Насоки за практическо обучение №12
На тема: ". Семейството на чревни бактерии (Escherichia, Salmonella)"
1. определи знанията на изследването на морфология, биологията и устойчивостта на Е.коли, Salmonella, лабораторна диагностика и профилактика на заболявания, причинени от тях.
2. За да изучават правилата за улавяне, направления, регистрацията и доставката на материала в бактериологични лаборатория в чревни инфекции.
3. магистър методите и техниките на първия етап на микробиологично изследване на изпражненията, за да се изолират ентеробактерии.
4. Разглеждане означава специфична профилактика и лечение на заболявания, причинени от Escherichia, Salmonella.
Морфологичен и багрилни свойства Escherichia, салмонели чрез микроскопия и готови продукти в таблица, скица, знак.
о остра чревна инфекция (или се подозира);
о при кърмачета под 2-годишна възраст при внос;
о имат контакт с пациенти с чревни инфекции;
· Collotype на тръбата да се постави броя съответстваща на посоката на броя;
· Тръби се отстраняват от стерилен тампон напоен тампон (30% глицерол + 70% IPC) излишък на това се накисва стена на тръбата.
· Ротари движението се въвеждат в тампон на изпит на ректума, който лежи на лявата си страна с тези, предоставени на корема крака на дивана;
· Възстановени тампон се поставя в суха стерилна епруветка, без да докосва ръбове;
· Преди прилагане на тръбата за лабораторен тест се поставя в продължение на два часа в хладилник.
Освен изпражнения се събират незабавно след дефекация на кораба, гърне, или специална тава със стъклена пръчка, телена примка, дървена шпатула. В присъствието на примеси в изпражненията патологична (слуз, кръв, гной) следва да бъдат включени в пробата е взета. В изпражненията не се поставят в консервант, се суспендира в стерилен IPC съотношение 1: 5 или 1:10, и се засява не по-късно от 2 часа след приема. Материалът се поставя в консервант, за да се запази изследването при температура от 4-6 0 ° С в хладилник.
1. Разглеждане правилната посока, рецепция материал, който идва да учи в резервоара. лаборатория (вж. Приложение №2).
2. Научете правилата и приема доставката на материала по чревни инфекции (вж. Приложение №1).
Извършва първия етап на бактериологично изследване на родния материали (изпражнения), за да се изолират ентеробактерии.
· Капка от инокулума използване бактериологичен контур (стъклена пръчка, тръба, пипета) се нанася върху едната повърхност на средата на плоча в петриево блюдо, излиза 1,5- 2 cm от ръба на чашата;
· Засяване получаване на шпатула, триене материал в цялата хранителна среда чрез конвенционални повърхност процедура;
· Внимание! В проучването на стол материал от един предмет инокулира върху петриеви панички със следните условия.
За да се изолира Escherichia (37 0 ° С, 18-20 часа).
За да се изолира Shigella (37 0 ° С, 18-20 часа).
- Ploskireva с антибиотици;
- Ploskireva без антибиотици.
За да се изолира Salmonella (37 0 ° С, 18-20 часа).
· Един тест линия материал се инокулира в епруветка с бульон selenitovym (среда за съхранение на Salmonella Shigella и 37 0 ° С, не повече 18chasov.
Напълнете в таблицата чрез определяне на специфични средства за профилактика и терапия ehsherihiozom, коремен тиф, паратиф А и Б.
Алгоритъм бактериологично изследване на проби
- На материала прави цитонамазка, оцветяване по Грам, mikroskopiruyut и да даде предварителен отговор.
- Материалът на един предмет се посяват на петрита с 6 средства: Ендо и Левин - за изолиране ЕРЕ; Ploskirova Ploskirova антибиотик и без антибиотик - за изолиране на Shigella; ВСА - за изолиране на Salmonella; SPA - за разпределяне на Yersinia. Всички култури се инкубират при 37 ° С за 24 часа, с изключение на чаши с ВСА, която се инкубира в продължение на 48 часа.
- Материал selenitovy инокулира в бульон и се инкубира при 37 ° С 14-16 часа.
- С снимки проведени fagodiagnostiku (и чума, коремен тиф, salmonelloznym, поливалентни бактериофаги shigelloznym), т.е. бърз метод за идентификация, за да се произнесе с предварително отговор, но не изключи бактериологични изследвания.
- В блюдо на Петри с Ендо среда (Levin) избиране типични 10 изолирани колонии срещу ЕРЕ.
- 1/3 от всяка колония изследва за осигуряване с Е.коли. с помощта на РА върху стъклото с поливалентен esherihioznoy ОКА-серум.
- Втората третина на същото колония субкултивирани върху една от първичната идентификация медиите: Kligler или Ръсел Olkenitskogo или за определяне на генерични аксесоари култура и се инкубират при 37 ° С 24 часа.
- Остатъкът (трета) част от същия колония субкултивирани върху SPA скосени, за да се изолира и натрупване в чиста култура и серологично неговата идентификация и се инкубират при 37 ° С в продължение на 24 часа.
- Провеждане на първичната идентификация култура (определи племенната си принадлежност) естеството на растеж в средносрочен Kligler (Ръсел, Olkenitskogo)
- Направи посяване на чиста култура на среда Хис и SPB с две индикаторни хартии (за индол и сероводород) и се инкубират при 37 ° С 24 часа.
- Simmons посев среда и се инкубира при 37 ° С 24 часа.
- Засяването в колона полутечни агар и се инкубират при 37 ° С 24 часа.
- Проба оксидаза.
PS. Първите 5 тестовете са тестове на минималния брой диференциал ентеробактерии.
- RA поставя върху стъкло с поливалентна esherihioznymi OKA, RCF, ACS, CPR, CKE серуми (принадлежащ към рода потвърждава и количеството на серумите за определяне серовар ЕРЕ).
- RA постави върху стъклото с жива култура и OK-имуноглобулин за определяне на K антиген и RA върху стъкло с нагрява култура (при 100 ° С за 30 минути във водна баня) и група и факторен О - серуми за определяне на О - ЕРЕ антиген.
- Ако не ОК - имуноглобулини фактор и група и 0 серуми, може да се определи чрез определяне серовар ЕРЕ разположени RA с живи култури и се нагрява (при 100 ° С в продължение на I час) и група OK - серуми.
- Проба изолиран щам чувствителност към антибиотици и се инкубират при 37 ° С 24 часа.
- Записите на резултатите от всички тестове.
- Y подвижни щамове допълнително определени в Н-антиген RA-стъкло esherihioznymi Н серуми.
- Напишете отговора (заключение):
"Получават Е.коли 020 :. 84 К, чувствителни към хлорамфеникол и тетрациклин канамицин междинно устойчиви на пеницилин и ампицилин".
Свързани статии