Има следните основни методи: микроскопичен, микробиологични, експериментално-психическо, имунологични.
1.Mikroskopichesky - изучаването на микроби в боядисани и небоядисани (роден) състояние, с помощта на различни видове микроскопи. Методът позволява да се определи формата, размера, местоположението, и структурните елементи, свързани с цвят на микробите. Понякога характерните морфологични характеристики могат да определят вида на микроби (гъбички, протозои, някои бактерии).
Експериментална (биологични) - замърсяване с микроби в лабораторни животни. Методът позволява:
изолиране на чисти култури от бактерии, лошо отглеждане на хранителна среда;
изследва патогенни свойства на микроба;
получаване имунобиологични лекарства за специфична превенция, диагностика и лечение.
4. имунологично (при диагностицирането на инфекции) - изследване на реакцията на приемните специфични реакции при контакт с микроби.
В отговор на получаването на микробни частици (антигени, Ar) имунната система генерира специфичен протеин молекула - антитяло (АТ), способни за създаване на данни ен Tigeneh специфично взаимодействие с комплекс образуването на AH + АТ. Na откриване на такива комплекси на базата метод. Разграничаване 2 вида методи: серологичен метод и алергичен метод. Серологично метод се основава на AT откриване в кръвта или други телесни течности по известни микробен AG (диагностика). Алергичен метод се основава на откриването на свръхчувствителност (алергия), за да влезе отново в микробен организъм алергена (АН). Наличието на имунен отговор (като AT или алергии) показва предходната среща на тази микроби: може би човекът е бил болен със съответно в fektsiey предварително ваксинирани или болен в момента.
Често образуване на комплекс AG с известна в + при определяне на формата на чиста култура от неизвестен микроби, получена по време на изследването чрез микробиологичен метод (идентификация-Katsiya антигенна структура).
Морфология и физиология на микробите метод микроскопско изследване
• Светлинен микроскоп със система за потапяне
За проучване на микробите под микроскоп изисква увеличение от около 1000 пъти. Следователно, потапяне микроскопи, използвани от системата ( "потапяне" - потапяне) Съставът на системата за потапяне включва потапяне обектив (х 90) и потапяне масло, което запълва междината между изследвани обекта и предната леща на обектива на потапяне. Както в рефрактивния индекс на стъкло и масло са близки, се избягва загуба на светлинните лъчи поради тяхното отхвърляне, и по този начин се създаде оптимално осветление на зрителното поле. По избор-концентрации в отклонението на светлинния лъч и също поради изключително малък диаметър на предната леща на обектива на потапяне. Когато микроскопа е необходимо да се помни, че лещите "суха система" не са предназначени да бъдат потопени в масло, което може да ги накара да станат безполезни. Микроскопия с потапяне система позволява да се проучи микробите са убити в Oak Rushen състояние (тяхната форма, размер, относителната позиция на структурата на бактериалната-стойката-позиция) и да се разграничат една от другите микроби.
Способността на бактерии оцветяват чрез различни методи, посочени багрилни свойства.
В някои случаи (изследване на морфологията на гъбички, протозои и други относително зърнена ционни съоръжения в живия небоядисана държавата) с помощта на светлинен микроскоп, с по-тъмен зрително поле (цели х 40 или х 8) за микроскопия, препарати са "смачкани капка" или "висяща капка" на.
Изследване на морфологичните характеристики на микроби (дължина, ширина, форма) често се извършва за да се определи вида им. Измерванията на клетъчните микроорганизми могат да варират от фракции на микрометъра (микрона, 10 -6 m) до няколко десетки микрона. Малки бактериални клетки с размери 1-2, по-големи от 8 до 12 микрона или повече. За измерване с помощта на окуляра-микрометър (вградена в окуляра на прозрачен линийка).
