За създаване аноксични условия са физически, химически и биологични методи.
1) glubinuplotnyh посяване в културална среда (кръвната захар или агар): а) засяване бар високата убождане в агар (анаероби растат в дълбочина посев); б) посяване в тръбички Vignale Veyona;
2) отглеждане при специални условия: при коте Tarotstsi среда (течна културална среда, - 0,5% глюкоза, парчета от животинска тъкан, например, на черния дроб, което се свързва кислород). Преди засяването среда се нагрява и бързо се охлажда. След засяването излива слой на стерилен вазелин масло.
в) расте в анаеробни - специален съд, от който е отстранен кислород.
Анаеробните - дебелостенна метален цилиндър с добре запушалка капак с гумено уплътнение. Това поставя блюдото на Петри (капак нагоре) с култури и въздух отстранява или замества с инертен газ.
Химичните методи - абсорбцията на атмосферен кислород в запечатан съд (апарат Aristovskaya) химикали (например алкална пирогалол или натриев бисулфит).
Биологични методи (метод Fortner) - ко-култивиране на анаеробно и аеробно. След посяване петрита запечатани с пластелин или парафин. Първоначално, в блюдо на Петри, аероби умножават, а когато се използва кислорода, започват да растат анаеробни бактерии.
Изолиране на чиста култура от аеробни и анаеробни бактерии.
Чиста култура от микроорганизми - популация от клетки (видим растеж) от един вид. който е израснал в стерилна среда.
Изолиране на чиста култура - бактериологичен метод. Този метод е основен метод за диагностициране на бактериални инфекции.
За да се получат чисти култури е необходимо да се отделят бактериални клетки от различни видове от друг. Най-често се използват механични методи за отделяне на клетки - специални методи на засаждане:
а) засаждане мистрия върху Drygalski три блюда на Петри; третата чаша на отделните колонии растат; всяка колония - един вид, тъй като Колония - потомството на единична клетка;
б) посяване линия "удари" или "мрежа": да посев периодични движения; на мястото, където агар има голям брой микробни клетки, растежът ще бъде под формата на непрекъснат ход, и отделни колонии, за да растат от ударите с малък брой клетки;
По този начин, с помощта на специални методи за сеене са изолирани колонии от различни видове бактерии.
Изолиране на чиста култура се провежда в три етапа:
Първият етап (първи ден):
а) на материала (смес от бактерии от различни видове) се получава като намазка. Грам-оцветяване и mikroskopiruyut;
б) да материал култури (смес от бактерии) в петриево блюдо с IPA пунктираната метод или по метода Drigalski и се поставят в термостат при 37 ° С в продължение на 24-48 часа.
Вторият етап (втори ден):
а) спазване култури и извършват описание колонии от различни видове (размер, форма, цвят, повърхност, ръб форма, структура, последователност);
б) намазки получени от колониите и се оцветяват Грам (колонии трябва да съдържат един вид бактерии);
в) да презасяване различни колонии в различни епруветки с скосен IPA за натрупване на чиста култура; отгледани в инкубатор при 37 ° С в продължение на 24 часа.
Трети етап (третия ден) има за задача и идентификация (определяне на видовете) проверка на чистотата на културата и култура. За да се определи вида на изследването, морфологични, културни, биохимични и багрилни свойства:
а) отбележи модел на растеж на изолиране на чисти култури на МРА (визуално се характеризира с единна растеж);
б) намазка е готова. Грам-оцветяване и mikroskopiruyut; ако културата е чист, след това показват същите морфологични и багрилни клетки;
в) да реколтата върху околната среда Хис и ВСН за saccharolytic на изследването и протеолитични свойства на чиста култура; оставя в термостат при 37 ° С в продължение на 24 часа.
От комбинацията на морфологични, багрилни, културни и биохимични свойства сключва специфичен аксесоар изолиране на чисти култури от бактерии. Ако е необходимо, изследване и други характеристики (вирулентни фактори, антигенна структура, чувствителни към фаги и др.).
Настройката за бактериологично практика патоген тип ви позволява да се диагностицира заболяването, така че изолирането и определянето на чиста култура - този метод estbakteriologichesky за диагностика на инфекциозни заболявания. Производство по този метод е задължително включва определянето на чувствителност на патоген изолира чист култура на антибиотик (определяне на антибиограма).
Изолиране на чиста култура от анаеробни бактерии също се извършват в три етапа. Това се получава чиста култура от една клетка и постигане на растежа на микроорганизми като изолирани колонии, с последваща идентификация и се засадят отново.
Характеристика на изолиране на чиста култура от анаеробни бактерии е да се използват различни методи за създаване аноксични условия (вж. По-горе).
Първият ден. Направи посеви (земя, гной) в сряда Kitty Tarotstsi.
На втория ден. за получаване на колонии се презасяване сряда Kitty Tarotstsi Tseysslera метода, метода и начина Уайнбърг Перец.
На третия ден. колония субкултивират в епруветка с нова среда коте Tarotstsi за натрупване в чиста култура; извършване на идентификация на чиста култура от анаеробни бактерии върху морфологичните, културни, багрилни, биохимични и антигенни свойства.
Засяване на метод Tseysslera. Една капка (контур) на материала със среда коте Tarotstsi последователно посяват в три блюда на Петри с кръвен агар. Култури, поставени в анаеробно или апарат Aristovskaya, които поставят в инкубатор. На следващия ден, третата чаша на отделните колонии растат. Уверете се, тези колонии на субкултура среда Kitty Tarotstsi натрупване в чиста култура за разглеждането му свойства и по-точно определяне на вида на микроорганизми.
Сеитбата на метод Weinberg е. материал Pasteur пипета трансфер от среда последователно коте Tarotstsi 3-5 тесни тръбички с диабет IPA, потапяне в разтопен агар пипета на края на тръбата. Епруветките бързо се охлажда със студена вода. Агар втвърдява и разделя микробните клетки в дълбочина на агара. От тези клетки растат колонии са се преминават към нова среда Kitty Tarotstsi натрупват чиста култура и идентифицирани.
Свързани статии