Използвайте за транспортиране на много биоматериал проба (гной, чревни съдържание и други подобни) Обща хранителна среда често е сериозна грешка, защото те са по-малко строги пролиферация на сапрофитни микроорганизми. разтвор физиологичен който често се използва за тази цел, не осигурява поддържане на стабилни нива на потенциала на редокс и рН, и това от своя страна, значително ограничава жизнеспособността на много патогенни бактерии.
В момента в клиниката като транспортна среда (консерванти) се използват различни форми на състава с различна степен на хранителна стойност. Използването на един или друг от тях се определя от съответните наредби, указания и инструкции, включително одобрението на Министерството на здравеопазването на Руската федерация.
Това може да бъде буферни разтвори, съдържащи само минерални соли - нормален физиологичен разтвор или фосфатно буфериран физиологичен разтвор и консерванти, съдържащи органични вещества - Буфер глицерол-физиологичен разтвор, глицерол консервант, 0,15% -ен пептонова вода, буфер -kazeinovo-дрожди среда.
Състав на следните състави:
Калиев дихидроген фосфат 0,45 грама
Динатриев хидрогенфосфат 5.34гр
Дестилирана вода 1000 мл
Буфер глицерол-физиологичен разтвор
Натриев хлорид 4,2 гр
Дикалиев кисел фосфат 3,1 гр
Калиев дихидроген фосфат 1.0 гр
Неутрални Глицерол 300 мл
Дестилирана вода 700 мл
0.85% разтвор на натриев хлорид от 1000 мл
Неутрални Глицерол 500 мл
Динатриев хидрогенфосфат 20% разтвор от 150 мл
Дестилирана вода 100 мл
Бактериологични пептон 0,1 гр
Натриев хлорид 0,5 гр
Калиев нитрат 0,1 гр
Натриев бикарбонат 0,2 грама
Казеин хидролизат 2,0 гр
Екстрактът от хлебна мая 5,0 мл
Разтвор на фосфатен буфер до 1000 мл
По този начин за транспортиране на ентеробактерии като консерванти, препоръчани физиологичен разтвор, глицерол и фосфатни буферни разтвори. за лабораторна диагностика на кампилобактериоза употреба осигурява използването за тези цели, освен физиологичен разтвор, 0.1% пептон вода сто (3 до 48 часа.) или тиогликолова среда за контрол на стерилност (до 3 дни).
Трябва да се отбележи, че охлаждане до 4 ° С, могат значително да се удължи времето на транспортиране на проби в тези среди: физиологичен разтвор - 24 часа в 0.1% пептон вода - до 72 часа и тиогликолова среда за контрол стерилност - до 5 - 7 дни. В проучването на материал за наличие на Yersinia глицерол консерванти не са подходящи. В този случай на изпитвания материал се съхранява при 4 - 8 ° С, 7 - 15 дни в разтвор на фосфатен буфер или буфер-казеин дрожди среда.
Няколко десетки среди, които могат потенциално да бъдат използвани като транспорт. Въпреки това, повечето от тях не отговаря на един от двата задължителните изисквания, които диктуват пригодността на средата и точно както transportnoy.Transportnaya среда, от една страна, трябва да гарантират запазването на жизнеспособността на микроорганизъм, където най-малко 8 - 12 часа при стайна температура, и в същото времето, необходимо за да се предотврати или значително да ограничи разпространението на микроорганизми.
Последното е особено важно. Необходимо е да се запази жизнеспособността на тази част от патогенен микрофлора, която е домакин на най-бързо умира, особено ако конкурентното развитие на микроорганизми по-малко взискателни. Както вече бе отбелязано, тази ситуация е много често, ако изследвани навита освобождаване, чревни съдържание, слюнка, натривки от гърло и някои други биологични субстрати. Obligately анаеробни бактерии, пневмококи, Haemophilus бактерии, Neisseria и други микроорганизми много трудно да се изолира от биологичен материал, ако е налице процес на интензивно паралелно размножаване на сапрофитни бактерии, или повече жизнеспособни патогени. В допълнение, смърт на взискателни бактерии се определя чрез създаване на неблагоприятни условия за тях, като неблагоприятен рН, окислително-редукционен потенциал, присъствие или отсъствие на свободен кислород, а ефектът на антимикробни метаболити, които при определени условия могат да образуват aktinometsety, Pseudomonas, Escherichia и други, съдържащи се в примерни микроорганизми.
