Гоу VPO Киров Държавната академия
Методичен развитие на учителите
Практическа работа № 16 микробиология
за 3-та година студенти от медицински и педиатрични отделения.
Тема: "Вируси - активатори на кърлежи енцефалит, рубеола, бяс. Онкогенни вируси ".
Цел: Да се допринесе за формирането на умения за изучаване на вирусни инфекции, развитието на принципите на лабораторната диагностика.
разгледа на биологичните свойства на вируси - патогени на кърлежи енцефалит, рубеола, бяс;
разгледа епидемиологията, патогенеза, клинични характеристики, болести, причинени от тях, принципите на превенция и лечение;
научи методи за лабораторна диагностика на вирусни инфекции.
Студентът трябва да знаете:
1) за проучване на темата - морфология, структура, методи възпроизвеждащи вирус, методи за лабораторна диагностика на вирусни заболявания;
2) след проучване теми - свойства патогени поемат енцефалит, рубеола, бяс, методи за отглеждане, епидемиология, патогенеза и клинични прояви специфично лечение и профилактика на заболявания, причинени от тях.
Студентът трябва да бъде в състояние да:
избран патологичен материал от болен на вирусологично изследване;
да се проведат изследвания върху биологичните свойства на вируса;
извършва серологични методи за диагностика на вирусни инфекции;
извършват превантивни мерки.
Какво знаеш за историята на проучването на патогени на кърлежи енцефалит, рубеола, бяс?
Какви са основните биологични свойства, характерни за тези вируси?
Каква е ролята, която играят в човешка болест?
Опишете епидемиология, патогенезата, клиничните прояви, имунитет рубеола, бяс.
Какви методи се използват за лабораторна диагностика на вирусни заболявания?
Опишете основните принципи на профилактика и лечение.
2.1. Контрол на първоначалното ниво на знания. Метод - програмиран контрол.
2.2. Показателен основа на самостоятелна работа на студентите:
- изпълнение на практическа работа;
- регистрация и защита на протоколи.
3. Резюмета изследваните материали
3.1. Енцефалит от кърлежи вируси.
Кърлежи енцефалит (син тайгата енцефалит, менингоенцефалит далекоизточен кърлежи енцефаломиелит, български пролетно-летния енцефалит, пренасян от кърлежи encepalitis.) - е остро вирусно заболяване, характеризиращо се с лезии на мозъка и сивото вещество на гръбначния мозък, което води до развитието на парализа и пареза.
Историята на изучаването на болестта.
Както нозологична единица KE се изолира през 1937 г. в резултат на комплекс експедиция доведе L.A.Zilberom (видни вирусолози Chumakov, V.D.Solovev работили в експедицията). са установени закони, природни огнища, сезонност, отношенията с дейността на кърлежи. Функциите и клиники Pathomorphology ТВЕ, методите за профилактика и лечение.
Втората експедиция под ръководството на E.N.Pavlovskogo разкри ролята и значението на кърлежи като вектори и естествен резервоар на вируса в природата. Резултатите бяха в основата на теорията за естествения огнища на ТВЕ.
През третата експедиция водена I.O.Rogozinym, учи подходи към развитието на специфична превенция на ТВЕ.
Семейство - Flaviviridae (През 1984 г., разпределени като независим семейство Togaviridae.). Името на семейството и семейството получава титлата жълта треска (lat.-Flava-жълто), е типичен представител на тази група.
Род - Flavivirus, включва 63 представители, групирани в 10 антигенен комплекс. Има два вида на вируса на кърлежи енцефалит - запад (носители - кърлежи Ixodes persulcatus) и източни (носители - кърлежи Ixodes рициново), които се различават по тежест и клиничното протичане на антигенен състав на патогенни вируси. През последните години, и трети вид изолиран вирус, изолиран в Гърция от кърлежи Rhipicephalus Бурса.
