G01N33 / 48 - биологични материали, такива като кръв, урина (G01N 33/02-G01N 33/14, 33/26 G01N, G01N 33/44, 33/46 G01N имат предимство; определение поникване A01C 1/02); устройства за броене и измерване на кръвни клетки (хемоцитометър) (кръвна клетка, разпределени по повърхността чрез сканиране на повърхността G06M 2.11)
Собствениците на патента RU 2292550:
Smirnov Андрей Юревич (RU)
Смирнова Олга (RU)
Изобретението се отнася до лекарство, а именно лабораторна диагностика. Метод за диагностициране на непоносимост дозиране на отделните вещества или смеси от тях се извършва чрез оценка на степента на устойчивост на еритроцитите при излагане на лекарства ин витро при ниски моларни концентрации (10 6 М / л), в качеството на плазмената мембрана на червените кръвни клетки, поставени в хипотоничен среда. Изобретението се отнася до универсални, неразделна и надежден начин, което позволява да се определи поносимостта и техни комбинации за последващо лечение, и за да се определи причината и смислен лекарство, което причинява или странична реакция. 3-ил. Таблица 1.
Изобретението се отнася до лекарство, а именно до методи за лабораторна диагностика.
В местна и чуждестранна литература има твърде много информация за истинските опитите за диагностика на употреба на наркотици нетърпимост (LN) с отделни методи. Таблица 1 показва най-информационен диагностични методи LN.
Известните методи за диагностициране на непоносимост лекарство
Fradkin VA Алергология ин витро. М. 1975 S.73-80.
За диагностика на истински алергични реакции, свързани с имунологичен етап, има модерен ELISA за откриване на специфични IgE и IgG антитела към някои лекарства в кръвния серум. Откриване на специфични антитела към лекарства е трудно, или поради постоянните промени в тяхното титър, или поради тяхната пълна липса на, тъй като много лекарства не са алерген или имат много метаболити, всички от които могат да работят самостоятелно. Обръща се внимание и на факта, че много нежелани реакции към лекарства са или псевдо-или токсични или фармакологичен, за които не се образуват специфични антитела. Също така, лекарства не са алергени. Дори и ако те са оформени от хаптени, те не могат да притежават свойства, необходими за отговор на антитяло. Накрая, наличието на антитела не често водят до клинични прояви на алергични реакции и няма доказателства за това. Следователно, тези методи не трябва да се считат за диагностика.
В литературата няма данни за превантивна стойност използвани LN диагностични методи.
В терапевтичната практика понастоящем се използва комбинирана терапия, състояща се от няколко лекарства с различни точки на приложение, така че е необходимо да се определи ефекта на комбинираното действие на лекарства.
Следователно, метод за диагностициране непоносимост лекарство трябва да бъде универсален, неразделна, което позволява да се определи поносимостта на лечението и ефекти на техния комбиниран ефект, като се отчита взаимодействието лекарство-лекарство. Арсенал изследване на лечението трябва да са достатъчно широки (поне 1000).
Прототипът на претендирания метод е избран erythrograms киселина метод (IF Terskov Gitelzon II Метод химикал (киселина) erythrograms биофизика - .. 1957 - Vol.2, S.259-266), който се използва за диагностика радиация заболяване и неговата тежест , хепатит, различни съпротива отравяне на еритроцитите да лизират химикал.
Претендираният метод се провежда както следва:
1. хепаринизирана кръв се разрежда 1: 1000 във физиологичен разтвор в количества от 2 мл.
2. разредената кръв се прибавя към лекарството в концентрация от 1 # x000B7 10 6 М / л в количество от 0,2 мл и се поставя в инкубатор при 24тон # x000B0 С в продължение на 10 минути.
3. След инкубиране, 2 мл от работа хемолитична разтвор (0.004N HCl), и кюветата е разположен в FEC. Фотометрия се извършва при дължина на вълната 670 пМ. Времето започва на всеки 30 секунди от времето на администрацията, за да се получи лизира две съвпадащи показатели, за да завършите хемолиза.
