вагинална намазка метод. Този метод е приложим само за определяне на бременност при кобили. Преди да вземе секрет от влагалището необходимо кобила външни тела се измива с топла вода и сапун. След това, чрез въвеждане на огледало удължителя вагината вземат слуз от дъното на горната вагинално свод посредством дълга лъжица предварително остра тъпи краища или със стерилен памучен тампон. При получаване на слуз направи намазка върху предметно стъкло на слуз. За да намажете производство, можете да използвате стъклен капак. В намазка се суши, фиксирани с метанол в продължение на 5 минути и се оцветяват с Giemsa (2 капки на 1 мл дестилирана вода) по време на 25-30 минути и внимателно се изсушава.
Микроскопско изследване на петна от слуз от бременна кобила намери мигли епителни клетки, слузести топки и рядко - бели кръвни клетки. В nezherebyh кобили във вагиналния слуз се наблюдава неутрофилни левкоцити и плоскоклетъчен епителни клетки и единични клетки срещащи мигли епител.
Като допълнителни доказателства за диагностика на кончета се обърне внимание на клинични признаци, наблюдавани при макроскопско изследване вагинална кухина.
Вагиналната лигавица с бременността на 3 седмици в животно покрита с дебела, силно вискозен и мътна мукус, който пречи на въвеждане и отстраняване вагинално спекулума. С този термин бременност в вагиналната лигавица става анемичен, суха и без блясък. Цервикалния мукус отвор плътно затворена, образувайки вид на капачка, като по този начин вагинално част на шийката на матката изглежда тъп. До 4-5 седмици от бременността в вагиналната част от шийката на матката обикновено се отклонява надясно или наляво.
Хормонални метод. Въз основа на проучването на физиологията на предния дял на хипофизата и яйчниците отговор на бременност е проектиран на базата на много ранна поява в кръвта на бременни кобили хормон LH в урината на бременни кобили, крави и прасета - хормон естрон.
За изследвания на животински prolan взети от югуларната вена за около 25 # 9235; 50 мл кръв от го защитава серум, който се инжектира без лечение под кожата на мишки. Инжектиране в количество от 0.1-0.4 мл течност проба се извършва в рамките на 3 дни, 2 пъти на ден инфантилен (незрели женски мишки). Теглото на такава мишка е 6-8 грама (3-4 години).
За изследвания върху животно folliculin вземе урина чрез катетър или чакат естествен уриниране. Урината преди инжектиране в мишки, подложени на лечение етер за да се намали токсичността. За тази цел той се застъпва с урината. Получената горния слой беше прозрачни смеси в количество до 10 мл. се добавя оцетна киселина, за да създаде леко кисела реакция и се добавя етер в равен обем. След урина се разклаща в продължение на 5 минути. Съдържанието на епруветките се оставя да се утаи в продължение на 10 минути; етер отдекантира и урината се оставя в отворен съд в продължение на няколко часа, за да се отстрани остатъчната етер. След урината се разрежда 3 пъти с дестилирана вода и в тази форма се инжектира подкожно на мишки в шест дози в продължение на 3 дни. За откриване на урина естрон прилага кастрирани женски мишки или инфантилна.
За диагностика на урина или кръв от всеки тест се прилага на бременността животните 3-4 мишки. В присъствието на половите хормони в разгонване мишки тест флуид се появява след 72-100 часа след началото на инжектиране. За откриване на еструса, като се излиза от сутринта на 3-тия ден на мишките с тампон два пъти дневно вагинално течение. От получената слуз се направи върху предметно стъкло в капка вода тампон, който се счита за под микроскоп.
В присъствието на еструса при мишки в намазка открива само твърда маса от клетки кератинизирани епител ядрено безплатно. В периода на почивка в намазка открива ядрени левкоцити и епителни клетки.
