ДНК влиза в ядрото. Въпреки това, вирусни вектори имат редица недостатъци, те са скъпи и често са ограничени клониране капацитет, който не регулира експресията на терапевтичен ген чрез тъканно-специфични последователности. Освен това, вирусните протеини могат да предизвикват възпалителна реакция. премахване многократно приложение на вектора. Затова са разработени невирусни системи за доставяне на ген. [C.499]
Ретровирусният вектор може да включва само някои 10000 Mon След като завърши в ръцете на вирусен вектор. те могат да заразят съответните клетки мишени. например, фибробласти, експресиращи съответните повърхностни рецептори. [C.585]
Вирусните вектори не са широко разпространени. Характерна особеност на еукариотни вируси е компактна структура на генома и почти пълното отсъствие на гени. които не са от съществено значение за тяхното развитие. По това клониране с тях чуждата ДНК е техният дефицит и изисква използването на помощни вируси. [C.379]
Очевидно е, вирусни конструкции имат уникални свойства по отношение на симулация на някои изпълнения на генна терапия. Въпреки това, класически вирусни вектори може да се използва директно за дългосрочни задачи генна терапия (с изключение може би някои случаи терапия лимфо-пролиферативни заболявания), дължащи се на действието на трансформиране на потенциални собствени транс-действащи фактори. което води до нарушаване на основните изисквания за безопасност на лечение. Разбира обещаващ тенденция в областта на науката е да се разработят нови и съществуващи тестване вектор системи, транс-действащи фактори са водачи, които до голяма степен губят способността преобразяващата (онкогенен потенциал). Въпреки това, дори и в този случай, в момента е трудно да се оценят адекватно тяхното въздействие върху живия организъм. [C.225]
Липсата на живо рекомбинантна ваксина с вируса е, че ваксинираните лица с намалена имунен статус (например СПИН) имат T5gzhelaya вирусна инфекция може да се развива. За да се реши този проблем, може да бъде включена във вирусен вектор ген, кодиращ човешки интерлевкин-2, който стимулира отговора на Т-клетки и ограничава разпространението на вируса. [C.241]
RSlon С сДНК добавя ген може да има заразна-ност и, следователно, те са заразени с патентован растение. Ако ген сДНК добавя не инфекциозност, вирусният вектор може да бъде транскрибирана за получаване на РНК, която след това се използва за заразяване на растенията. [C.514]
Е описано в т. 19, метод за клониране външната последователност nostey в бактериофаги или плазмиди могат да бъдат използвани за въвеждане на гени в еукариотни вируси. Чрез извършване на необходимите паузи рестрикционни ензими и последващото асоциирането на фрагменти, получени глобин, инсулин и други източници на множеството гени са включени в еукариотни вирусни вектори. Един от най-често вектор-8U-маймунски вирус 40, който може да се реплицира в клетки на редица бозайници. Нови гени могат да бъдат вкарани в региона началото или края на генната транскрипция единица на вируса. Тяхната експресия включва етапа на образуване на РНК-predshe stvennika, 5 крайната на които обикновено са на разположение вирусни последователности. последвано от последователността на вмъкнатия ген. Такова РНК се подлага на нормално снаждане, както е показано на фиг. 26.8. [C.325]
Използването на тази цел вектори като ASE-удобно, в смисъл, че е доста лесно да се инсталира на няколко копия на вируса (до няколко стотици една клетка). Това обяснява успешното използване на вектор на базата ASE за висока експресия на много протеини [1]. Недостатъците на вирусни вектори са свързани с ограничен брой клетъчни линии. в която вектор репликацията. и нивото на експресия и поддържането на състоянието на епизомален структура обикновено зависи между другото и на специфични ДНК последователности клонирани във вектора. Алтернативен метод за увеличаване на броя на копията, описани в тази глава осигурява за избор на клетки за усилване на векторните последователности след неговото интегриране в ДНК на клетката гостоприемник, този подход има не основните ограничения за използването на конкретен клетъчен тип. Когато клетките могат да бъдат избрани с този подход всякакви желани характеристики, като например възможността за модифициране на специфичен протеин, продукт или разпознаване на специфична ДНК регулаторна последователност. [C.239]
Инфекция predimplantirovannyh ембриони рекомбинантни ретровируси - една сравнително проста процедура, която не изисква скъпо оборудване. Въпреки това, всеки ген от интерес, трябва първо pereklonirovat във вирусния вектор и рекомбинантен конструкт влезе в подходящи клетки, за да се получи клетъчна линия. производство на рекомбинантни инфекциозни вирусни частици. Тук обаче трябва да се има предвид, че размерът на вложката. който е способен да приеме вирусен вектор. е ограничено (около 10 m. п. п.) В допълнение, ДНК от интерес може да съдържа [c.309]
Вектори, при заместване 8 40DNK късни гена. Първите опити за изграждане на вирусни вектори са били извършени с вируса на SV40, която не е в ДНК на дългите спейсери. Вирусния геном се заменя със chuzhDNK края или началото на гени. Конструкциите бяха заместващи вектори с капацитет не повече от 2,5 кб и да се работи с тях изисква помощник вирус. [C.398]
Друг подход, който дава надежда, за да се повиши ефективността на генен трансфер. е използването на ретровируси като вектори. Основното предимство на тези вектори, е, че те са в състояние ефективно да заразят голям брой различни клетъчни видове. Общата форма на вирусния вектор. използвани за трансгенеза е показано на фиг. 66. ретровирусни вектори осигуряват интеграция на едно копие на трансгена в ембрионите на различни етапи на развитие. Първите експерименти. демонстриране на изпълнението и наследство в мишки екзогенно въведения мишка Молони левкемия вирус (MoMLTV), бяха проведени още през средата на 70-те години на миналия век с Jenisch на персонала [c.191]
Тези експерименти накарали учените да предполагат, че употребата на определени сегменти от вирусния геном, както съм plifitsiruyuschih вирусни вектори. На първо място изучава възможността за въвеждането на дефектен вирус генома на чужда ДНК. Speth F и Н. Frenkel (1982) вградена част от Bgal-rKS7 плазмид (производно на [c.388]
За експресия на клонирани гени в животински клетки, два вида вектори на базата на един от тях се намира SV40 ген бяха конструирани, а другият ген patgillomavirusa говеда (BPV). Основни свойства на тези две вирусни векторни системи са описани в т. 5.7. Папиломавирус-базирани вектори са особено полезни за количествата синтез bolschoy на протеин и SV40-базирани вектори се използва в много експерименти. [C.360]
Свързани статии