топене препарати пещи

11-ключови броячи, ястия.

Фиксиране. След като материал за микроскопско изследване, се поставя в фиксиране течност. Целта на заключване е за забавяне на промените, настъпили в тъкани, изолирани от жив организъм и запазване на структури на тъкани и клетки в състояние на живота си сграда.

За целите на еднаквото измиване на тъкани фиксиращите части, контейнерът се разклаща с период от няколко (1-2) часа. За еднакви импрегниране материал фиксиращите броя органи взети размер от 0.5 - 1 cm.

Както държача използва 10% формалин разтвор, получен във физиологичен разтвор, така че дестилирана вода причини наводнения и значително подуване на тъканите. За хистологични и хистохимични изследвания в Bouin течност се използва като консервант. Фиксаторът може да се съхранява - от 48 часа до 30 дни.

Пране и дехидратация на материала.

Промиване на условие първоначалното пречистване на материала от скобата и различни утаяване получена по време на фиксиране. Произвежда промиване в течаща вода в продължение на 10 - 20 минути.

За дехидратация, набор алкохоли (етанол) до концентрация от 70 до 100%.

За да се получат добри микроскопични препарати голямо значение има постепенно обезводняване, както с бързо обезводняване на тъкан (особено тези, които имат свободна последователност) може да се свие и деформира (Eliseev, 1954; 1959).

Се използва следната процедура обезводняване алкохоли:

70% - 2 часа. 80% - 12 часа. 90% - 2 часа. 96% - на 1 час. 100% - на 1 час.

Алкохоли обновяват периодично определя, както се случва по време на работа на наводнения и замърсяване вещества от извлеци, особено мазнини.

Изливане втвърдяващ материал среда.

След дехидратация фрагменти тела внимателно promakayut филтърна хартия и се поставят в 1% разтвор на целоидин.

Разтвор, получен чрез разтваряне на един грам целоидин в 100 мл смес от равни части от алкохол и етер. В тази концентрация целоидин лесно прониква във вътрешността на обекта и напълно го импрегнира. Средната продължителност на материала на съдържание в целоидин разтвор на 6 дни.

В следващата стъпка материалът се почиства от целоидин. За този орган и тъканни проби се промиват два часа хлороформ, след това 2 часа в термостат при 37 ° тегло snegopodobnoy представлява наситен разтвор на парафин в хлороформ. Следваща проведе в термостат при 56 градуса в чист парафин импрегниране на 1 час. След това пробите бяха прехвърлени в чиста восък - за 1 час. След това, парчетата се поставят в смес от 100 г парафин и пет грама бързо охлаждане във вода с лед, за да се предотврати образуването на въздушни мехурчета в парафинови блокове.

Получените парафинови блокове са кондензирани към дървените тухли, необходими за осигуряване на режещите елементи на тъкан микротом.

За капсулиращ материал, използван бял восък, имащ точка на топене не по-висока от 52- 54 ° С За по-голяма пластичност парафин плюс 5% пчелен восък. За да се измести газове от разтопен восък излишък няколко пъти върху гореща плоча, нагрята до затворена спирала, последвано от бързо охлаждане в ледена баня.

Получаване на резени, произведени в Sannomiya микротом с микротом ножове. Дебелината на получените срезове - 1, 2, 3. 4, 5, 6 микрона.

За да премахнете гънки и raspravki лента или поредица от парчета се поставят върху повърхността на широк съд (кристализатор) с вода при температура от 40 ° С филийки Raspravka направи дисекция на игла. След това се изправи секции се поставят върху специално приготвени слайд и се сушат върху специална таблица загрява до 370 градуса. Очила са обезмаслени в алкохол-етер (1: 1).

За по-трайни залепване парафинови срези Слайдовете внимателно предварително смазани протеинова смес с глицерин в съотношение 1: 1. Увреждане на плъзга тънък слой от сместа се нагрява в продължение на пламък за отстраняване на алкохол лампа влага. Освен това, тези на стъкло, използвано за свързване на части от лекарството. Стъкло знак мастило се смесва с протеина (1: 1) и калциниран.

Преди боядисване секции, добре изсушени и залепени на предметно стъкло, без восък. За да направите това, секции бяха поставени в продължение на 30 секунди. I. в ксилен в продължение на 30 секунди, последвано. в ксилен II. След разтваряне на формулировките восъчните инкубират в продължение на 1 минута. в 100% етанол и след 1 мин. 70% алкохол. След алкохоли препарати се изплакват с дестилирана вода.

Оцветяването на резени, произведени по метода на Mallory (Roskin, 1951).

Участъци от дестилирана вода се прехвърлят в 0,1% разтвор на киселина фуксин продължение на 3 минути. В същото време придобива получаване на розов цвят секции. Следващата стъпка - 5 минути. в 1% разтвор на фосфомолибденова киселина а. Това решение осигурява киселина фуксин оцветяване. Секциите се промиват в дестилирана вода, след това в продължение на 1 мин. потопена в смес от анилиново синьо оранжево G и оксалова киселина. (Сместа Mallory) (Roskin, 1951).

След оцветяване, секциите се диференцират в 70% алкохол (2-3 сек.) И 96% алкохол (2-3 мин.), Държани през ксилол и затворена в Канада балсам. Готовите продукти, които могат да се съхраняват за неопределено време, които се изучават под микроскоп при увеличение от лещи 8 х. 40 х. 90 х (потапяне).

фиксирани секции тъканни mikroskopiruyut лекарства на устройствата "Olympus" (Япония) и "Jenamed" (Германия).

увеличение подбор, когато се обмисля обекти зависи от конкретни задачи - 40 х 1000 х.

• за гонадите - диаметърът на зрели и незрели ооцити ооцити диаметър на сърцевината, разстоянието от яйцеклетка мембрана към ядрото като етап компонент яйцеклетка зрялост (Sakun, Butsko 1963.), Неправилно оформени ооцити обуславят цитоплазмена мъжка полова зрялост етап продукти (AF Turdakov 1972), състоянието на стените на ампулите и кръвоносните съдове;

• черен дроб - паренхим и структурата на съединителната тъкан, диаметърът на ядрата на хепатоцити, състоянието на кръвоносните съдове, състоянието на цитоплазмата на хепатоцити;

• далак - същото като за черния дроб, както и размера на червено и бялата пулпа, наличието на кръвни клетки, натрупването на пигменти;

• бъбрек - състояние на епитела на усложнените каналчета, състоянието на кръвотворната система, съединителната тъкан, капсула на Бауман, натрупването на пигменти.

Цитометричен изследвания се провеждат с помощта на зрителен микрометър с мащаб, специфични за всеки отделен микроскоп