топлината на реакцията може да се потвърди откриването на опитни мишки, в които откриват увеличаване на матката промиване. В отговор на необходимостта от допълнителни проверки prolan разкрие един от експериментални мишки, и в случай на положителен резултат е разширяването на яйчниците, наличието в тях на зрели фоликули, червени кръвни точки на място проникнали graafovyh мехурчета и дори жълти тела. В допълнение, добре маркирани хипертрофия и зачервяване на гениталиите.
Минималното количество или хипофизната фоликулите хормон в състояние да предизвикат реакция еструса при женски мишки, миши нарича единица.
От 3 месеца преди раждането и бременността по време на бременност в дефиницията, произведени на база obnaruzhivaniya бременна кобила урината в голям брой хормон естроген номерация в десетки или дори стотици хиляди единици на мишката на литър урина. Въпреки това, folliculin хормон открити и nezherebyh и ранна бременност при кобили, но размерът на това се оценява само на няколко хиляди единици на мишката на литър урина. По този начин, разликата в размера на естрон хормон може да се види на бременни кобили.
Намазка микроскопия на вагинален секрет. Слузта взети от шийката на матката (за предпочитане с устата) плътен стерилен памучен тампон се използва форцепс. Тези тампон правят плавни движения на сухо обезмаслено пързалка. Намазки се сушат на въздух, фиксирани с метанол в продължение на 5 минути, оцветени с Giemsa багрило (1 мл дестилирана вода, 2 г на капки мастило) по време на 25-30 минути, промива се старателно боята се сушат и mikroskopiruyut.
В намазки на слуз, взети от бременни кобили, са значителен брой мигли епителни клетки, слузести топки сини, единични клетки от плоскоклетъчен епител и понякога малко количество на белите кръвни клетки.
Намазки от слуз, събрани от кобили nezherebyh проявяват голям брой на белите кръвни клетки и плоскоклетъчен епителни клетки, клетки от единични мигли епител. Топчета от слуз там. Slime на цитонамазка е равномерен слой.
Биологичният изследване на кръв и урина. По време на бременността, кръвта и урината на кобили, натрупани доста голям брой гонадотропин (фоликулостимулиращ хормон - FSH и лутеинизиращ хормон - LH) и на половите жлези (folliculin) хормони, които стимулират функционалната активност на половите органи.
Диагностика на бременност в резултатите от биологичното изпитване на кръв или урина тест се основава на идентифицирането на количественото съдържание на тези хормони. Този метод има висока диагностична точност (95-100%), но въпреки това, когато проучвания за масови кончета се използва рядко, поради сложността и разходите по неговото прилагане.
За откриване на хормони в кръвта и урината на бременни кобили по следните начини: 1) Colla и Hart, 2) и Friedman Schneider, 3) и Tsondeka Aschheim.
За тази цел, предложен яйчник трансплантация в предната камера на окото на кастрирани зайци. При успешна операция, с отслабването на възпалителния отговор, роговицата става прозрачен (в ранните дни на следоперативния период, става мътен) и насаждат яйчника е много прост и лесен за наблюдение.
След прилагане на тест серума при зайци ухо венозна присадка може да се види на кървене, три дни - увеличение на фоликулите, както и в пет дни - ясно лутеинизация.
Реакция Tsondeka и Aschheim. РЕЗЮМЕ реакция - идентифициране на естрон в урината на бременни ил кръв.
Тези данни показват, осъществимостта на фоликуларен реакция, за предпочитане след третия месец на бременността в, и на по-ранен етап - Изследване на prolan.
Реакционната техника. Урината се пропуска през филтърна хартия, подкислява се с оцетна киселина до леко кисел (лакмус). За да се освободи от токсични вещества в урината се добавя равно количество етер и се разклаща добре. Етерът се декантира и урината се оставя отворена за остатъци изпаряване етер (до слаб мирис остава). лечение естер увеличава активността на естрон.
