Заповед на Министерството на здравеопазването на СССР от 7.31.78 N 720 "ON подобряване на грижите за пациенти с гнойни хирургични заболявания и за засилване на мерките за борба с вътреболничните инфекции"
Приложение N 2. набор инструкции бактериологичен контрол на хигиенни мерки в лечебните заведения (хирургични отделения, отделения и интензивно отделение)
1.1. Инструкции за бактериологичен контрол на комплексни хигиенни мерки и контрол на стерилност на медицинските изделия, предназначени за служителите на бактериологични лаборатории и Министерството на здравеопазването дезинфекционни станции, извършващи бактериологичен контрол.
<*> - Инструкция е разработен от All-съюз научно-изследователски институт на дезинфекция и стерилизация на Министерството на здравеопазването на СССР.
1.2. Бактериологични лаборатория на санитарно-епидемиологични и дезинфекционни станции се наблюдават най-малко два пъти годишно, бактериологични лаборатории на лечебни заведения, контролирани хигиенни условия (замърсяване на различни обекти и въздух) веднъж месечно, както и контрол на стерилност на инструментите, превръзки, хирургически бельо, ръчно хирурзи и хирургически кожа поле (по желание) - 1 път на седмица.
1.3. Обектите на изследване по време на бактериологичен контрол са:
- Различни обекти на околната среда;
- кръвопреливане система за повторно използване.
- сонди, катетри, bougies, гумени ръкавици и dr.izdeliya на каучук и пластмасови съединения;
- хирургически конци материал, получен за използване;
- хирургия на ръката, а кожата на хирургичното поле.
2.1. Изследване на микробно замърсяване на въздуха на околната среда.
2.1.1. Бактериологично изследване на въздуха на околната среда предвижда:
- определяне на общото съдържание на микроби в един мед. m въздух.
- Определяне на съдържанието на стафилококус ауреус в 1 куб. m въздух.
2.1.2. Air вземане на проби за бактериални изследвания са били проведени в следните области:
- отделение и интензивно отделение и други. помещения, изискващи стерилни условия.
2.1.3. Въздушни проби бяха взети от аспирация използване на електрически Krotova.
Рисуване скорост на въздуха е 25 литра на минута. Количеството на въздуха трябва да бъде приет 100 литра за определяне на общото съдържание на бактериите и 250 литра за откриване присъствието на Staphylococcus Aureus. метод изследване на утаяване на въздуха се допуска в изключителни случаи.
2.1.4. За общо бактерии в 1 см. m Air вземане на проби се извършва върху 2% Хранителен агар. Културите се инкубират при 37 ° С в продължение на 24 часа, след което се оставя да престои в продължение на 24 часа при стайна температура и се преброява броя на колониите отглеждат и произвеждат преизчислява един мед. m въздух. Ако плочи от хранителен агар нарастват колонии от гъбички, тяхното преброяване и да преброяването на един мед. m въздух. номер на запис на гъбички посочено отделно.
Забележка: При извършване на машината Krotov от една стая в друга на неговата повърхност се обработва с разтвор на дезинфектант. Таблица, ставите и вътрешния капак инструмент с вътрешни и външни страни изтрива с алкохол (70 ° С.).
2.1.5. За да се определи наличието на вземане на проби S. Aureus извършва върху вителиновата сол агар (VSA). Плаките се поставят в инкубатор при 37 ° С за 24 часа и се оставя да престои в продължение на още 24 часа при стайна температура. Колонии на подозрителен ауреус, подлежат на задължителна микроскопия и по-нататъшно идентификация.
С вителиновата сол агар първо се отстраняват стафилококови колонии, които образуват призматичен хало около колонии (положителна реакция letsitovitellaznaya) се подлага на по-нататъшно проучване и пигментирани колонии letsitovitellaznoy с отрицателна реакция. Съмнителни колонии са субкултивирани върху плочи с кръвен агар или мляко. Допълнително проучване се извършва по тяхната схема.