Оформете сферични вируси. Размер - 40-45 нм. тип на симетрия - кубичен. Организация - комплекс, разположен на повърхността на бодли гликопротеинови природата. Молекулно тегло - 46 * 10 април кД. коефициент утаяване - S. 175-218
Геном е едноверижна, инфекциозен, plyusnitevaya РНК с молекулно тегло 4,2h10 3 кД, на утаяване константа от 45 ° С, съдържа около 14 базови двойки.
РНК - 5.5-6.3% Протеини - 57-60% Липиди - 27-30%, въглехидрати - 6.5%
Допълнение, група; се открива в RNC;
Хемаглутинин, типичен; открива в рН, HAI.
Адсорбция използване фосфолипид и гликопротеин рецептори.
Проникването през рецептор-медиирана ендоцитоза (viropeksis) при сливането на вирусната обвивка със стената на вакуоли отива вирусна РНК в цитоплазмата.
РНК служи като иРНК. Репликация е бавен (40- 60 часа).
Монтаж: нуклеокапсид образуване на клетъчни EPS.
Добив от обещаващ (присъединяване superkapsida при излизане от клетката).
мозъчната тъкан на бяло мишки (3-4 седмична възраст).
В клетъчна култура - пилешки фибробласти, бъбрек на маймуна, трансплантирани клетки. Космическият апарат наблюдава CPP.
На ovokulturah - в жълтъчната торбичка и CAM черупка.
Вирусът се унищожават под детергенти действие етер, формалин под обратен хладник - 2 минути. Когато се загрява до 56-60 ° С в продължение на 10-30 минути. в млякото се съхранява до 2 месеца. Устойчив на ултравиолетово облъчване, дълго съхранява в глицерол.
Трансмисивните естествена отправна заболяване с пролетно-летния сезон.
механизъм на инфекция - трансмисивна.
трансмисивни (на ухапване от кърлеж);
храносмилателния (от ядене на заразен сурово козе, краве мляко и млечни продукти);
Замърсяване (за дробене и триене заби кърлеж);
трансплацентарно (от майката на плода).
Превозвачите - кърлежи Ixodes persulcatus и Ixodes Ricinus.
Резервоари и носители на инфекция в природата са кърлежи, често срещани в почти всички европейски страни, в европейската част на Република България и в Сибир; диви животни. След хранене на заразени животни след 5-6 дни вирусът прониква във всички органи на кърлежа, концентриране на половата система, червата и слюнчените жлези. Вирусът остава доживотна тик, т. Е. За 2-4 години, което прави кърлежи "ценна" естествен резервоар на инфекцията. Индикатор заразяване на акари е хетерогенна от един регион в друг и от сезон на сезон, вариращо от 1 до 20% (максималната скорост съобщено е 70%). Вирусът се предава от поколение на поколение кърлеж. Насекомото е в състояние да паразитират върху 100 вида животни.
най период активни акари попада през пролетта и началото на лятото, което се отразява в заглавието на инфекцията, който те носят - ". пролетно-летния енцефалит"
Кърлежите не може да лети, или скок, те могат да се хванат само на къса и докосва тяхната саможертва или да падне върху него. Както и при други кръвосмучещи насекоми, ухапване от кърлеж може да незабелязани за дълго време, благодарение на наличието в нейните слюнка специални разредители на кръвта (антикоагуланти) и аналгетични вещества. Именно поради тази причина, проста, но много ефективна мярка за откриване заби кърлеж са самонаети и vzaimoosmotry при напускане гората и спирания. Мъжките кърлежи, за разлика от женските се прикрепват към един много кратък период от време, което е още една причина, че много от болните не мога да си спомня факта на ухапването.
Възможно е и заразяване на хора, които не са посещавали гората. Това може да се случи, когато плъзна клещи животни (кучета, котки), или на хората - по дрехите, цветя, клони и др ...
Тези, които най-голям риск са лица, чиято дейност е свързана с престоя в горските работници от сеч, геоложки страни, изграждане на пътища и железопътни линии, петролопроводи и газопроводи, електропроводи, геодезисти, ловци, туристи. През последните години броят на пациентите до 75% са жители на града, заразени в крайградски гори, градини и зеленчукови парцели.
