Patologogistologicheskogo обект на изследване е отрязана. Секции могат да бъдат направени от 1-2 микрона дебелина. Най-често срещаните са раздели 6-12 микрона дебелина.
Машини, които са произведени секции, наречен микротомни (гръцки "хилядни." - малки и "тъмни" - аз нарязани).
Най-често срещаните Микротоми са:
1. блокиране микротоми
а) цилиндричен, система "Sartorius";
б) СВТ-микротом 1с термоелектрически охлаждаща маса.
2. тобоган (шейна) микротом.
4. ultramicrotomes различни марки.
Основни части, всяка микротомни пет: 1) рамка; 2) ножодържачът; 3) етап на образец; 4) настройка микрометрично; 5) микротом нож.
Леглото е твърд стабилна база единица.
Притежателят на нож се доставя с инсталацията, ви позволява да настроите наклона на острието.
Етапът се използва за заключване на темата.
Микрон- инсталация служи за автоматично подаване на обекта на острието, за да се получи раздели на необходимата дебелина. Основната част от него е винт микрометър, т.е. с много фина резба.
Микротомни ножове се предлагат в три степени:
А) нож от много мека стомана, консумирана за рязане на парафинови блокчета;
B) острие на твърда стомана - за рязане и tselloidinovyh парафинови блокове;
C) нож от много твърда стомана, се използва за производство на замразени секции, има профил на равнобедрен триъгълник.
Клас стомана посочен върху дръжката на ножа.
Работата по замразяване микротом
На замразяване на микротомни филийки са направени с обекти, които имат достатъчно компактност.
Предимства замразяване техники mikrotomirovaniya:
1) липса на необходимост за изливане;
2) скоростта и лекота на производство секции.
Недостатъци на техники за замразяване:
1) невъзможността да се получи серийни секции;
2) невъзможност за получаване на тънки секции (минимална дебелина от 10 микрона);
3) малки и свободни обекти не могат да бъдат намалени.
Секциониране на замръзване микротом
1. Намалете етап на позиция, в близост до микротомни дръжките.
2. Поставете парче материал на масата.
3. Wet парче вода.
4. Прикрепете микротом нож дръжка гнездо марка "C".
5. Повишаване на масата, докато докосне парче от острие на нож.
6. Комплект дебелина секции регулатор.
7. Open бутилка клапан.
8. Freeze парче, докато звука на звънене, когато подслушвани по него.
9. Изравнете повърхността на парче.
10. Вземи секции и да ги преместите в чаша вода.
11. С рязане края крана balpona.
12. Премахване на ножа, канализацията, сложи на мястото на съхранение.
13. Отстранете част от сцената.
14. Почистете сухо част микротом.
Работата по Sannomiya микротом
Микротомни нарича шейни като част от своята ход в специални вдлъбнатини и слайд като шейни.
Чрез промяна на проба етап шейни микротом подходящ дизайн може да се адаптира за всякакви режещи блокове и така наречения универсален микротом.
Поставен върху една матрица единица се изважда от 70% етанол и стабилно фиксиране в obektoderzhatele шейна микротом. Използвани "А" тип ножове и "Б". Ъгълът на наклона на острието и се регулира в зависимост от плътността на блок, по-мекия обекта, на остро ъгъл. Ножът и обекта редовно се навлажнява с 70% етанол (мека четка). Ако е необходимо, изправете секции на острието леко натискане четка или пръст. Разширените секции прехвърлят в блюдо на Петри, напълнена с 70% етанол. В някои случаи, за добри изправяне секции могат да се прехвърлят от етанол на 70% в дестилирана вода, когато те са в съответствие дължи на рязката промяна в повърхностното напрежение.
Основната особеност на този микротом е фиксирано положение и движение бръснача на обект за бръснача на всяко парче, което осигурява серийни секции.
Режещи ножове се използват парафин блок марка "А" или "Б". Блокове поставили на кубчета, фиксирани в obektoderzhatele. Вземете един нож и да спестяват от наклона. Knife укрепване или перпендикулярно dlinniku микротом, или косо. Индивидуално блок с нож така че да има разстояние 0,5-1 мм между тях. Скалпел намали излишък парафин и микротом ножа - повърхностните слоеве на материал. Микротомни движение нож трябва да бъде гладко и бързо.
Ако материалът е добре напълнена, правилно избрани режещи ъгли и наклон нож остър, срезовете се поставят върху повърхността на перката във формата на лента.
Когато неправилни резитба блокови секции имат ъглови контури, ако разкъсан чакъла нож. Получените срезове с бръснач се отстранява с мека четка или игла дисекционен (без докосване на острието!) И се прехвърля в топла (40 ° С) вода се вари, страната, която е обърната към острието. В вода те се изправи, след обезмаслено стъкло, покрита с адхезив (залепване техника см. По-долу) в единия край е потопен в чаша вода, към него игла дисекция подава парче и постепенно извади от водата. Един може да слайд стъкло вземе рязане при 45 ° ръб нарязани притиска към стъклото и след това заедно с нарязани изваден от водата. Предметните стъкла с разпространението им парче osushivayut гладка филтърна хартия (фиг. 9.10).
Замразени срези бяха подложени tselloidinovye и оцветяване без предварителна обработка.
Парафинови срези бяха залепени за стъкло и deparafiniruyut.
Най-често използваният метод стикери парафинови блокчета е така наречения метод "японски", използвайки яйчен белтък.
Рецепта самозалепващи етикети за съкращенията
Яйчен белтък протеин - 2 ch.Glitserina - 1 ch.Kamfory (тимол) - 1 кристал (антисептично средство).
1. обезмасляване слайдове проведени чрез третиране на повърхността: етер-алкохол или сапун.
2. Нанесете една капка лепило, разтрива с пръст по повърхността на пързалката до сухо.
3. коагулация на протеин към пламъка на горелката.
4. нарязани, добита от водата към сухата стъклото или дялът се поставя върху предметно стъкло, под нея и се изсипва пипетирайте няколко капки топла вода. С тази унищожени изключване сгъва.
5. суши парче върху стъкло, при стайна температура или в пещ.
Поставени секции могат да се съхраняват за неопределено време период.
Депарафиниране е премахването на парафин от лепени разреза.
Депарафиниращ се извършва непосредствено преди боядисване.
1. Стъкло с нарязани попада в парафин разтворител (ксилен, толуен, бензен) за отстраняване на восък джанти около раната.
2. Отстранете разтворителя чрез потапяне на стъклото в разрез на парафин с РЕКТИФИЦИРАНАТА дух или абсолютен алкохол.
3. Изплакнете чашата с вода.
Свързани статии