Лабораторни животни са овариектомирани бяла мишка (castrati), на възраст две седмици след операцията и се изпитват за наличие на топлина. Може да се използва инфантилни женски мишки; всеки един от тях за боядисване на косата на условното място и в продължение на три дни, два пъти дневно, се инжектира под кожата:
на Т г а т а т
Първото кликване - цяло 0.3 урина
Четвъртата "- 0.1 урина разрежда
Първото кликване - цяло 0.2 урина
Четвъртата "- 0.1 урина разрежда
Ако има основание да се предположи, бременност в по-късни периоди, когато много от естрон в урината, може да се прилага към всички урината на мишките се разрежда с вода 2-3 пъти.
100 часа след първата инжекция три пъти на ден (за предпочитане 70-80-ия час) на вагинален секрет всяка мишка, произвеждат инсулти. За материала и подготовка намазка използване платина контури. Калциниран по дух дупчица потопена в дестилирана вода, заедно със своя увлича капчица вода се въвежда във влагалището. За да премахнете слуз контур извършва от скърцащ лигавица лесно придвижване. В същата линия слуз намазка върху повърхността на плъзгача. Една чаша може да предизвика 3-Е петна. Всеки намазка восък молив отбележете числото, което означава мишка.
Намазка се суши на въздух, фиксирани с алкохол и се оцветяват с Романовски или гледане под микроскоп без оцветяване, в затъмнена зрително поле. Наличието на намазка в не-ядрени клетки (люспи), което показва появата на еструса, се счита за положително диагноза. В случай на съмнение, можете да отворите мишката 1-2. Диагнозата се потвърждава чрез откриване на матката, повишен под влиянието на естрон.
На практика за откриване на кобили серум LH в кръвта може да се осъществи между 40-120 дни от бременността в (половин секунда до петия месец).
Testobektom служи инфантилен мишка (с тегло 6-8 грама) или плъхове (с тегло 20-28 д).
От вена кобила, за да се изследва, като около 50 мл кръв и поставете на хладно място за отделяне на серума. Последният се прилага подкожно три мишки и плъхове в дози (мл):
Просто направи шест инжекции в продължение на три дни (две инжекции дневно).
4-5 дни след началото на инжектиране на опитните животни 2-3 пъти на ден получаване намазки на вагинален секрет и се изследва под микроскоп. Ако кобила беше конче, след това под влиянието на LH присъства в кръвта в инфантилни мишки или плъхове настъпва пубертета - развитието на фоликулите. С узряването на фоликулите, оформен в него folliculin причинява еструс и намазка се състои от енуклеираните клетки (люспи). Ако картината не е ясна, 100 часа след началото на инжектиране, мишките са убити. При наличие на бременност на кобилата в мишки може да се установи увеличение на маточните рога и яйчници - зрели фоликули, жълтото тяло или фоликулите са пълни с кръв.
Важни промени в яйчниците и матката, така че да се прецени реакцията на някои или на всички мишки се умъртвяват и аутопсират.
Фридман и Schneider реакция. Обект служи заек с тегло 900-1200 грама, което е космат. Жените трябва да се държат изолирани от мъже, а дори и по-добре и от жени.
Десет милилитра кобили кръвния серум проучване инжектира на ушна вена на заек. 36-48 часа след инжектиране в заек продукция лапаротомия и проверка на яйчниците. След серум инжектиране на мястото на разкъсани фоликули или проявяват фоликул, което кухината е запълнена с кръв (фиг. 36).
Фиг. оставени 36 заешки яйчниците - в положителна реакция на бременността, вдясно - с отрицателен (за NA Flegmatovu).
След преглед на яйчниците на раната на коремната стена беше зашита. След 2-3 седмици, по същия заек може да се използва за втори път (понякога едно животно не може да се използва 5-6 пъти). Когато многократно инжектиране трябва да се има предвид възможността за анафилаксия.
Предимствата на тази реакция осигурява съкращаване живот до 48 часа, вместо на 100 часа с процедурата Colla и Hart.
Свързани статии