Шофиране бактериологични изследвания stafolokokk.
Засяване на избираем среда (вителиновата-сол, лактатна сол или млечен вителиновата сол агар). Инокулираната среда се инкубира при 37 ° С в продължение на 2 дни или един ден термостат и допълнителни 24 часа в светлината при стайна температура.
2-3. Втори или трети ден.
Otvivka в агар се накланя за по-нататъшни изследвания са не по-малко от две колонии, заподозрени ауреус. За изследването otvivayut предимно колонии дават положителна реакция letsitovitellaznuyu. При липса на колонии върху плаките се подлагат на допълнително проучване пигментиран колонии морфологично подобни с Staphylococcus. При едновременното присъствие на стафилококови колонии върху плаки, различаващи се по пигмент трябва otvivat поне два различни вида колонии.
Тръби с посев се поставят в термостат при 37 ° С в продължение на 18-20 часа.
4. Четвъртият ден.
След инкубиране при ежедневно щамове проверява морфология багрилни свойства (оцветяване по Грам) Изберете plazmokoaguliruyuschey активност. Трябва да се отбележи, че естеството на растежа на наклона на културата в някои случаи дава възможност да се "предскаже" принадлежи към вида Staphylococcus ауреус и Staphylococcus Epidermidis. На първо място, като правило, предоставят богата униформа, буйна растеж, а вторият - много оскъден и неравномерен растеж по време на засяване.
Оцветяване по Грам се извършва по конвенционален начин. Под микроскоп, оцветени от Грам-отрицателни стафилококи има формата на виолетово-синьо коки, подредени в групи или малки групи ( "дантела").
Plazmokoaguliruyuschuyu активност се проверява в реакцията на плазма коагулация (RCR).
Въз основа на резултатите от дейността на RCP и letsitovitellaznoy в 70-75% от случаите, на четвъртия ден от изследването могат да бъдат потвърдени от изолиран щам са от вида Staphylococcus ауреус, и е издаден съответния отговор. Диаграмата показва възможните комбинации от изпълнения и резултати от letsitovitellaznoy активност определяне plazmokoaguliruyuschey.
Ако културата е едва letsitovitellaznoy plazmokoaguliruyuschey или активност, се изисква крайната реакция за идентифициране на други признаци на патогенност (манитол ферментация при аеробни условия - AFM или ДНК-азна активност).
В тези случаи, отговорът е издал, в зависимост от резултатите, получени при определяне на тези характеристики.
Ако е необходимо, на 4-тия ден от изследването могат да бъдат доставени отговор определяне на ДНК-азната активност на анаеробна ферментация или манитол.
Определяне антибиограма извършва само след изолиране на чиста култура, съгласно указания (метод избор на лечение, и т.н.).
Изолираният култура на стафилококус ауреус фаг типизиране субект.
Отчитане на фаг типизиране резултати от антибиотик чувствителност, ДНК-азна активност. Окончателно доставка на отговора.
Критерии за оценка на микробно замърсяване в хирургични клиники въздушните
2.2. Изследванията на микробно замърсяване на обекти на околната среда.
2.2.1. Бактериологично изследване на микробно замърсяване на обекти от околната среда предвижда определянето на Staphylococcus Pseudomonas Aeruginosa, колибактерии бактерии и aeromanad (строго въз основа на доказателствата). Вземане на проби от повърхностите на различни обекти се извършва чрез промиване.
2.2.2. Като промивки произвеждат стерилен памучен тампон на пръчка, монтиран в тръбата, или марля, 5x5 cm, в стерилизирани хартиени торби или в петриеви панички. За овлажняване тампони в епруветки с тампони се излива 2.0 мл стерилен физиологичен разтвор. При използване салфетки стерилен физиологичен разтвор се разпределя в стерилни епруветки в 2.0 мл. улавяне салфетки стерилни пинсети, навлажнени с физиологичен разтвор от тръба, поставена в същата епруветката след тест избърсване обект на.