4. Използва фотометрия вход към компютър и преработени в съответствие с нашата програма, която ви позволява да получавате "диаграма", с доверителен интервал, което позволява да се оцени точността на съпротивлението на хемолитични еритроцити под влияние на наркотици, в сравнение с експозицията на физиологичен разтвор (контрола).
Прототипът има редица недостатъци:
1. Не се състои в прилагане на лекарството в реакционната среда (ин витро).
2. има ниска информативна и диагностична точност.
3. Пробите имат ниска информативна.
4. Не се осигури оценка на комплексно действие на няколко лекарства.
Всички недостатъци са отстранени в метода с това, че в изследваните кръвни прилага лекарства при ниски концентрации молни (10 6 М / л), които точно измерване на преносимост им, като се използва процес, като показател за степента на хемолиза съпротивлението на еритроцитите мембрана под въздействието на изпитваното вещество.
Ние сме разработили компютърна обработка на резултатите от фотометрия увеличава съдържанието на информацията и точността на диагнозата.
Високата възпроизводимостта на резултатите се постига чрез правилно формулиране на контрол, компютризиране. Като контролна проба се използва кръв от същия пациент, в която се добавя лекарството вместо физиологичен разтвор, и прототип - донор кръв.
Първо трябва проучен в предварителни опити с кръвта на здрави донори (без никакви признаци на LN от историята) ефекти на антибиотици и витамини при концентрации от 10 до 10 -22 -2 M / L. Резултатите показват, че лекарствата в концентрации от 10 -6 -10 -8 М / л са неутрални за здрави човешки еритроцити.
В по-нататъшни проучвания лекарства се използват при концентрации от 10 6 М / л (като доставката), която може да бъде повече в съответствие с действителните концентрации на терапевтични лекарства в кръвта на пациента.
Ние механизъм лекарствени взаимодействия първия изследван с еритроцитите мембрана по отношение на моларните концентрации. Състои се с това, че в плазмената мембрана на червените кръвни клетки, поставени в хипотоничен среда (хемолитична среда в претендирания метод), в присъствието на ниски концентрации на лекарства - 10 6 М / л нарушение възниква транспорт на йони (йонен ток увеличение в клетката) и съответно увеличаване мембранната пропускливост и ускорение хемолиза на еритроцитите. При пациент с непоносимост към дадено лекарство хемолиза се случи по-бързо, отколкото при здрави донори. Когато това не се случи всички промени в мембраната на червените кръвни клетки и повече да го повредят.
Процесът се провежда както следва. Регистрация на промени в кинетиката на хемолиза, произведени в съоръжението, което е основа фотоелектричния колориметър концентрация микропроцесор - КФК-2MP. Използваните съдове на дебелина 20 мм. Работната клетката инжектира 2 мл кръв се смесва равномерно в разреждане 1: 1000 се прибавя към същото лекарство при концентрация от 10 ~ 6 М / л в количество от 0,2 мл, смесват добре. Кюветата се поставя в продължение на 10 минути в термостат при температура 24 # x000B0 С. След 10 мин 2 мл разтвор работа hemolyzing (0,004N HCl). Кюветата се намира в FEC срещу клетка с дестилирана вода. Фотометрия се извършва при дължина на вълната 670 нм. Времето започва (когато микропроцесора и едновременно хронометър), на всеки 30 секунди от времето на приложение за получаване на лизиране две съвпадащи индекси, т.е. до пълното хемолиза. Изчезване края на хемолиза достигне 0 (нула), поради поглъщане на светлина от хемоглобин освободен от еритроцити, които под въздействието на солна киселина се превръща в хематин солна киселина.
