Серум откриване на болка-Nogo антитела срещу обороти да се установи диагнозата на заболяването. Серология се използва и за определяне на микро-CWA антигени различни биоактивен положителни общества, групи от антигени в кръвта, тъканите и туморния, имунен комплекс рецептори клетки ров и сътр.
При избора на микроби от пациент про идентификация на олово патоген чрез изучаване неговите антигенни свойства използване имунни серуми диагностични, т. Е. хиперимунизиран животински серум, съдържащ специфичен ен Titel. Този така наречен серологична идентификация на микроорганизми.
В микробиология и имунология широко използван аглутинация реакция Preetz-pitatsii, неутрализация реакции, включващи комплемент-ем, като се използват белязани антитела и антигени (radioimmunologiches реплика, ензимен имуноанализ, техники имунофлуоресцентни). Тези реакции се отличават с откриваем ефект и формулиране изкуство, обаче, всички Ba-Ванир за взаимодействие на антиген с антитяло и да се използва за откриване на антитела, така и антигени. Имунните отговори, които се характеризират с високо chuvstvitelnos Tew и специфичност.
Характеристика антитяло взаимодействие със самостоятелен Tigeneh реакции са в основата на диагностични лаборатории. Взаимодействието между ин витро направи антиген и антитяло съдържа спе-чески и неспецифично фаза. Фазата на спец-чески е бързо-спец изч свързващо антитяло активен център с антиген детерминанта. След това идва неспецифично фаза - бавно, съвместно Thoraya проявява видими физични феномени, такива като образуване на флокулирана утайка (аглутинация явление), или утайката под формата на облак. Тази фаза изисква определени условия (електролити Opti-мал рН).
Свързване на антиген детерминанти (епитопи) от активния център на Fab-фрагменти на анти тела, дължащи се на ван дер Ваалс сили, водородни връзки и хидрофобен между действие. Силата и броя svyazavshe Gosia антиген-антитяло-зависима афинно-ност, ненаситеност антитела и тяхната валентност.
На въпрос за бърза диагностика:
1. Diagnostics податливи на култура изолирани в чиста форма.
2. Специално оборудвани лаборатории (трябва да има разрешение)
3. Спазването на строги правила, като например: изолирана стая, необходимите специални защитни костюми, задължително пълна санитарна обработка на помещенията след работа с агента, саниращи изследователи след работа.
Методи eksperss диагноза.
1.Bakteriologiya - комбиниран политропно среди за бързо изследване Morph tinktor, Biochem. свойства. Използване enzimoindikatornoy лента електрофизически метод, хартиени дискове, импрегнирани с различни по-ли (glyukazo, лактоза, и т.н.)
2.Fagodiagnostika.
3.Serodiagnostika - метод Mancini raektsiya утаяване в гела на Ascoli, PA, РНА.
4. микроскопия - пряк и непрекъснат RIF.
бързи диагностични методи, когато:
Холера - m.Z.Ermolevoy, р-ТА обездвижване холера диагностичен серум RIF.
Туларемия - RA върху стъклото, ЗНЗ
Чумата - фагови метод типизиране въглехидрат хартиени дискове, РНА.
Sib.yazva - метод Асколи, RIF, PHA.
Естеството на растеж. три им дифузно (Факултативни анаероби), дънен (задължи анаероби) и повърхността (задължи аероби).
Изолиране на чиста култура от анаеробни бактерии
В лабораторна практика често се налага да се работи с анаеробни микроорганизми. Те са по-капризни към хранителната среда от аеробна, често изискват специални добавки за растеж изисква спиране на кислород в отглеждането им, увеличаване на продължителността на тяхната дължина. Тъй като работим с тях е по-сложна, тя изисква значително внимание бактериолози и лаборанти.
Защита е важен материал, който съдържа анаеробни патогени от токсичен ефект на атмосферния кислород. Тъй като материал от джобовете на гнойна инфекция се препоръчва приемане по време на пробиване с помощта на спринцовка, времето между улавянето на материала и да го сеитба на хранителната среда трябва да бъде възможно най-кратък.
Що се отнася до култивиране на анаеробни бактерии използват специални среди, които не съдържат кислород и имат ниска намаляване на окисляване потенциал (-20 -150 тУ) техния състав се прилагат показатели - резазурин, метиленово синьо и други подобни, които реагират на промяната на този потенциал. Когато го възобнови растежа, безцветна форма на показатели се променят цветовите: резазуриново бои сряда в розово, и метиленово синьо - в синьо. Такива промени показват невъзможността да се използва среда за култивиране на анаеробни бактерии.
Намалява въвеждане Redox в не средно по-малко от 0.05% агар, което увеличава вискозитета си намалява притока на кислород. Това, от своя страна, се постига дори с пресни (не по-късно от два часа след производството) и да се редуцират, хранителни среди.
Трябва да се отбележи, че в определен тип ферментация метаболизма на анаеробни бактерии, те изискват по-богат на хранителни вещества и витамини медии. Най-често използвани сърдечно мозъка и чернодробни екстракти, соя и дрождеви екстракти, gidrolitichny смилане на казеин, пептон, триптон. Задължително е допълнение на растежни фактори, като например Tween-80, хемин, менадион, хемолизирани или цяла кръв.
Изолиране на чисти култури от микроорганизми aerobnih състои от няколко етапа.