Вирусът влиза през кожата или лигавиците в клетките, мононуклеарната фагоцитна система, където основната възпроизвеждането на вируса. След това отива в кръвта (виремия), което води до интоксикация. С кръвен поток влиза в системата клетки на централната нервна, умножава, причинявайки дегенеративни промени в сивото вещество на гръбначния мозък и мозъка (особено сериозни поражения, отбелязани в нервните клетки на предния рог на шийните прешлени SM ядрата на малкия мозък и продълговатия мозък). Мембраните на мозъка, гръбначния корените, периферните нерви развива ексудативна възпаление.
Инкубационният период е средно 1,5-2 седмици, понякога набъбване до 3 седмици. Различни продължителност на инкубационния период може да се обясни от естеството на ухапване - колкото по-дълго кърлежи гадно, по-вируса проникнали тялото и болестта ще растат по-бързо.
Заболяването се развива остро, в рамките на няколко дни.
Основните форми на ТВЕ.
Вирусът засяга Пия обвивка, на сиво вещество (кора) на мозъка, моторни неврони на гръбначния мозък и периферните нерви, че клинично изразени в конвулсии, парализа на отделните мускулни групи, или цели крайници и справяне с чувствителност на кожата.
По-късно, когато вирусната възпалението обхваща целия мозък, маркирани мозъчни simptomy- постоянни главоболия, упорито повръщане, загуба на съзнание до кома или, напротив, се развива ажитация загуба на ориентация във времето и пространството.
Могат да включват заболявания на сърдечно-съдовата система (миокардит, сърдечна недостатъчност, аритмия), храносмилателната система - забавяне стол, уголемяване на черния дроб и далака.
Всички тези симптоми са придружени от токсично увреждане на организма - увеличение на телесната температура до 39-40 ° С
В малък процент от случаите, в лезии на гръбначните нерви, заболяването може да се случи в "ишиас" (полирадикулоневрити).
Тежестта на заболяването зависи от възрастта - вероятността от изразен мозъчно увреждане значително увеличава с възрастта на 40 години, на възраст от 60 записана максимална смъртност.
Усложнения ТВЕ наблюдава в 30 - 80% от клинично значимо възстановяване форма и са представени главно от отпуснат парализа главно горните крайници.
Смъртността варира от 2% в Европейския формата на 20% от Far (по-тежки и опасни) форма. Смъртта настъпва в рамките на 1 седмица от началото на заболяването.
По-редки нетипични варианти на заболяването - изтрита, грипоподобно състояние; poliomielitopodobnaya форма. Възможни дългосрочни хронични носители на вируса.
След устойчиви предишна инфекция, образувана през целия имунитет в резултат на генериране на неутрализиращо и допълни-хемоаглутиниращи антитела. Разработва ХЗТ.
Проба - кръв, CSF, акари, разрез материал.
Вирусологично Метод - изолиране и идентифициране;
Серологично - RN, DGC, HAI, ELISA, RZGA, RNGA с сдвоен серуми (увеличение от 4 или повече пъти);
Express метод - зона за свободна търговия, TPHA, ELISA, RIA;
Имунохимични и молекулярни биологични методи - ELISA, Ша
Общи мерки за предотвратяване на кърлежи ухапване включват:
носи защитно облекло в гората - ботуши, яке плътно закопчана ръкави; кърпичка или мрежа, покриваща гърлото; прическа, която покрива косата; vzaimoosmotry самостоятелно и на изхода на гората и в покой спирки; косене на трева и ниски храсти, рязане на мъртва дървесина, изчистване на отломки и пънове; прилагане на течни и прахообразни репеленти (специални химикали за контрол на насекоми); вряща сурово козе и краве мляко в области, където е регистрирана кърлежи енцефалит.
Специфична (за кърлежи енцефалит) превенция чрез използване на инактивирани ваксини. Бързо (24 часа след приложението) превенция може да се извърши и чрез еднократно прилагане на имуноглобулин, който се защитава до 1 месец.
