Собствениците на патента RU 2320355:
Черно Людмила Egorovna (RU)
Изобретението се отнася до микробиология и се отнася до производството на autostrains биомаса лактобацили. Методът включва взимане на проби от нативния материал. Засяване проучвания не по-късно от 2 часа, след което пробата е взета без разреждане на селективна културална среда. Lactobacilli растат и да произвеждат чисти култури от млечнокисели бактерии, млечнокисели бактерии, получени чрез наблюдение на биомасата. , Втори пасаж избран лактобацили. Grow получава чиста култура на лактобацилите в течна селективна среда, последвано от прибавяне на консерванта, който се използва като желатин захароза среда в съотношение 1: 1, съответно, и контролира получава течен биомасата. Изобретението осигурява течни лактобацили биомаса клетки с антигенна структура, свързани с чревните клетки на потребителите и подобряване на получената биомаса.
Изобретението се отнася до областта на микробиологията и медицината и се отнася до производството на биомаса autostrains лактобацили течност, използвана за коригиране и поддържане на чревната микрофлора и половата система, както за профилактика и възстановяване на микрофлората в дисбактериоза.
Лактобацилите са част от нормалната флора, изпълняват важни функции като участие в смилането и усвояването на храна от повишаване на мембранната храносмилането и използване на хранителни субстрати. Генериране време на живот млечна киселина, водороден пероксид, лизозим, laktolin извърши антагонистична функция срещу патогенните и условно патогенни микроорганизми.
Лактобацилите са единствените представители на нормалната флора инхибират растежа и развитието в червата на гнилостни бактерии и патогени на чревни инфекции, включително агенти на дизентерия и салмонелоза.
Лактобацилите са основен микробиологичен връзка образуване резистентност колонизация (защита) в стомаха и тънките черва.
Метод за получаване на препарат за лечение на стомашно-чревни нарушения, който включва култивиране на щам че Lactobacillus Bulgaricus в среда на култура, получена от соя анаеробно при 35-42 # x000B0 С, последвано от сушене на културата чрез добавяне на захар, гранулиране и таблетиране на получената смес ( AS СССР №619187, обн. 15/08/78 град).
Въпреки това, описаният метод предлага използва за лечение на стомашно-чревни заболявания, само един вид на млечнокисели бактерии, които не принадлежат на същото име, отнасящи се до чревни лактобацили лекарство потребителя (понастоящем изолира и изследван 67 вида млечнокисели бактерии) и не си автохтонни микрофлора. Липса лактобактерии в повърхностните адхезини свързани мукозни клетки на стомашно-чревния тракт, не е благоприятна за присаждане, пролиферация и колонизация че Lactobacillus Bulgaricus.
Освен това, при получаване на бактерии, налични в незадействано състояние, което се достига след удължено замразяване и сушене чрез замразяване се използва в производството на лекарството, това отнема време (2-3 дни), за да се възстанови активността на бактериалната клетка, която намалява ефекта от лечението.
Метод за производство autostrains бифидобактерии и лактобацили, включващ етапите на вземане на проби изпражнения, бактериален растеж и подготовка биомаса от тях (AS СССР №1286212, Publ. 01.30.87 г).
Въпреки бифидобактерии и лактобацили суспензия, приготвена по този начин изисква незабавна употреба и не се съхраняват за повече от 2-3 дни, като се извършва без използване на стабилизатор, който помага да се запази autostrains бактерии в активно състояние за по-дълго време. Не е извършен мониторинг, изготвен спиране на дейността на бактериите, както и липсата на външна микрофлора, която е в противоречие с изискванията на правната документация и не се защитят потребителите от подхлъзване при получаване на суспензия от чуждестранни микрофлора.
изпражнения направени след засяването титруване тестов материал със стерилен физиологичен разтвор, последователно вземане десетократни разреждания до 10 -8. Въпреки това, не посяване се извършва от природния материал, който не е възможно да се получи култура на бифидобактерии и лактобацили за намаляване на тяхното съдържание в червата на по-малко от 100 CFU за 1 г от химуса.
Най-близкото, взети като прототип, е метод за получаване на банка на автохтонни щамове на микроорганизми за възстановяване на чревната microbiocenosis човека (патент България №2126043, Publ. 02.10.99 г).
