II. Преглед на литературата 7
2.1. Таксономично позиция, разпределение и биологични свойства на Staphylococcus hyicus 7
2.2. Staphylococcus hyicus роля в патологията на селскостопански животни и птици 23
2.3. PCR - метод, както е метод за идентифициране на Staphylococcus hyicus.
III. СОБСТВЕНИ ПРОУЧВАНИЯ 33
3.1. Материали и методи 33
3.2. Изолиране на Staphylococcus hyicus от различни източници 58
3.3. Биологични свойства на изолираните култури Staphylococcus hyicus 60
3.3.1. Морфологични и културни - биохимични свойства на Staphylococcus hyicus 60
3.3.2. Изследване на патогенност фактори Staphylococcus hyicus 64
3.3.3. Изследване на Staphylococcus hyicus патогенност при свинете и лабораторни животни 69
3.3.4. Чувствителността на култури Staphylococcus hyicus антимикробна 76
3.4. Резултатите от полимеразна верижна реакция в развитието на
Идентификация метод за откриване на S. hyicus сода ген видово
spitsifichnoy супероксид дисмутаза 78
IV. Обсъждане на резултатите 84
VI. PfAs 96
VII. СПРАВКА 97
Въведение за работа
Значение на темата. В момента, ефективността на свиневъдството е ограничено от наличието на инфекциозни заболявания, много от които са все още слабо разбрани.
В Европа, потенето епидермиса прасета през 60 - 70-те години - на миналия век доведе до доста големи икономически загуби в производството на свинско (Е. Sieverding, 1988), въпреки че днес проблемът все още не е решен.
Заболяването е Staphylococcus hyicus, която е изолирана първа, е описано и е наречен D. Sompolynsky през 1953 г. като Micrococcus Epidermidis, и в края на 70-те години на миналия век е официално призната като отделен вид на тази фамилия от стафилококи (L. Devriese и др. 1978).
Comprehensive изследване на биологичните свойства на стафилококи и биологично активни вещества, произведени от тях е в основата понятията за патогенезата на заболявания, причинени от тях, както и основа на която впоследствие развита и изработена диагностика профилактика и схеми за лечение.
В нашата страна, изучаването на биологичните свойства на Staphylococcus hyicus не е достатъчно извършва, и неговата роля в етиологията на инфекциозни болести по свинете не е напълно изяснен.
Целта и целите на научни изследвания. Целта на нашето изследване е да се изследват биологичните свойства на Staphylococcus hyicus и нейната роля в патологията на прасета. Въз основа на това, следните задачи са били поставени пред нас:
1. Разглеждане на околната среда, биологичните свойства и чувствителността на изолирания култури Staphylococcus hyicus антимикробното средство.
2. За да се изследва свойствата на Staphylococcus hyicus патогенни за прасета.
3. За изследване на факторите на патогенността на изолираните култури Staphylococcus hyicus.
4. разработи метод за идентифициране на Staphylococcus hyicus полимеразна верижна реакция.
1.3. Научно новост. Изследвания върху разпределението на Staphylococcus hyicus от различни източници, включително и от кожата на здрави и болни с потенето epidermitis прасета и други животински видове.
Изследвахме биологичните свойства и се определя ин витро чувствителност от 40 щамове на Staphylococcus hyicus до 17 антимикробни агенти.
Факторите на патогенността на тези бактерии.
За първи път в Руската Федерация проучен изолати S. hyicus полимеразна верижна реакция за наличие на гени, които определят синтеза на ексфолиативни токсини exhA, exhB, exhC и exhD.
Ние открихме, че щамове на Staphylococcus hyicus, изолирани от прасета с признаци на ексудативна epidermitis ферми област Belgorod ген съдържа exhD, синтез-определяне ексфолиативен токсин D.
Метод за идентифициране Staphylococcus hyicus откриване на реакция сода ген полимеразна верижна супероксидни видове специфични.
Практическа стойност на работата. Показани превоз на Staphylococcus hyicus няколко вида селскостопански животни (свине, едър рогат добитък и домашни птици), се оказа в ролята на Staphylococcus hyicus в свински патология.
Метод за идентифициране Staphylococcus hyicus откриване на реакция сода ген полимеразна верижна супероксидни видове специфични.
1.5. Тестване на работата. Материали от тезата, представени:
1.7. Обем и структура на тезата. Теза е представен на 116 страници на пишеща машина текст и включва въведение, преглед на литературата, собствено проучване, обсъждане на резултатите, изводите, практически предложения и препоръки. Работата е илюстрирана с графика, един dentrogrammoy, четири фигури, 10 таблици и 8 снимки. Списък с референции включва 193 източника, от които 175 чуждестранни.
Таксономичен статус, дистрибуция и биологични свойства на Staphylococcus hyicus
Понастоящем рода Staphylococcus, заедно с други, по-малко известни,
Staphylococci - се определя, каталаза, грам-отрицателни коки преходност, вариращи по размер от 0.6 до 1.3 микрона в намазки произволно подредени по двойки, в тетради или клъстери образуват гроздовете са аероби и факултативни анаероби (R. Killper -Baelz и К . Schleifer, 1981; R. De La Fuente сътр 1985 ;. К. Schleifer, 1986).
Staphylococci като причинители на болести по животните
Доказано е, че водеща роля в патологията игра животински koagulazopozitivnyh три основни вида стафилококи: S. ауреус, S. ШегтесНиз и S. hyicus.
S. Aureus е причина за кожни лезии в различни животински видове, което води до различни видове piodermity и целулит. Стафилококус ауреус често предизвиква овце и говеда остър и хроничен мастит, понякога достигащи до гангрена форма.
