ТЕХНОЛОГИЯ получи култура семена от лактобацили
IV Тихонов, Yu Ovsyannikov, VG KOMOSKO, SA Швеция, VE романи
FSEIHPE "Московския държавен академия по ветеринарна медицина и биотехнологии кръстен KI Скрябин "
През последните години се наблюдава рязко влошаване на епидемията и епизоотичната обстановка в България. Увеличаването на съотношението на дисбактериоза, които се дължат на замърсяването на околната среда, неконтролираното използването на антибиотици във ветеринарната медицина и различни химиотерапевтични средства, хормони и т.н. както и стресови фактори и условия, намаляване на качеството на питейната вода и фуражи.
Смята се, че безспорен дисбактериоза при селскостопанските животни и птици се разпространи, тъй като при липса на навременно коригиране на normomikroflory много вероятно да ги развива тежък, повтарящи се инфекциозни болести, имунна недостатъчност, различни allergopaty, анемия, стомашно-чревни и други заболявания, включително изоставането Prywes , намаляване на ефективността на производството.
В голяма степен непречистени дисбактериоза опасно, както за младите и reproproduktivnogo добитък селскостопански животни и птици. Растежът на инфекциозни заболявания на бактериални, вирусни и други етиологии е до голяма степен доминиран от по-ниско ниво на неспецифичната резистентност на животни и птици ™ организма при изразени dysbiotic нарушения.
Във връзка с по-горе, за профилактика и лечение на инфекциозни заболявания и дисбактериоза селскостопански животни и птици в момента и в близко бъдеще са приоритети, ветеринарната медицина. Тяхното решение е възможно, ако изпълнението на набор от подходящи за борба с епизоотични мерки, включително строителство, серийното производство и въвеждане на нови терапевтични и профилактични средства за предотвратяване и лечение на инфекциозни заболявания и disbacterioses, които отговарят на съвременните международни стандарти. В този случай, от голямо значение да се гарантира ефективността на системата от тези мерки е адекватна и единна методика за използване на подходящи терапевтични и профилактични препарати. Тези, които от своя страна налага подготовката, приемането и да доведе до широк спектър от ветеринарни специалисти на информация и методологически и референтни документи за посочените по-горе въпроси.
Очевидно е, необходимостта от задълбочаване на работата по проблема с пробиотици в аспекта на търсенето на нови щамове на микроорганизми с пробиотични действие, подобряване на съществуващите и разработване на нови лекарства от този тип, за да се подобри тяхната ефективност.
С оглед на малкия брой публикации по eubioticheskom действие на млечнокисели бактерии на вътрешния литературата са действителни изследвания на механизмите на тяхното антагонистично действие и условия за съхранение, поддръжка и амплификация на полезни свойства. Получените резултати могат да служат като основа за развитието на съвременните пробиотици висока производителност, базирани на млечнокисели бактерии за ветеринарни цели.
В процеса на извършване на научни изследвания в тази област е необходима за идентифициране на щамове на млечнокиселите бактерии, да упражняват максимална способност да потискат развитието на ентерично, гноен и kolipatogennyh микроорганизми, изследва механизма на тяхното антагонистично действие, условията за поддържане и запазване на щамове. За да се определи оптималното съотношение на подбрани щамове в продукта, за да се разработи метод за получаване на лекарството, да му осигурява необходимите работни характеристики и поведение на процеса срещу него на селскостопански животни и птици.
Анализ на литературата при избора на микроорганизми и развитие на технологията за получаване на лекарства с пробиотик активност и тяхното използване е оставена да се определят основните изследователски области:
- търсене и оценка на биологичните свойства на нови щамове от микроорганизми с пробиотичен ефект;
- развитие на тяхна основа на свързана култури;
- разработване на методи за получаване и поддържане на референтните и работни култури, култивирани щамове от микроорганизми с пробиотичен ефект;
- развитие на течната среда, осигурява интензивно лактобацили натрупване на биомаса през периодични динамичен хомогенна дълбока обработка;
- учебни модели на растеж бактериалната популация при аеробни и анаеробни условия;
- избор на оптимални параметри потопени култивиране на микроорганизми с пробиотични действие, за да се запазят биологично полезни свойства;
- Развитие на състава на лекарството с пробиотик действия въз основа на млечнокисели бактериални щамове, евентуално в комбинация с други бактерии;
- Резултат За приготвяне на храна за репродуциране технология с пробиотични ефект;
- проучване на специфичната безопасността и токсичността на лекарството върху лабораторни животни;
- проверка на ефективността на използване на пробиотични разработен от асоциацията на практика животновъдството и птицевъдството.
