Целта на обучението. За да запознае студентите с характеристиките на об-ING и лабораторна диагностика на сап, melioidosis, pseudomonosis норки и биологични.
Оборудване и материали. P. Aeruginosa култура за IPA в петриеви панички в ВСН, набор от тестове, които се характеризират Ферми-комутативен свойства на P. Aeruginosa. покриване на стъкла за подготовка "смачкани капка" биологични продукти за специфична профилактика и диагностика на сап и pseudomonosis норка.
Sap. Това инфекциозен, хронично заболяване, преминаващ копитни животни (коне, магарета, мулета, мулета); Sun-ност с представители на семейство котки и лицето. Характеризира се с появата на белия дроб, на носната лигавица и различни кожни места на специфични възли, наклон-TION на гниене да образуват гнойни язви.
Причинителят на сап - бактерия Pseudomonas mallei, рода Pseudomonas, семейството Pseudomonadaceae.
Лабораторна диагностика на сап се основава на резултатите от сиво-логично изследвания (IAR); Бактериологични изследвания-сет се извършва в изключителни случаи.
Бактериологично изследване, включително chaet за откриване на патогена в храната IU Todd-светлинна микроскопия и биоанализи, изолиране на чиста култура инокулация в културална среда и идентификация на причинителя на културните-морфологични и ензимни свойства.
Материал за изследването. В лабораторни насочено кръв, газоразрядни гнойни рани, назален секрет, точковидни limfati-радикално възли на абсцес гной; от заклани животни са ИМОТИ тъкат болната тъкан на белите дробове, черния дроб, далака, limfatiches кал възли преграда, трахеята, бронхите и други.
Микроскопия препарати на изходния материал. В намазки на материала, Грам-оцветени, агентът се открива във формата на прави или леко извити, със заоблени краища размер грам-отрицателни пръчковидни бактерии (1.4. 4) х 0.5 м, а не спори капсули (фиг. 108). Когато се оцветяват с метиленово синьо Leffler клетки видима зърнистост.
Изолиране и идентифициране на културата на патоген. Патоген -aerob сап, 37. Температурата оптимално 38 ° С, рН 6.8. 7, лъчът-тя расте върху среда, допълнена с глицерол (2. 4%). Проучване на материала, като покритие върху глицериниран MPA и МРВ. растеж патоген се появява на първия или втория ден, понякога по-късно.
На ВСН патогена хранителна среда мътност в долната част на про-маркера образува сиво-бяла утайка мазен, може да се появи на филма на повърхността на хранителната среда. На МРА патоген Форма ruet гладка, полупрозрачна, сиво-бял, перлен нюанс на колонията, постепенно сливане в слуз плака. От култури, отгледани да намазки оцветяват с Грам микроскопия показват Полиморфна бацил Грам; в бульон култури от клетки на патогена се изтощава - до coccoid.
Характерен вярвам растеж в глицерол картофи: след два - три дни там са малки, прозрачни, с Zheltov-ти нюанс на колонии, които след това се сливат в една плака от сянката на де-tovatym ( "мед"), шестия и осмия ден цветът се променя до кафяво- или червеникаво-кафяв.
В бактерии с типични сап патоген културно-морфологични свойства при изследване на ензим-марки. P. mallei бавно, 6. 8-ия ден, коагулира мляко, втечнени желатин, разцепва за образуване на киселинен газ без глюкоза, лактоза, не използва захароза, малтоза, изкуствени влакна. В тропическите страни от Югоизточна Азия сингъла извън разтваря патогени "фалшиви сап" (melioidosis, болест Уитмор) - П. pseudomallei. причинява болестта на човека и Ms-votnyh. За разграничаване P. mallei и P. pseudomallei разтваря с помощта на функции, определени в Таблица 32.
Биооценка. Tissue суспензия, приготвена в (съотношение 1:10) стерилен физио логично-разтвор и се прилага в обем от 0.5. 1 мл подкожно във врата или в екрана златния хамстери 3. 5 мл морски свинчета. Стерилни взети снимки (точковидни) заразени животни интраперитонеално. Случаите на принудително му в мястото на подкожни инжекции образувани язва с до-lotnennymi ръбове развива конюнктивит, ринит, от Зара-конюгиран интраперитонеално мъжки морски свинчета - орхит (Fe Име Strauss). Смъртта настъпва при хамстери 5. седмия ден, морско свинче - до 8. 15та ден или заболяване става хронична. Fallen и мъртви животни са подложени на бактериологично изследване.