Опитът на създаване и използване на транспортната култура медии е голям и велик е тяхната официална номенклатура. Но всъщност в света постоянно използват само два транспортни медии, които наричат с имената на техните създатели: Ames сряда и сряда Кари-Блеър, както и кои са най-универсални транспортни медиите, за да се съхранява по-голямата част от вида бактерии. Ames среда е предназначен за широк спектър от бактерии, Cary Blair среда за чревни микроорганизми.
Сряда Keri Блеър беше предложена на разработчиците през 1954. През последните дълъг период от неговата формулировка всъщност не се променя. Тя не предизвиква неяснота, и назначаването на околната среда - първоначално то бе изтълкувано като запазване на микроорганизми по време на транспортирането, с акцент върху чревните микроорганизми.
Натриев хлорид 5,0 гр
Динатриев хидрогенфосфат 1,1 гр
Калциев хлорид, 0.1 гр
Натриев тиогликолат 1.5 гр
Дестилирана вода до 1000 мл
чревни микроорганизми, са разнообразни и включват представители на местно и преходни микроорганизми. Последното от своя страна може да включва голямо разнообразие от бактерии и гъбички, включително сапрофитни. В същото време, практиката на клиничните институции микробиология услуги, фокусирани върху разпределението на определен кръг от микроорганизми kishchnika, особено представители на семейство Enterobacteriaceae (шигела, салмонела), поне така наречените не-ферментиращи Грам-отрицателни бактерии, чревни коки и дрожди.
Транспортна среда Кари-Блеър предупреждава, унищожаване на микробните клетки, поддържа жизнеността си, но това пречи на възпроизводството. Тези свойства на средата са осигурени от състава компонент. Ниската хранителната стойност и, преди всичко, липсата на азотните и въглеродни източници като ключови елементи на популация ограничава процесите на растеж и репродукция на микроорганизми.
Процедурата за използване на тази среда е както следва: стопения среда Carey-Blair разпределя в стерилни епруветки 6 - 9 мл. Обемът на среда в тръбите се определя чрез посяване на техника. При сеитба намазка тампон взето на tamponoderzhatele, достатъчно малка колона със средна - 6 мл. Когато директна сеитба биоматериал (без тампон) обемът на среда в увеличава епруветка. Като такива, средата може да бъде постоянно се съхранява при 2 - 8 ° С
Биологичният материал се потапя в колона на средата, така че да не остане на повърхността си. След това тръбата с Инокулираната среда се поставя в контейнер и се изпраща на лабораторията.
Сряда Keri Блеър остава жизнеспособни бактерии взискателни около един ден, а след това има постепенно клетъчна смърт. Ето защо, презасяване с транспортна среда за обогатяване, диференциална диагностика или друга медийна култура трябва да се извършва с максималната наличното време. Въпреки това, има доказателства, че със салмонела в средата остане жизнеспособна в продължение на няколко месеца.
Ames среда се използва като транспорт за широк спектър от микроорганизми най-различни биологични субстрати (гной, газоразрядни рана, храчки, CSF, и т.н.), с изключение на изпражнения. Ames среда може да бъде въглища, и без него:
Натриев хлорид 3,0 гр
Динатриев хидрогенфосфат 1.05гр
Калиев дихидроген фосфат 0,2 грама
Калиев хлорид 0,2 гр
Калциев хлорид, 0.1 гр
Магнезиев хлорид 0,1 гр
Натриев тиогликолат 1.0 грама
(Тъй като незадължителен компонент) 10,0 грама
Дестилирана вода до 1000 мл
Въглен се добавя към средата за сорбция Ames микробни метаболити отрицателно засягащи силно чувствителни патогени. По-специално, това условие е особено важно за запазване на жизнеспособността на Neisseria гонорея.
