис или MTS - 5U;
в) определяне на чувствителността на избрани култури до метод антибиотици диско дифузия и fagolizabelnost.
Ден 4: Окончателното становище за определяне на биохимични свойства, чувствителност към антибиотици и fagolizabelnosti.
Забележка: дефекация отведе директно до леглото на нестабилността на Shigella във външната среда.
Въпроси за самоконтрол:
Дайте една модерна Международна класификация Shigella.
Какви са качествата формират основата за класификацията на Shigella?
Как различните видове бактерии дизентерия биохимични свойства?
Какъв тип дизентерия пръчки произвежда екзотоксин?
Списък основни диагностични микробиологичните методи за бактериална дизентерия.
Какви са най-честата причина Shigella бактериална дизентерия в момента.
Като материал като на изследване за изолиране на чиста култура и културалната среда, на които се инокулира?
Препарати за специфична превенция и лечение на бактериална дизентерия.
урок 6
ТЕМА: микробиологична диагностика на холера.
Цел: Да се проучи методите на микробиологична диагностика на холера. Запознаят с методите на специфична превенция и лечение на холера.
Холера - остро anthroponotic особено опасно карантина инфекциозно заболяване, характеризиращо се с клинични симптоми на гастроентерит с дехидратация и остър тежка интоксикация.
Вид на Vibrio холерният има биовар 4: холерният, eltor, Протей (Мечников холерният), albensis (светлинен Vibrio). Холерата предизвиква биовар 2: холерният и eltor. Vibrio холерният monotrih много гъвкави, изискващи PH, нараства с алкална среда, има висока биохимична активност. Във връзка с три uglevodam- захароза, маноза и арабиноза всички Vibrio са разделени в 8 групи (Heiberg). Холерният eltor биоварианти и принадлежат към група Heiberg: разцепва в киселинен газ без захароза и маноза и арабиноза разцепва.
Вирулентността на V. холерният се дължи на два токсини: ендотоксини и екзотоксини. Водеща роля в патогенезата на заболяването играе екзотоксин-токсин гени. Той причинява цитотоксичен ефект -poteryu телесни течности и соли на натрий, калий, което е основната причина за смъртта на пациента и algida.
Диагностика на холера, проведено бактериологичен метод. Материалът за изследването са фекалии, повърнати материи, хранителни стоки и др трупен материал.
Хранителна среда за отглеждане на Vibrio холерният: 1% пептон вода алкални, агар TTSBS сряда.
Самостоятелна работа на студентите.
Скица холера тетрадка верига микробиологична диагностика.
В първия етап в изучаване тестов материал петна на оцветени по метода на Грам и "смачкани" и "висящи" спад, и след инокулира с 1% пептон алкална вода и твърда хранителна среда.
За да се натрупват култура пасира до нов материал пептонна вода и отново върху носителя на плоча. Разпределяне на чиста култура.
Възстановеният култура се идентифицира чрез морфологични и багрилни (микроскопия намазки оцветяват чрез оцветяване по Грам), културни, биохимични и антигенни свойства.
Серотипове Vibrio холерният определя аглутинация реакция на стъкло с аглутиниращ серуми Inaba, Ogawa, Gikoshima.
Биохимични свойства определя въглехидратни: захароза, маноза, арабиноза.
Проучването на лекарства за предотвратяване и лечение на холера.
Изпълнение на плана на клиничното изпитване.
Схема 4. Микробиологична изследвания в холера
Изпражненията, повръщане, жлъчката, anatomopathological материал, вода и др.
По този начин, идентификация на културите се извършва в 3 етапа: 1) установяване на тяхната принадлежност към рода Vibrio; 2) да ги разграничи от Vibrio холера в RA О- серум чувствителност към специфичен фаг и други тестове; 3) се определят свойствата на видове култури.
Окончателният отговор на изолация и идентификация на изолирани култури дават 36-48 часа.
III. Express - диагностични методи.
Обездвижване на Vibrio холерният холера серуми.
Методология: когато са поставени V. холерният в имунни серуми (съдържащ антитела срещу V.cholerae), те губят мобилност (определено в "виси" и "смачкани" капка).
IFA (имунофлуоресценция реакция).
Методология: Съставите от изпитваното вещество се обработва с флуоресцентен холера серум и се изследват под флуоресцентен микроскоп.
Положителен към резултатите откриване дори в единична препарат вибриони с ярко жълто-зелен луминисценция под формата на блестящ джантата периферно клетки.
ДНК - диагностика - използването на молекулярни генетични методи - PCR - полимеразна верижна реакция.
IV. серологични методи
Те са вторичен метод и се използва за ретроспективен диагноза холера, както и за идентифициране и оценка на напрежението vibrionositeley инфектирането и postvaccination имунитет. Serodiagnosis извършва спиране на РА или IHA (непряка хемаглутинационна реакция) с еритроцитите diagnosticum.
Реакционната смес се поставя на панел плексиглас, в която Lune приготвени разреждания на серум, към който се прибавя 0,5 мл суспензия на 3% от еритроцитен diagnosticum.
Положителният резултат - червените кръвни клетки се утаяват под формата на "чадър".