Този метод включва вземане на проби фекални екскреция autostrains бифидобактерии, лактобацили, Enterococci, Е. Coli, за производство на биомаса, консервиране и съхраняване на живот. Периодично автохтонни породи в биомаса банка възстановява по-късните години от живота. Преди варени autostrains проби периодично (поне един път годишно) се наблюдават за активност, и повторно производствен процес, ако активността се редуцира с повече регулиране.
Въпреки това, при производството на банкови проби се посяване изпражнения с десетократно разреждане след титруване с стерилен физиологичен разтвор, заобикаляйки етапа на засаждане на местни изпражнения. С тази техника изключва възможността за получаване на култури с намаляване на броя им в червата на по-малко от 100 CFU за 1 гр
Отглеждани и избран ограничен брой видове бифидобактерии, лактобацили, ентерококи, Е.коли, въпреки че вече е известно, например, само някои лактобацили около 67 видове. По този начин, вида лактобацили, които не са изброени по-горе, в пробите не попадат.
Не е извършена autostrains наблюдението върху дейността и липса на странична микрофлора, която е неразделна част от производството. Множество повторения на процеса на сушене чрез замразяване на същите предварително получени примерни autostrains намалява биохимична активност и загубата на способността да се придържат и колонизира лигавицата на стомашно-чревния и гениталния тракт.
Ректално въвеждане микробна маса сонда процес рецепция трудно биомаса, не е възможно да се извърши тази процедура в домашни условия. В допълнение, бактерии утаи въведени в дебелото черво, а на стомаха и тънките черва, които обикновено съдържат от 10 3 до 10 4 CFU на лактобацилите в 1 мл химус не се движат изложени. А заедно с лактобацилите са единствените организми, които създават защитата на стомашната лигавица и дванадесетопръстника 12 от тези опортюнистични патогени като Helicobacter, които са причина за гастрит и язва на стомаха.
Предложеният метод за получаване на банков на автохтонни породи микроорганизми е много трудоемко, скъпо и много ограничен кръг от достъпно на потребителите. Той също така не може да се използва в промишлен мащаб, тъй като Това изисква голям брой фризери за съхранение на предварително приготвени проби, както и непрекъсната работа (най-малко един път годишно) с биомаса всяка проба autostrains.
Проблемът се решава чрез предлаганото изобретение е да осигури течен биомаса от Lactobacillus клетки с антигенна структура, свързана чревните клетки на потребителите, подобряване на качеството и увеличаване на получената биомаса Терминът запазване на клетките.
Техническият ефект е да осигури течен биомасата на Lactobacillus клетки с антигенни свързана структура клетки потребителски чревни, получен повишено качество биомаса.
Техническа резултат се постига чрез метод за производство на autostrains биомаса лактобацили течност, съдържаща проби роден материал, посяване на селективна среда, култивиране на лактобацилите, избор на лактобацили и техния контрол, провеждане многократно преминаване култивиране лактобацили получава култура в селективна среда, последвано от добавяне на консервант и контрол на биомаса, получена лактобацили съгласно изобретението, първоначалното посяване в селективна хранителна среда про odyat неразреден роден материал, не по-късно от два часа след вземане на проби, се прибавят към кисели бактерии консервант млечна биомаса, който се използва като желатин захароза среда в съотношение 1: 1, съответно.
Между функции и постига технически резултат има следната причинно-следствена връзка.
Засяване роден материал (изпражнения), без разреждане директно със селективна среда в рамките на 2 часа след вземане на пробата, тя позволява да изберете Lactobacilli дори при малки количества от съдържанието на червата.
Re-култивиране и преминаване чиста култура на лактобацилите, получен в селективна течна среда, последвано от добавяне на консервант в размер на 1: 1 допринася за поддържане на клетъчната активност върху един или повече месеца.
Провеждане на контрол в резултат на течни биомаса гарантират качеството му.
Предложеният метод се провежда както следва.
За autostrains биомаса лактобацили проби роден материал (фекалии) на индивида. Не по-късно от два часа след вземане на проби се извършва неговото посяване, без разреждане върху селективна среда, която се използва като стандарт млечни продукти за растителна среда (MRS-4), което позволява да изберете Lactobacilli дори при малки количества от съдържанието на червата, т.е. най-малко 100 CFU на един грам при използване на поне 10 -1 разреждане и посяване на 0,1 мл от метода може да бъде освободен в присъствието на лактобацилите в съдържанието на червата в количество от повече от 100 CFU на един грам След изолиране морфологично изследване, tinktor ialnye свойства на избраните култури, потвърждавайки членството на тези клетки до Lactobaccilacea семейство. Че Lactobacillus стар, защото на млечни продукти за растителна среда е възможно растеж на други бактерии като стафилококи, гъбички от рода Candida, дрождени клетки, подобни на растежа на лактобацилите клетки.