сеитба техника в сряда Ames е същата като в сряда, Cary Блеър.
Противоречиви становища относно пригодността на Ames среда за транспортиране на биологични субстрати с облигатни анаеробни бактерии. Разбира се, наличието на нисък потенциал редокси, който е снабден тиогликолат натрий и колона полутечни агар, който е потопен биоматериал граница контакт микроорганизми с атмосферен кислород и доставка на средата, в разтворима форма, което може да спомогне за поддържането на жизнеспособността на няколко вида obligately анаеробни бактерии (клостридии най-демонстративно в това отношение). Въпреки това, на околната среда не осигурява дълготрайно съхранение на облигатни анаероби, които са силно чувствителни към кислород (например, някои видове Bacteroides).
Също така е отбелязано по-горе, широк списък на транспортни средства, използвани за транспортиране на някои видове микроорганизми. Най-строгите изисквания за транспортиране на материала, който се проверяват за бактериологични спорогенните анаеробни микроорганизми. Тези бактерии умират бързо при контакт с кислород, което прави материала, използван за транспортиране на съдове напълнени с инертен газ. Например, добре известно течност богата среда под инертен газ с хемин и витамин К за директно течност кръвна култура и биологични субстрати. Той също така служи като транспортна среда и средата за култивиране на анаеробни бактерии, включително строги анаероби
Няколко насочени транспорт носители включват антимикробни агенти (селективен компонент). Тези вещества инхибират едновременно микрофлора на растежа, но нямат ефект върху желания микроб. Останалите компоненти средни осигуряват неговата жизнеспособност. Пример за това е среда за Listeria, който е едновременно "глад" и съдържа селективно действие агент (дадено на литър):
Натриев глицерофосфат 10,0 грама
Натриев тиогликолат 1.0 грама
Калциев хлорид, 0.1 гр
Налидиксова киселина 0,04 грама
Значително повече "богат" среда за пренасяне представени Campylobacter (например Campi тио среда), чиято структура се състои от пет антимикробни средства (дадено на литър):
Панкреаса разграждане на казеин 20,0 грама
Натриев хлорид 2,5 гр
Дикалиев кисел фосфат 1,5 гр
Натриев тиогликолат 0.5 гр
Натриев сулфит 0.2 грама
Цефалотин 0.02 гр
Ванкомицин 0.02 гр
Амфотерицин В 0,002 гр
Триметоприм .002грам
Полимиксин В 3000 IU
Горната рецепта не е много по-различен от този на други среди за Campylobacter (sm.zaklyuchitelnuyu глава). Очевидно е, че сред разработчиците са фокусирани главно върху ефекта на антибиотици selektsioniruyuschem, задържащ, като цяло, съставът на средата е достатъчно да поддържа жизнеспособността на много микроорганизми.
Същият принцип се използва в транспортното средство, за хламидии. Освен това, тя се взема предвид възможността за избор за осмотично фактори (дадени на литър).
Дикалиев кисел фосфат 2,1 гр
Калиев дихидроген фосфат 1,1 гр
Серум голям
едър рогат добитък 50.0 мл
Ванкомицин 0.1 гр
Стрептомицин 0,05 грама на
Нистатин 25,000 единици
Антибиотици администрирани и серум асептично в стерилна среда преди разпространението на флакони и епруветки.
Има редица доста сложен състав транспорт среди за Neisseria, микоплазми и комбинации от тях в biosubstrates за предпочитане получени от пикочните пътища. Няколко параметри се разглеждат като транспортна среда за взискателни бактерии като цяло, но особено за Neisseria. Рецепта на един от тях, принадлежащи към една голяма група от така наречения Transgrow Medium, показано по-долу (дадено на литър).