Отрицателният резултат - червените кръвни клетки се утаяват под формата на "бутони".
Таблица 11
Препарати за профилактика и лечение на холера
Въпроси за самоконтрол:
Посочете таксономия (семейство, род, вид) холера.
Какви са морфологични, багрилни и културни характеристики на Vibrio холерният?
Биохимични свойства на холера. Какво е "триада Хайберг"?
На какво се основава на разделянето на V.cholerae серовара?
Тестове разлики биоварианти V.cholerae.
Какво токсини образуват Vibrio холерният?
Източници и начини на холера инфекция.
Какви правила трябва да се спазват, когато правите, изпращане и учебен материал по подозрения холера?
Възможно ли е да извърши проучване на холера в конвенционалните лаборатории. Ако не, защо не?
Разлики от вибрион холера вибрион холера.
Какви са лекарства, използвани за специфична профилактика и лечение на холера.
урок 7
Заключителната сесия в раздела: "микробиологична диагностика на чревна инфекция"
Предназначение: за контрол на знанията на студентите по тест, разработен в класовете на ниво отдел 1-2.
урок 8
Относно: микробиологична диагностика на стафилококови инфекции. Бактериологични изследвания гной (Ден 1)
Цел: 1.Izuchit методи за микробиологична диагностика на стафилококови инфекции.
2.Oznakomitsya със специфични методи за профилактика и лечение на стафилококови инфекции.
Сред големия брой кълбовидни бактерии широко разпространени в природата, само няколко са патогенни за хората. Възпалителни процеси, причинени от тези микроорганизми обикновено са придружени от образуване на гной, при което те се наричат гноен или гноен коки.
Стафилококи (Staphylococcus) - кръг коки, се намира в културата под формата на купчини наподобяващи гроздове и патологична материал - във формата на малки групи от няколко коки; неподвижни спори имат не, не образуват капсули, Грам-положителни.
Сред не образуващи спори на бактерии Staphylococcus най-устойчиви на различни физични и химични фактори. Те са факултативни анаероби, но е по-добре развит в аеробни условия. Притежават значителна химическа активност, редица разграждат въглехидратите втечни желатин. Диагностична стойност има способността да ферментира глюкоза и манитол в анаеробни условия. На повърхността на твърда хранителна среда форма кръгъл, изпъкнал, пигментиран (златен, бледо жълто, лимон жълти, бели) колонии с гладки ръбове; в течна среда се получи равномерно мътност. В лаборатории използват стафилококи способност да пролиферират в среда, съдържаща големи количества (6-10%) натриев хлорид. В такива среди, други бактерии не растат, в резултат на физиологични среди са избираем за стафилококи. род Staphylococcus включва 19 вида, от които само три околната среда, свързани с човешкото тяло: S-ауреус - Staphylococcus ауреус, S. Epidermidis - Staphylococcus Epidermidis и S. saprophyticus - Staphylococcus saprophyticus. Заболяване, характеризиращо се с различни клинични прояви, защото златен, епидермален по-малко, и дори по-рядко сапрофитни стафилококи.
Вредният ефект върху клетки и човешка тъкан осигури стафилококови токсини и ензими.
Стафилококус ауреус могат да отделят редица токсини, по-специално Leukocidin, която има разрушителен ефект върху левкоцити. Хемолизино са лизиране ефект върху червените кръвни клетки.
Възникване на стафилококова хранителни отравяния, свързани с естеството на действието на ентеротоксини. произведени от Staphylococcus Aureus. В патогенезата на стафилококови инфекции играят важна роля exoenzymes:
- plazmokoogulaza извършва съсирване на плазма;
- хиалуронидаза насърчава стафилококи в тъканите;
- Lecithinase разрушава лецитин, част от клетъчните мембрани, причинява левкопения;
- fibrinolizin разтваря фибрин ограничаване локална възпалителна фокус, като по този начин допринася за обобщение на патологичния процес.
Стафилококите са широко разпространени в околната среда - въздух. прах и други подобни. г. При хора, те са винаги на кожата, както и комуникация с външни кухини (перорални и назални) като безвредни жители. В случай на нередности в цялостния организъм или увреждане на кожата и лигавиците стафилококи може да повлияе на всеки орган и всяка тъкан.
самостоятелна работа
Бъдете посока текст на гной в бактериологична лаборатория.
Графика микробиологично изследване на заустване гноен, кръв.
1-дневно изследване на гной с хронични възпалителни заболявания:
а) приготвя намазка, оцветяване по Грам, promikroskopirovat;
б) да културата е в VSA среда или метод кръвен агар на удар;
в) РПИГВП "Определяне на стафилококова превоз на учениците." Вземете материал от лигавицата на носа и гърлото един от друг със стерилен памучен тампон и произвеждат култури на петриева паничка с VSA или плочи с кръвен агар.
ж) да записва в протокола на изследването (Ден 1)
Схема 5. микробиологична проучването с стафилококова
кръв в сепсис
гной, ексудат, храчки, слуз на устата, носа и други.
Намажете, петно от посевния
Грам на VSA върху кръвен агар засяване на захар бульон
Стъпка 1 Отговор
Характерът и хемолиза
Свързани статии