• Darkfield микроскоп (ultramicroscope)
Отличителна черта на този микроскоп е наличието на тъмно поле кондензатор (кондензатор-параболоид), които концентрати светлинен лъч и го изпраща към страната на обекта на изследване. Поради факта, че преките лъчи са отрязани централната диафрагма кондензатора, и полегатите лъчи, излизащи в периферията на диафрагмата, не попадат в обектива ultramicroscope тъмно зрително поле. Когато осветява от лъчи наклонена живата и неодушевени частици включително микроби, някои от най-изрази лъчи влиза обектива; докато има ярка светлина от частици на тъмен фон. Temnopolnuyu микроскопия се използва за проучване на мобилността на микроби, наблюдение на много тънки обекти (спирохетни) при получаването на "натрошен слама."
Този вид светлинна микроскопия ни позволява да се изследва структурата на живот, неоцветени бактериите (прозрачни обекти). Когато светлината преминава през неоцветени микробни клетки, за разлика от оцветяват, амплитудата на светлинните вълни не се променя, а само се променя тяхната във фаза, която не може да се открие от човешкото око. Промяната на фазата се случва по време на преминаването LAN-позиция с по-голяма оптична плътност (рибозом Нуклеоидът). Специални устройства: фаза кондензатор и цели с фазови пръстени позволяват да конвертирате невидими фаза промени във видима амплитуда.
Принципът на работа на микроскопа се основава на явлението луминесценция. За изо-картографиране обекти се третират флуорохроми, които, когато се облъчва от страна на цветен спектър светлина с голяма дължина на вълната (зелен, оранжев т.н.) вълнуваща до дължина на вълната. В флуоресцентен микроскоп изучаване живеене, така и мъртви микроби (с "сух" или потопяеми системи). Флуоресцентна микроскопия осигурява контраст цвят-ING изображението, за да открие малък брой микроби, изучаване на тяхната структура и съвместно да стане, използван метод химически имунофлуоресценция.
Това устройство се различава от леки микроскопи на значително по-голяма разделителна способност SPO-lities (0.001 мм) чрез използване на светлина, вместо на електронен сноп, но вместо стека оптичен lyannyh - електромагнитни лещи. учебни вируси електронен микроскоп, макро-ултрастурктура убити.
Готвене подготовка за микроскопско изследване
Грам оцветяване.
Стъпка 1 - получаване на намазка.
предметното стъкло на уволнен газ пламък горелки. Wax молив отбележете границите на бъдещия ход в кръг с диаметър 1-2 см. И остави чашата на масата. Солна контур-калциниран прилага към средната окръжност малък спад на стерилен изотоничен разтвор на натриев хлорид (IPC). След това, този спад е малко количество бактериални култури tscha-telno емулгира и разпределя тънък слой в кръг. Намазка бульон задънена кръг, приготвени без предварително покриване IPC.
Етап 2 - сушене.
Стъкло остави във въздуха, докато изчезването на влага.
Етап 3 - фиксиране.
Фиксирането се извършва с цел да убие микробите, като ги прикачите към стъклото и да се увеличи тяхната чувствителност към багрила. За определяне на плъзгача (ход нагоре) три-стик dyval пламъка на горелката за 2-3 секунди с интервал от 4-6 секунди. Намазки на гной, кръв, слюнка, оток течност потапяне фиксирани в течността за фиксиране (ацетон, смес Никифоров целта за). Тази фиксация предотвратява брутни деформации на изследвания обект.
Етап 4 - оцветяване.
Има прости и сложни (диференциращи) методи за оцветяване. Прости начини позволява да се прецени размера, формата, разположението и подреждането на клетките. Изискан SPO-soby позволи микробите да се установи структурата и често неравностойно тяхното лечение с боя-Лам. Пример за прост начин може да служи фуксин оцветяване (1-2 минути), метиленово синьо или кристал виолет (3-5 минути) и комплекс - оцветяване по Грам, Romanowsky-Giemsa, Ziehl-Neelsen.
Разнообразяване метод Топ
След оцветяване с този метод някои бактерии са оцветени в тъмно пурпурен цвят (грам положителен Gy +). други - в кафяво-червен (Грам, GR). Същността на този метод се състои в боядисване че Gy + бактерии твърдо фиксирани набор от тинтява виолетово и йод, без обезцветяване етанол. Gr бактерии след избелване dokrashivayut магента.
G + коковидна бактерии
Gr - бактерии коки
Свързани статии