Серологично диагноза се основава на резултатите от повторното RAC. Диагностично титър на серум се счита за време на отчетност в 01:10 забавяне хемолиза четири или три кръста; хемолиза забавяне в една, две напречно при разреждане на серума 1 на 10, и три, четири напречно при разреждане на серума 1: 5 се оценява като съмнителен резултат.
Алергична диагноза. Използваният в домакинствата да наблюдава благосъстоянието на коне сап метод (поделена oftalmoprobu или интрадермален тест с malleinom).
Биологични. Mallein - диагностика Sapna Aller ген. В неговото производство култивирани патоген култура глицериниран бульон в продължение на четири месеца, се стерилизира чрез автоклавиране, филтрува се през филтър Seitz наблюдава за стерилност, безвредност на бели мишки, специфичност - при здрави коне, стандартизира разтваря с активност в единици на лабораторни Ms-votnyh ,
Sapna антиген за DGC се получава както следва: агар култура на измиване fenolizirovannym разтвор патоген ръка физиологичен кал, стерилизира чрез автоклавиране, защитата се разтваря. При употреба като проверява за стерилност, специфичността и активността-ност антиген за клетъчно-култ сектори течност.
Положителен серум ASOS предназначен за дефиниране на антиген-ЛИЗАЦИЯ активност (RNC) и като контрола в по-RNC настройки. Вземи Hyperimmunisation коне.
Melioidosis (фалшиви сап, болест на Уитмор е). Инфекциозни-bolevanie за животни (коне, кучета, зайци, овце и кози) и хора, срещащи се във формата на остро или хронично септицемия или septicopyemia.
В причинител - бактерията Pseudomonas pseudomallei, рода Pseudomonas. семейство Pseudomonadaceae.
Лабораторна диагностика на melioidosis се основава на резултатите от бактериологично изследване.
Бактериологично изследване, включително chaet за откриване на патогена в храната IU Todd-светлинна микроскопия и биоанализи, изолиране на чиста култура инокулация в културална среда и идентификация на причинителя на културните-морфологични, ензимни и серологични свойства.
Материал за изследването. Лабораторията е изпратил кръв, слюнка, урина, изхвърлянето на гной от абсцеси, сайтове изисква време конюгирана органи.
Микроскопия препарати на изходния материал. Патогенът е грам-отрицателна големина на прът полиморф (1.5 6.) X (9.5 10) цт, със заоблени краища и не спори капсули. lofotrih. В петна на органите, разположени поединично или в компактни клъстери.
Изолиране и идентифициране на културата на патоген. Патоген - аероб, температура оптимално 37 ° С, рН 6.8. 7.0, на културалната среда е неизискващ. Материалът за изпитване се поставят върху агар и в бульон с глицерол. Когато външни замърсяване микрофлора материал се третира с пеницилин (1000 U / мл).
В гъста медии след 24 часа инкубация възбудител генерира малки, прозрачни, белезникав mutneyuschie късните колонии с метален блясък, може да се появи колония I-образен и голяма (до 7 mm) е M-образна форма. На кръвен агар, глицериниран медии расте с образуването на колонии от крем портокал. В течна среда през 24. 48-Н ви свързва замъглено среда, образуване на филм, който, след добавянето на неутрално червено придобива оранжево оцветяване-ти цвят. За хранителни култури характерни за остарял миризма. Патогенът в натривка от чисти култури е поединично па рами, къси вериги или групи от 5. 7 парчета.
В култури с типичен P. pseudomallei културно-морфологични характеристики изследва неговата ензимна-ТА. Патоген ферментирало да образуват киселини глюко-цу, захароза, лактоза, малтоза, галактоза, дулцитол; декстрин не образува индол и сероводород бавно втечни желатин, ролки и peptonised мляко, хидролизира аргинин.
Специализирани култури също са идентифицирани в serologiches кал реакции: RA, Phragmites, RP.
Биооценка. Суспензия на материала но-инокулира интраперитонеално (0.5. 1.0 мл) при плъхове и морски свинчета. В случай на положителни животни умират-и в зависимост от вирулентността на щам на 3. 15-та ден. В мъжки морски свинчета могат да се развиват Fe-потеп Щраус.