Оценка на резултатите се извършва по следния начин. В резултат на редица проби, получени чрез намаляване на изчезване, всеки от които съответства на степента на хемолиза рамката време. Показания фотометрия вход към компютър и обработени съгласно програмата, в резултат на "диаграма" заедно с доверителен интервал (# x000B1 5%, като метода на коефициента на вариация определено в експеримента не превишава 5%) за оценка на точността на хемолитична съпротивление червени кръвни клетки под влиянието на лекарства, в сравнение с излагане на физиологичен разтвор (контрола). Намаляването на съпротивлението на еритроцитите с 10% може да се считат за надеждни, свидетелстващи за нетърпимостта на наркотици.
Пример получен чрез третиране на компютъра е показано на фигура 1.
СЗРЕ - общият показател съпротива еритроцитите - площта под кривата на разпределение. Фигура 1 показва, че препарати: bitsillin, vibromitsin, канамицин, линкомицин, хлорамфеникол не преносим, като бели барове и техните доверителни интервали под долната граница на доверието барове - пространство физиологичен разтвор (наклонена птици). Други лекарства - са преносими. За този пациент беше препоръчано и избран гентамицин. Лечението с този антибиотик е безпроблемен.
В клиничната практика ние често се сблъскват със сложни препарати. Определяне на оптималната комбинация от лекарства помага допустим LN предложен диагностичен метод.
Ето клинични примери:
По този начин, методът на изобретението може най-точно определи причината и смислен избор лекарство генерира профилактични препарати, предназначени за терапия, комбинацията от лекарства, за да се определи дали допустим комплекс тяхното прилагане.
Имаше 800 пациенти бяха изследвани с LN, всеки пациент трябваше толерантност не по-малко от 10 препарати (изследваните препарати 8000). Реакциите се използват лекарства са 40 класове химически съединения: антибиотици - 52%, местни анестетици - 25%, витамини - 14%, сулфонамиди - 12%, пиразолоновите производни - 9%, за интравенозна анестезия - 7%, антихистамини - 5% , инсулини - 6%, глюкокортикоиди - 5%, сърдечно-съдови агенти - 4%, психотропни - 3%, и други.
Резултатите показват, че точността на метода е 97%. Това означава, че 97% от избрани лекарства профилактично не причини усложнения по време на последваща терапия. В 80% от случаите се определя впоследствие етиологично значително лекарствено средство или комбинация от различни лекарства.
Използването на неразрешени лекарства доведе до развитието на нежелани реакции (такива инциденти са докладвани 9).
По този начин предложеният метод за диагностициране на ин витро непоносимост лекарство е гъвкав, неразделна, което позволява да се определи нетърпимост лекарство за лечение и техните ефекти са комбинирани, комбинираното действие. Тя е с ниска цена, икономически ползи. Наличните надеждни и може да се извърши при никакви здравни заведения.
Метод за диагностициране на свръхчувствителни отделните лекарства или медикаменти смеси наркотици, характеризиращ се с това, че включва следните етапи: изготвяне на кръвна проба от пациента и споменатата проба се разрежда с физиологичен разтвор в съотношение 1: 1000; добавя лекарство или смес от лекарства, за да се изследва, в концентрации от 10 6 М / л разредена проба на кръвта; сместа се инкубира кръвна проба и лекарствено средство или смес от лекарствени средства за 10 минути при 24 # x000B0 С; прилага хемолизиращ разтвор с концентрация HCl 0004 N до термостат смес на кръвна проба и лекарствено средство или смес от лекарствени средства; оцени устойчивост на еритроцити чрез фотометрия споменатата смес на кръвна проба и лекарствено средство или смес от лекарствени средства при дължина на вълната 670 нм след въвеждането на hemolyzing разтвор до хемолиза е пълна, при намаляване на съпротивлението на еритроцити от 10% показва непоносимост споменатия пациент споменатото лекарство или смес от лекарства, когато се използва като контролна проба от кръвта на пациента разреден с физиологичен разтвор.
Свързани статии