Staphylococcus hyicus роля в патологията на селскостопански животни и птици
Патогенеза. Л. Johnes (1956, 1961) и Н. Беренс (1958) описват потенето епидермис както спонтанно, произтичащи генерализиран дерматит, които се разболяват прасета на възраст от 5 до 35 дни. Има три възможни форми на заболяването:
Прекъсването на формата, в която смъртта настъпва в рамките на три - пет дни след началото на клиничните прояви;
остра форма, с по-малко интензивен клинични симптоми и появата на животните от смърт по време на пет - осем дни;
субакутен, с продължителност три - четири седмици и, като правило, не водят до смърт на прасенца (L. Johnes, 1956).
Патологична - анатомични промени. Патологичните промени в ексудативни епидермис се концентрират предимно в горните слоеве на кожата.
Според L. Johnes (1956) и N. Underdahl и сътр. (1965), малки розови балони, които се появяват върху кожата в началото на заболяването, често са разположени в горната челюст на прасета, над очите, около ушите, в областта на слабините. С напредването на болестта, те могат да се появяват на задните крака и корема.
По-късно се появяват сух, жълтеникаво - кафява до кафява кора (струпеи), лесно отделяне от тялото. Хистологично изследване на засегнатата кожа ексудативна epidermitis L Ecuyer и Ерихон (1966) установяват, унищожаването на междуклетъчните връзки, както и удебеляване на епидермиса в шест - седем пъти. Тези лезии са подобни на тези промени с паракератоза.
Изследвания някои учени говорят за развитието на пациенти с потенето epidermitis прасенца полиартрит.
Диференциална диагноза. Първо на всички ексудативни епидермис трябва да се различава от други заболявания, характеризиращи се с лезии на кожата, като например едра шарка по свинете паракератоза, гъбични кожни лезии.
Изолиране на Staphylococcus hyicus от различни източници
Бактериологично изследване за избор S. hyicus подлага 371 тестов материал от различни животни, както патологии, и без тях, включително 328 проби от селскостопански животни (свине, свине и крави), 30 проби от птици (30 носачки на възраст 360 - 420 дни), 13 проби от кучета.
Наличието на Staphylococcus hyicus изследвани: останки от кожата прасенца с признаци на ексудативна epidermitis (78 проби) и здрави прасета (56 проби), промиване с конюнктивата прасета (43 проби), тампони на вагиналната кухина сее никакви признаци на патология (33 проби), промивните на бозки (33 проби) от mastitic крави очерня лигавица на носната кухина на свине (24 проби), проби от вътрешните органи на падналите и заклани прасета с признаци на ексудативна epidermitis (11 проби) и пневмония (6 проби), проби от мляко (9 проби) от пациенти с мастит крави, както и Роба гной (9 проби) от пациенти с ендометрити крави.
В допълнение, те бяха изследвани промивки конюнктивата и намазки устата (30 проби) на пилета без патология, гной, зарастване на съдържание от кучета (5 проби) и крави (11 проби), останки от кожата на кучета (8 проби) и крави (15 проби) без патология.
Таблица 4 показва характеристиките на щамовете на нашите животински видове, от които са избрани, избор на източник и клиничните прояви, ако има такива данни.
Както се вижда от таблицата, повечето от изследваните от нас (36, или 78%) щамове са изолирани от прасета и свине, включително прасета с признаци на ексудативна epidermitis - 18 щамове (42%). От крави с признаци на клинично мастит и субклинична ендометрит разпределени и 4 (8.6%), култура S. hyicus, птица без патология - 1 (2,2%), от кучета с не патология - 1 щам (2.2%). Освен това, следва да се отбележи, че изборът на проби с кожата patmateriala прасенца пациенти с ексудативна epidermitis, екстрахиране на Staphylococcus е 100%.
Патогенетични стойност на щамовете, получени от нас да учи в Германия, за съжаление, не е известен. От 26 щама, изолирани в Русия, само четири щама (15.4%) са получени от животните без явни клинични прояви на които: - или заболявания.
Изследването на биологичните свойства на изолиран култури X hyicus показва, че те имат много свойства, които са характерни за другите членове на рода Staphylococcus.
В този документ изследва биологичните свойства на 43 култури
S. hyicus, 26 от които са изолирани в нашите различни животни / 25 щамове и / птици / 1 щам / ферми област Belgorod, и 17 бяха получени от лабораторията по хигиена Институт по микробиология и инфекциозни заболявания на селскостопанските животни Justus Liebig университет (Гисен, Германия) ,
Културата S. hyicus, изолирани от различни животни и птици, в културно - подходящи тяхното естество на морфологични, биохимични и патогенни свойства.
По принцип те растат като чисти култури, особено когато първичното покритие на материала на хранителни среди избираем (VSA, ENA), които са по-благоприятна в сравнение с конвенционалните (кръвен агар, IPA) среда. Култури в миналото понякога са придружени от замърсяване и трудността по-чист otvivki стафилокок култури понякога се изискват допълнителни пасажи на ЕКА или VSA. Морфологичните характеристики в петна оцветяват чрез оцветяване по Грам, S. hyicus представени коки (диаметър 0.6 - 1.2 m) се намира неочаквани клъстери, формата повече наподобяващи гроздове, поне по двойки или тетради, неподвижни спори и не капсули образува добре боядисани с анилинови бои, грам-положителни. На морфологията на S. hyicus брой пасажи в медиите не е засегната.
След изолиране на чисти култури от стафилококи определя техните биохимични и културни свойства. Резултатите от тези изследвания са представени в Таблица 5.
Културите Т. hyicus не са термофилни, т.е. не растат при температура от + 45 ° С, слабо и бавно се разви при + 15 ° С
Подобна дисертация по биологични свойства Staphylococcus hyicus и нейната роля в патологията на свине