2.2.3. В контрола на малки обекти проби, взети от повърхността на цялата тема. При наблюдението на обекти с големи повърхностни промиването се извършва на няколко места на обект зоната за изпитване на приблизително 100-200 кВ. см.
2.2.4. За да се изолира стафилококи изработка сеитба директно върху блюдо на Петри с вителиновата сол агар (вж. Схемата за изследване на Staphylococcus Aureus). Освен това, като носител се използва бульон с 6.5% натриев хлорид бульон с 1% глюкоза, излива се в епруветки в 0,5 мл, в която посява при 0,2-0,3 мл промиване течност. Заразените Епруветките се инкубират при 37 ° С за 20-24 часа, след което да засяване на VSA (вж. Проучване диаграма на стафилококус ауреус В).
2.2.5. За откриване на колиформи група бактерии инокулират в среда обогатяване, за които тампона (марля) се потапя в 10-20% холева бульон или среда Kessler. След един ден от инкубиране при 37 градуса по Целзий се направи повторно засяване в сряда Ендо. Съмнителни колонии върху Ендо среда mikroskopiruyut и субкултивират на втория образец на ферментацията - Хис среда с глюкоза. Средата се инкубира в продължение на 24 часа при 43 градуса С.
Забележка: При използване на свински жлъчен за подготовката на холова концентрация бульон жлъчката трябва да бъде 20 пъти по-малко.
2.2.6. За идентифициране Pseudomonas Aeruginosa специални култури не може да произведе. Обикновено колонии от Pseudomonas Aeruginosa могат да бъдат разкрити по кръвен агар или среда Endo. Колониите подозрителни за Pseudomonas Aeruginosa, субкултивирани върху агарови наклонени, съдържащи 5.2% глицерол или манитол. Колониите от Pseudomonas Aeruginosa да предоставят наклонената повърхност изобилен растеж със зеленикав оттенък, мазна консистенция на мед с характерна миризма. Изолираният Грам оцветени култура, mikroskopiruyut определи хемолитични свойства чрез поставяне на плочи с кръвен агар.
Примерен списък на съоръженията, подлежащи на бактериологичен контрол:
А. упойка стая
1. Тръбата за инкубиране
2. Маска анестезиологичен апарат,
3. Tee анестезиологичен апарат,
4. стик
7. чанта дишане
8. ръце анестезиолози - resuscitators, sester-
Разбърква се, всички компоненти с изключение на глюкоза и тиогликолова киселина.
Цистин предварително разтворен в малко количество дестилирана вода, докато постепенно добавяне на 10-20% разтвор на натриев хидроксид до пълното му разтваряне. Сместа се алкализира с 10% разтвор на натриев хидроксид до рН 8.0-8.2, се вари в котел с парна риза или върху отворен пожар при постоянно разбъркване, докато разтопен агар 5-10 минути. Тя може да се автоклавира 20 мин при 100 ° С. след това се добавя гореща вода до първоначалния обем, добавя глюкоза и тиогликолова киселина, филтрува се през кърпа, довежда се до рН 7.2-7.3. разтвор Resazurin се добавя, смесват и се разпределят в стерилни епруветки с 20 мл. Стерилизира за 20 минути при 120 ° С.
Тиогликолова среда може да се съхранява преди сеитба, като го защитава от светлина, при стайна температура в продължение на не повече от 7 дни от деня на получаване.
Забележка: 1. оставя готвене среда без натриев резазурин.
2. право да използват други видове агар, но с редица предварително vytitrovannym.
- основен
- Заповед на Министерството на здравеопазването на СССР от 7.31.78 N 720 "ON подобряване на грижите за пациенти с гнойни хирургични заболявания и за засилване на мерките за борба с вътреболничните инфекции"
Свързани статии