, Втори пасаж избран лактобацили в селективна културална среда MRS-4 за целите на култивиране чисти популации от клетки, пасаж и отглеждане poluchennnoy лактобацили чиста култура в селективна течна среда MPC-1, след което се добавя консервант в размер на 1: 1, за да се поддържа клетъчната активност през един или повече месеца.
Извършва контрол Получената течност биомаса в размер на жизнеспособни млечнокисели бактерии и никакъв външен микрофлора, което е много важно, когато се работи с култури, изолирани от фекалии.
Пример. Местните засяване съществени части се отстраняват от изпражненията в индивидуална стерилна буркан или тръба. Не по-късно от 2 часа след вземане на проби, след подготовката на пробите чрез стриване в малко количество от стерилен физиологичен разтвор, посяват върху твърда селекционна среда MRS-4.
Проби от природен засяване материал се поставят в пещ, където температурата се поддържа при 36 # x000B1 1 # x000B0 С в продължение на 2-3 дни в атмосфера на въглероден диоксид.
Научете морфологични и багрилни свойства на избрани култури, за които се оцветяват от Грам проби.
Съотношението на микроби оцветяване по Грам е важна отличителна черта.
Лактобацилите са изолирани колонии с помощта на бактериологичен контур, втори пасаж и произвеждат култивиране биомаса на лактобацилите в продължение на 1-3 дни в среда на въглероден диоксид при температура от 36 # x000B1 1 # x000B0 С, и отглеждане на лактобацили преминаване чиста култура, получена в селективна течна среда MRS- 1, и след това да консервант в съотношение 1: 1 в съотношение една част от течната среда selitivnoy IFA-1 отглеждат чиста култура и една част на консервант. Разбърква се добре. Като консервант се използва захароза желатин среда.
Изработване контрол от всяка проба се отглежда биомаса в отсъствието на външни микрофлора, а броят на жизнеспособните лактобацили.
За да се определи чистотата на културата (osutstvie външен микрофлора) бяха взети и 1 мл от биомаса посяват върху твърда среда хранителен: хранителен агар с 9% натриев хлорид, средносрочен Sabouraud среда Endo. Културите се поставят в инкубатор и култивират 24-72 часа след инкубиране сърфиране култури. Чуждестранните микрофлора не трябва да бъде.
За да се определи броя на жизнеспособните лактобацили в 1 мл от биомаса се получава серия от десеткратни разреждания.
Тръбните 10 -5 разреждане 1 мл се вземат съдържание инокулира върху MRS твърда среда-4 и се поставят в инкубатор при 36 # x000B1 1 # x000B0 С в продължение на 44-48 часа в атмосфера на въглероден диоксид.
След инкубиране извършва брой колонии. Броят на жизнеспособните лактобацили в 1 мл от биомаса се определя по формулата
където А - брой жизнеспособни лактобацилите в 1 мл от биомаса;
Б - брой колонии отгледани върху твърда среда MRS-4;
п - номер на десетократни разреждания на последната тръба.
Биомаса трябва да съдържа броя на жизнеспособните лактобацили-малко 10 юни CFU в 1 мл биомаса.
Поради факта, че предложеният метод, течен биомаса от Lactobacillus клетки с антигенна структура, свързана чревните клетки на потребителите, може успешно да се използва за възстановяване на чревни разстройства microbiocenosis и поддържане в добро състояние и в дисбактериоза и профилактични цели.
Особено важно е използването на метода за нормализиране microbiocenosis при бременни жени за предотвратяване на дисбиоза при новородени и деца 1 година от живота.
Метод за получаване на autostrains биомаса лактобацили течност, съдържаща проби роден материал, посяване на селективна среда, култивиране на лактобацилите, избор на лактобацили и техния контрол, провеждане многократно преминаване култивиране лактобацили получава култура в селективна среда, последвано от добавяне на консервант и контрол получен Lactobacillus биомаса характеризиращ се с това, че първоначалното посяване в селективна среда без разреждане произвежда роден материал не по-късно от 2 часа след вземане на проби, се прибавят към консерванта на лактобацили биомаса, който се използва като saharozozhelatinovuyu среда в съотношение 1: 1, съответно.
Свързани статии