Първа помощ при ухапване от кърлеж. За да премахнете остана кърлежи си предварително смазани с някои мазнини (вазелин, крем, слънчогледово масло), и 15-20 минути внимателно издърпване контур резба или форцепс, разклащане от една страна на друга. За да се избегне унищожаването на кърлежа. Уловеният насекомото да горят или се изсипва вряща вода, но също така може да доведе до медицинския център да се установи от кърлеж инфекция от вируса. В ухапване се препоръчва за лечение на йод, водороден пероксид или препарат алкохол-съдържащ и измийте ръцете.
В никакъв случай не трябва да смаже кърлежа, тъй като в този случай може да възникне и заразен с вирус, съдържащ се във вътрешните органи на кърлежа.
Ваксина. По същество всички ваксини за профилактика на кърлежи енцефалит се отглеждат върху ембрионни кокоши яйца, формалин инактивиран вирус адсорбира на адювант (вещество за усилване на имунния отговор) - алуминиев хидроксид. Като допълнителни стабилизиращи компоненти използват желатин или албумин.
Към днешна дата, четири ваксини, използвани в България.
Kulturalnaya ваксина (направени в NPO вирион, Томск). Той е показан за ваксиниране на деца на 4-годишна възраст и възрастни до 65 години. ваксинационен курс се състои от три дози от схемата: 0-1-4. Една алтернативна схема за бърза защита се състои от две дози на интервали от 1-2 месеца, с последната доза се прилага поне 2 седмици преди влизането в естествената цел на инфекция.
Концентриран ваксина култура (направени в Института за полиомиелит и вирусен енцефалит, София, България; щам Sofin). От първи отличава с това, че може да се прилага към 18-те години. Разбира ваксинация се състои от две дози с интервал от 5-7 месеца. Първата реваксинация се направи една доза от ваксината в рамките на 1-2 години, през втория и следващите - на три години.
«FSME-Immun-lnject» (PR-ва имуно AG, Австрия, като част от компанията Baxter, САЩ). Предлага се в дози спринцовка, обем на доза - 0,5 мл за всички възрасти. Тя предпазва от двете инфекции варианта - европейски и Далечния Изток. Разбира ваксинация се състои от 2 дози, които се прилагат на интервали от 2 седмици до един месец (след ваксинация са защитени 95% от ваксинираните). Първо реваксинация се провежда през 9-13 месеца след втората доза; повтори бустер - 3 години, считано от момента на третата доза. Той може да се прилага едновременно с имуноглобулин. Тя няма възрастови ограничения.
Най-често и има богат опит на "Entsepur" (PR-ва Хирон Беринг, Германия, вирусен щам К23).
От предишното характеризира с наличието на допълнителни схеми за ваксинация - три дози от схемата 0-1-3 седмици. Втората разлика - малко по-голям брой нежелани реакции, дължащи се на присъствието на желатин в състава на ваксината.
Всички тези ваксини са силно имуногенна активност. Две седмици след последната доза първична ваксинация разбира имунитет имат 90-97% от ваксинираните.
Аварийно профилактика, т.е. профилактика след кърлеж ухапване, може да се извърши чрез имуноглобулини. Срокът за такава профилактика е ограничен до три дни, след този период, тя губи своя смисъл.
В България са на разположение:
Имуноглобулин срещу кърлежи енцефалит човешки течности (направени в Биомед Перм, България). Прилага интрамускулно, веднъж на възраст от 12 - 1 мл, 12-16 години - 2 мл, 16 години или по-възрастни - 3 мл.
Имуноглобулин срещу кърлежи енцефалит (от конски серум), произведени в България.
FSME-Булин (Immuno AG, Австрия).
Пуск в бутилки от 1, 2, 5 и 10 мл. За да се предотврати (на ухапване от кърлеж) се прилага в доза от 0,05 мл на кг телесно тегло. Действието започва след 24 часа и продължи в продължение на 1 месец. Възможна повторно въвеждане на по-дълъг защита.