Тогава аз имам моравото рогче INFA. Реших да се създаде отделна тема за нея, Молдова Komrad поддържа. Темата за мен до този момент, може би някой има интерес. Информацията не е мой, от kakihto Инета не си спомням къде.
Отглеждане на култури от моравото рогче.
Царевичен сироп (твърди Staley) - Захароза 5 грама - 10гр
KH2PO4 - 0,5 грама.
MgSO 4 * 7H2O - 0,3 грама. Агар - двайсетграм
Дестилати. вода до 1000 ml. 2.NL563 (предварителен):
Царевичен мацерат (твърди Staley) - 20гр царевичен сироп (твърди Staley) - Захароза '10 - '20
KH2PO4 - 1 година
MgSO 4 * 7H2O - 0,3 грама. Дестилати. вода до 1000 ml. 3.NL500 (ферментация): Амониев сукцинат - Манитол '30 - '30
KH2PO4 - 1 година
MgSO 4 * 7H2O - 0,3 грама.
1,2 пропандиол - 30 мл.
Дестилати. вода до 1000 ml. (Да се доведе рН до 5.1 с 10% -на солна киселина).
(Грегер ERGE D. D. Получаване на производни на лизергиновата киселина в потопена култура Claviceps paspali Stevens et Хол. Microbiology 1966 T.35, брой 4, S.606-611).
Култивиране и извличане на алкалоиди на моравото рогче
Култивиране и извличане на алкалоиди на моравото рогче
Осъществяване културалната среда чрез смесване на следните компоненти с 500ml
дестилирана вода в тесен 2L колба врата:
Са (NO3) 2 - 1 гр
КН2РО4 - 0,25g MgSO 4 - 0,25g KCl - 0125 гр
Fe2 (SO4) 3 * 6H2O - 8,34mg ZnSO4 - 3,44mg
захароза - 100 гр
ядене на пилешки ембриони - 50гр
След това обемът се довежда до 1 литър средни определяне рН 4 с помощта на разтвор на NH4OH и лимонена киселина. Приготвеният Средата се стерилизира в автоклав. След това се инокулира среда предварително обработен (както в метода Грегер и ERGE) култура на мораво рогче. Тогава той млъква случай на стерилен памучен тампон и се инкубира в продължение на 2 седмици. Периодично проверявайте рН и да я поддържа в близост до рН 4.
След 2 седмици на културата ще бъде наблюдател визуално) Това е майка среда. Отнеме няколко идентични контейнери (съдове) обем 1 халони с гумена запушалка. В задръстване направи 2 дупки, в които двете стъклени тръби - къси и дълги. Горната част се вкарва в дълга тръба от стерилен филтър памук и гумена тръба, свързана към компресора (за аквариуми). Кратко тръба прикрепен (чрез гума) колба Erlenmeyra дълга тръба, която също с две стъклени тръби с различни дължини и в която има натриев хипохлорит.
Така makarom средно с културата газирани C.purpurea успешен (защото те аероби) и поддържа чиста култура.
Но всичко това по-късно. Първо ферментационния демонтаж и опаковани в пакети крафт се стерилизират чрез автоклав. 1-литрови колби напълнени среда togozhe състав на 2.3-3.4 на обема и също Автоклавируем. Delee стерилен 1 галон Infect колба мастербач среда ферментатор събира и включва един компресор. Ако наблюдател въздушни мехурчета един преминаващи през хранителната среда. Относно метод за 10 дни при Т = 25 "С в тъмно място достатъчно.
След 10 дни от културална среда направи 1% алкохол, добавяне на подходящо количество от 95% етанол. Резерв за още 2 седмици. След 24 дни от култивирането се спира. се прибавя към среда 2% винена до ту на, разбърква се и се оставя да престои в продължение на един час. След това, разтворът се алкализира до рН 9 с помощта на NH4OH и се екстрахира алкалоиди бензен или смес от хлороформ и изобутанол. Отново ekstraktiruyut 2% р-ром алкохол вино-ви и се суши под вакуум. Алкалоиди тартаратни получи най-подходящата форма за съхранение. Преди по-нататъшно синтез от тях трябва да се превърне в свободна форма.
От себе си искам да добавя, че входящия въздух стерилизация е по-добре да се използва бактерициден лампа се поставя в тръба. Измийте добре
надежден.
Унгарски метод за производство на алкалоиди
1. смила ергот обезмаслена с петролев етер.
2. Смесва се суспензия на магнезиев оксид (MgO изгори магнезий) във вода и се екстрахира с бензен алкалоиди.
3. От екстракт алкалоиди бензенови екстракт 2% винена киселина.
4. От екстракт вино алкалоиди тартарати под формата на солени NaCl
5. Утайката се смесва с магнезиев оксид и алкалоиди се екстрахират с хлороформ.
6. Хлороформеният екстракт се суши с безводен Na2SO4 и хлороформ се изпарява във вакуум поток т CO2 по-малко от 60 "С
Остатъкът се излива в 5-кратно количество петролев етер се утаява
в алкалоиди утаи флуоресцентна утайка се филтрува и суши.
Свързани статии