Материали и методи. Ние използвахме щамове микроорганизми от рода Lactobacillus (Lactobacillus Plantarum №3 и Lactobacillus buchneri №4) от колекцията на култури изследователски институт по микробиология на Руската Федерация.
За култивирането на лактобацилите щамове за оценка на техните биологични свойства получават хранителна среда на базата на носители MPC-1 и IFA-4 в съответствие с процедурата, описана в FS да "Лактобактерин сух".
Засяване работа култура от млечнокисели бактерии са получени чрез серия от пасажи изсъхне позоваване на културите към стандартно културална среда MRS. В последния етап се получава агар култура промиване това криопротектор, последвано от замразяване и съхранение при -20 ° С
Отглеждането на лактобацили се провежда в бутилки 20 литра с течен IFA-1 хранителна среда. Културите Lplantarum L.buchneri в бутилки и се отглеждат чрез периодично дълбока обработка с аериране без разбъркване при температура (37 ± 1) ° С в продължение на 48 и 72 часа.
Контролните среда се извършват върху физико-химични и биологични показатели.
Резултатите от изследването. За да се подготви работен семена култури на лактобацилите щамове, използвани svezhepereseyannuyu референтни щамове на лактобацили култура на MRS хранителна среда на. За тази линия са избрани бактериални колонии, изолирани от твърдите хранителна среда ПСС, суспендирани във физиологичен разтвор, и се субкултивират в MRS течна среда във флакона. Културите се инкубират при температура 36 38 ° С в продължение на 48 часа. след хранителни култури бяха субкултивирани върху матрака скосен твърда хранителна среда IFA в размер на 5,0 мл култура в един матрак. Култури в матраци инкубират при температура от 36. 38 ° С за 48 часа за щам L.plantarum 3 и 72 часа за щам L.buchneri 4. След инкубационния период на агар култура се използват за получаване на култура работен семена. За тази цел ROE формира на микробен тревата се промива с 10,0 мл 1,5% -ен разтвор poliglyukina.
Предвид високата биохимичната активност на лактобацилите щамове, традиционна рецепта защитна среда чрез замразяване (желатин захароза) не могат да бъдат използвани от нас. В това отношение е приложен от неутрално и достатъчно проучени криопротектор polyglukin.
Приготвеният микробен суспензия с polyglucin разпределя в 5 мл ампули и се съхраняват при -20 ° С
Резултатите от оценката на оцеляване на лактобацилите щамове на състава на прясно посято и постоянно работни култури са представени в таблица. 1.
Анализът на данните, представени в таблицата. 1, показват, че микробната култура на Lactobacillus щамове в състава на избрания контакт криопротектори има достатъчно висока устойчивост на замръзване и съхранение при -20 ° С Най-голям брой живи микроби, което записахме един месец на съхранение, използвани култури в замразено състояние. В бъдещата работа, ние използвахме културата работи култури, съхранявани при -20 ° С в продължение на б месеца.
Характеристики на прясно приготвени и се съхраняват при -20 ° С засятата работни култури на лактобацилите щамове (X ± Ig5, п = 5)
Въз основа на характеристики и начина на приложение на пробиотичните действие ветеринарен необходимата технология за получаване на състава на лекарството, което ще позволи да се запази поне една година висока антагонистична активност и способност киселина образуващ да бъдат безвредни, удобно при употреба. Резултатите от изпитването са лактобацили щамове в производството на домашни птици, получени в хода на проучвания показват, че минималната концентрация на живите клетки Lactobacillus в крайния формата на препарата трябва да бъде най-малко в ZhYu9 мл.
За дадена концентрация на терапевтичен и профилактичен технология състав трябва да включва серия от последователни стъпки за натрупване на достатъчно лактобацили биомаса. Технологичният процес на натрупване на биомаса от работата култури, отглеждани в нашето изследване се състои от следните етапи:
- Аз получаване на семена култура пасажи;
- II получи семена култура пасажи.
Данните, представени в таблица. 1 показва, че щамове на Lactobacillus бактерии в състава стабилизирани замразени култури имат достатъчно висока преживяемост и може да осигури необходимата концентрация за получаване на семена от култури I пасажи.
За пренасяне на инокулация култури I работа култури от лактобацили след размразяване флакони субкултивирани върху твърда растеж средни скосени MRS-4 матраци. Културите се инкубират при температура (37 ± 1) ° С в продължение на 48 часа. Концентрацията на лактобацилите в семенната култура се определя чрез преброяване на клетки в камера Горяев.
Определяне резултати от лактобацили концентрация в семена култура пасажи I показани в таблица. 2.
Таблица 2
Концентрацията на клетки в култури от млечнокисели бактерии, култивирани в матраци I субкултивиране скосен агар
Свързани статии