Хемоглобинът 10,0 грама
Панкреаса разграждане на казеин 7,5 гр
Натриев хлорид 5,0 гр
Царевично нишесте 1,5 гр
Дикалиев кисел фосфат 4,0 гр
Калиев дихидроген фосфат 1.0 гр
Витамин В12 0,001 грама
Тиамин пирофосфат 0,001 гр
Р-аминобензоена киселина 0.0002 гр
Антибиотик добавка 10.0 мл
Антибиотик добавка се състои от няколко антибиотици, предназначени за получаване на селективните свойства на средата. Има редица предложения, никой от тях напълно, разбира се, не може да осигури гарантирано забавяне на растежа, придружаващ микроорганизми. Различните източници най-често се споменават следния състав (на литър се добавят на среда разтвор на 10 мл антибиотици).
Полимиксин В 0,0075 грама
Ванкомицин 0.0035гр
Триметоприм 0.0035грама
Нистатин 12,500 единици
СРЕДА ГЛАВА 8.PITATELNYE за изолиране и идентифициране ентеробактерии
Допълнителни човешки патогени сред Enterobacteriaceae включват микроорганизми относително неизискващ. Те са в състояние да доведат до различни основни хранителни среди, използвани в микробиологичните изследвания. Въпреки това, семейството Enterobacteriaceae доста широко; Тя комбинира различни по своите свойства на бактериите. Освен това, тези области на човешкото тяло, където много от членовете на семейството са защитени природни местообитания или паразитизъм, гъсто населени от резидентни микрофлора. Ето защо медиите на културата, използвани с Enterobacteriaceae, особено реши проблема с селективно разделяне и бактериологичното диагноза. Това е типично за вътрешната и външната практика.
Според много местни насоки и указания, включително и на Министерството на здравеопазването одобри както се изисква съгласно bakdiagnostike ентеробактерии, предложени за използване среда за обогатяване, средата за селективно изолиране и диференциране. Те са изброени в таблицата. Кръстен тези среди, които се усвояват от местни производители, както и тези, чиито изпълнение на практика на призната микробиологична гледна точка.
Вътрешен препоръка по принцип малко по-различно от ежедневната практика на културалната среда в чужбина. Хранителни среди за ентеробактериите са проектирани по такъв начин, че да се използват характеристиките на растеж на отделните родове и видове, и тяхната способност за преобразуване на един или друг субстрат. Следващата Таблица 7 обобщава свойства селективно ентеробактериите са разгледани и успешно реализирани в хранителна среда за диференциране на микроорганизми от семейството.
транспортни носители - Ames, или Carey-Blair, или Стюарт;
алкална среда - кръвен агар, агар соево смилане (триптичен соев агар);
селективен и диференциална диагностика среда - ацетат агар, пептонова вода с реагент Andred, Kligler среда MacConkey агар, течна среда и за определяне на уреаза индола, среда с деоксихолат и цитрат, SS-агар (като алтернатива среда с деоксихолат), цитрат Симънс агар. За тази група от хранителни среди могат да бъдат класифицирани наречен списък brolacin агар, по-известен в България CLED-агар, достъпно НСО "хранителна среда" Махачкала (среда, съдържаща цистин, лактоза и индикатор и дозиране на електролитния състав) , Въпреки че, строго погледнато, тази среда има за цел да подчертае не само Enterobacteriaceae.
Отбележи, още един международен опит.
В практиката на американските микробиолози ентеробактерии в разпределението на чревното съдържимо се предлага да се използват следните групи хранителни среди.
Както транспорт - Кари Блеър среда.
Диференциална диагноза. McConkey агар и EMB агар (с еозин и метиленово синьо).
Умерено селективно. gektoen ентеро-агар, SS-агар (Salmonella-Shigella агар), XLD-агар (с ксилоза, лизин и деоксихолат).
Високо-селективни среди: агар и блестящ зелен агар, бисмут сулфит.
Естествено, всичко по-горе не изключва възможността за прилагане на основния медиите културата и в частност хранителен агар допълнена с овчи еритроцити.
Назначаване на транспортната среда е очевидно. Втората група от медии позволява да се разграничат култури ферментират лактоза от лактоза-отрицателни. Следваща (умерено селективна среда) осигурява растежа на Salmonella и Shigella, докато растежът на други ентеробактерии частично или напълно подтисната. Последната група е предназначена за изолиране на Salmonella, Shigella растеж, но те не са гарантирани.
Захранващи среди най-често се използват при разпределяне