На първия ден (Фаза 1 проучване) в стерилен контейнер (флакон, колба, бутилка) взема патологичен материал. Неговото изследване на външен вид, консистенция, цвят, мирис и други симптоми, цитонамазка, се приготвя, боядисани и изследва под микроскоп. В някои случаи (остра гонорея, чума) в този момент, можете да сложите предходната диагноза, и в допълнение, за да вземете на околната среда, на които ще се засява на материала. Това се извършва бактериологично контур (използва се по-често) чрез метод за Drigalski шпатула, памучно марля тампон. Чаши затворени, се обърна с главата надолу, влезте специален молив и се поставя в термостат при оптимална температура (37 ° С) в продължение на 18-48 години. Целта на фаза - за получаване на изолирани колонии от микроорганизми.
Въпреки това, понякога целта купчина материал на инокулира в течна хранителна среда.
От съмнителни колонии получени намазки оцветяват от Грам за да се проучи морфологични и багрилни свойства на патогени, бактерии проучват движи в "висящи" или "смачкани" спад. Тези характеристики са изключително голям диагностична стойност при характеризирането на определени видове микроорганизми.
Останките от колониите изследвани внимателно, без да докосва другите, отстранени от повърхността на средата и се посяват на агарови наклонени или петриева паничка с хранителна среда сектори за получаване на чиста култура. Епруветките или чаши с култури се поставят в инкубатор при оптимална температура за 18-24 часа.
Течни хранителни среди също да растат бактерии по различни начини, въпреки че характеристиките на растеж на дисплеи по-бедни от плътен.
Бактериите могат да причинят дифузно помътняване среда цвят го по този начин не може да се променя или придобива цвят пигмент. Този модел на растеж е най-често се наблюдава в по-голямата част от факултативни анаеробни микроорганизми.
Понякога образуването на утайка на дъното на тръбата. Тя може да бъде kroshkoobraznym хомогенна, вискозна лигавицата и др. Сред по-горе може да се отляво ясно или стане мътен. Ако микробите пигментните не образуват утайка siruvato-Bily или жълтеникав цвят. По същия начин Класирането расте, обикновено анаеробни бактерии.
Париетална растеж проявява под формата на люспи, зърна, прикрепени към вътрешните стени на тръбата. Така сряда остава прозрачен.
Aerobnye бактерии са склонни да повърхностно растеж. Често образува леко безцветно или синьо филм като едва забележимо плака върху повърхност, която изчезва при разклащане или разклащане на средата. Филмът може да бъде влага, мазнини, има сноп, лигавицата последователност и се придържат към една линия се разпростира над него. Въпреки това, често и гъста, суха, чуплива филм, цветът на който зависи от пигмента, който се произвежда от микроорганизми.
Ако е необходимо, цитонамазка, оцветени, изследва под микроскоп и микроорганизми се посяват в линия повърхност среда гъста хранителни вещества за получаване на изолирани колонии.
На третия ден (фаза 3 проучвания) изучаване на същността на чиста култура на микробния растеж и идентификационния си се осъществява.
На първо място, обърнете внимание на характеристиките на развитието на микроорганизми в околната среда и да направи ход, рисуване техниката си грама, за да се провери чистотата на културата. Ако бактериите под микроскоп наблюдават същия вид морфология, размер и багрилен (способността да бъдат боядисани) свойства, заключи, че културата е чист. В някои случаи, дори и за външния вид и характеристиките на техния растеж може да се заключи ум падение. Определяне на вида на бактериите, поради техните морфологични характеристики наречени морфологична идентификация. Определете вида на патогени поради техните културни особености, наречени идентификация култура.
Въпреки това, тези изследвания не са достатъчни, за да се вземе окончателно решение за вида на избраните микробите. Тъй изследване на биохимичните свойства на бактерии. Те са доста разнообразни.
Най-често изпитват saccharolytic, протеолитично, peptoliticheskie, хемолитични свойства, образуване декарбоксилазни ензими оксидаза, каталаза, plazmokoagulazy, ДНК-аза, fibrinolysin, редукция на нитратите до нитрити и други подобни. За това има специална хранителна среда, която се инокулира с микроорганизми (свистене цветни номер, МРВ, сплескани суроватка, мляко и други).
Определяне на вида на патоген поради неговите биохимични свойства, наречени биохимична идентификация.
техники за обработване
И изолацията на чисти култури от бактерии
За успешното отглеждане, в допълнение към добре подбрани медии и правилността на културата са необходими оптимални условия: температура, влажност, аерация (подаване на въздух). Култивиране анаероби трудно от аероби, за да се отстрани въздуха от културалната среда с помощта на различни методи.
Изберете индивидуална бактериални видове (чиста култура) на изпитвания материал, съдържащ, като правило, смес от различни микроорганизми е един от етапите на всеки бактериологично изследване. Mikrobovpoluchayut чиста култура на изолираните бактериални колонии.
При разпределяне на чиста култура на кръвта (кръвна култура) на своята предварително "се отглеждат" в течна среда: 10-15 мл кръв, взета асептично инокулира в 100-150 мл течна среда. Стойност засети кръв и културална среда не случайно 01:10 - така постига кръв разреждане (неразреден кръв вреден ефект върху микроорганизми).
Етапи изолиране на чиста култура от бактерии
Етап I (роден материал)
Микроскопия (приблизителна представа за микрофлора).
Засяване на твърда среда хранителен (получаване колонии).
Етап II (изолирани колонии)
Изследване на колонии (свойства бактерии култура).
Микроскопско изследване на микроби в оцветени петна
(Морфологични свойства: бактерии).
Засяването на наклон агар за изолиране на чиста култура.
Етап III (чиста култура)
Определяне на културата, морфологични, биохимични
и други свойства за идентифициране на бактериалната култура
Идентификация на бактерии
Идентификация на изолирани бактериални култури се извършва чрез изучаване на морфологията на бактерии, тяхната култура, биохимични и други характеристики, присъщи на всеки вид.