Както за признаци на диференциация и P. P. mallei pseudomallei използване морфологични критерии (вж. Tabl.32), както и способността да синтезира P.pseudomallei на кръвен агар кремообразна оранжев пигмент peptonizirovat мляко, хидролизиран желатин, причиняват инфекция, когато Gi-подложка плъхове.
Pseudomonosis норка. Остър инфекциозен течаща Zabo-Levani. Той се характеризира с хеморагична пневмония, отличителен белег на сепсис. Освен норка податливи лисици арктически лисици; в Ms-votnyh други видове патогени могат да причинят пневмония-Мони в следродилния период, постоперативни усложнения.
Патогенът pseudomonosis норка - бактерията Pseudomonas Aeruginosa, рода Pseudomonas, семейният Pseudomonadaceae.
Лабораторна диагностика pseudomonosis норка въз основа на повторно резултат на бактериологично изследване.
Бактериологично изследване, включително chaet за откриване на патогена в храната IU Todd-светлинна микроскопия, изолиране на чиста култура от CMV посяват върху хранителна среда и идентификация на причинителя на културно-морфологични, ензимно и серологични кал свойства.
Материал за изследването. В лабораторията е време да насочват светлинна конюгиран части, регионални лимфни възли, селото-Zenk, черния дроб, бъбреците.
Микроскопия препарати на изходния материал. P. Aeruginosa в петна оцветяват чрез оцветяване по Грам, показват във формата на прави или извити дължина от 0,5 грам-отрицателни пръчки. 1.4 цт, ширина от 0,2. 0.4 микрона без капсули и спори; образува камшичета. Рас Предполага се, като една клетка, къси вериги.
Изолиране и идентифициране на културата на патоген. Тел възбуждане - аероб, 35. Температурата оптимално 37 ° С, към културалната среда е неизискващ. Пробният материал се нанася върху ИПП, BCH.
След 24 часа растеж в P. Aeruginosa проявява pomutne ВСН-niem среда, образуване на филм на повърхността и сиво бяла утайка поради сряда пигмент е оцветен в синьо-зелен цвят, с остаряването на цвета на култура колония става кафеникав. На МРА възбудител генерира два основни типа на колонии: голям (диаметър на 2. 5 mm), полупрозрачен, сивкави, гладък, плосък край и повдигнат център и малък необработени. Щамовете се изолират от Respiro завой и урогениталния тракт, могат да образуват мазен колонии. В средата около колониите се дължи на цвят пигмент в синьо-зелен цвят. Патоген синтезира четири вида P & G-среда: pyocyanin (синьо-зелени или жълто-зелен), Fluo-restsein, piorubin и черно-кафяв пигмент. За kultivirova депозитите на P. Aeruginosa в основната изолация на теста ma-Therians помощта на специални селективна среда с анти-пробиотици.
В изолирани култури проучен ензимни свойства. За P. Aeruginosa характеризира със следните особености: образуването на аргинин дехидролазна, оксидази, хидролиза на желатин разделяне на глюкоза, бета-аланин, D-, L-аспарагин, денитрификация, както и способността да расте 4л ° С
Виж хетерогенни соматични О-антигени. За идент фикация ниво-О-RA серогрупа използва върху стъкло, с изследва само култури, които са отбелязани мини-MUM две от трите физиологични свойства, характерни за формата: образуване на пигмент pyocyanin разделянето на глюко-PS, растеж на 41. 42 ° S. Той използва набор от три неправителствени поливалентни и едновалентни серуми единадесет. SLE антиген-INH 18. 20 часа агар култура от P. Aeruginosa. инактивира чрез варене във водна баня за 1.5 часа [Concentra-ЛИЗАЦИЯ (3. 5) * 10 9 / мл]. Антигенът първоначално се тества с поливалентна серуми, при получаване на положителен резултат - с моновалентна, членове на специално поливалентен серум. Резултатът се счита след 3. 6 мин.
Биологични. Моновалентна ваксина formolkvastsovuyu pseudomonosis норка се получава както следва: култ-пг ваксина щам (шести серотип) се отглеждат на яма ЛИЗАЦИЯ среда, инактивиран с формалин, адсорбиран върху стипца, се наблюдава за стерилност, безвредност, актив-ност.
Диагностика О-аглутиниращи серум за идентификация сиво-група P. Aeruginosa включва три livalentnye в серум: № 1 (03, 04, 05, 06, 07), № 2 (02, 08, 09), № 3 (010 , 011, 012) и единадесет ЛИЗАЦИЯ съответстващ моновалентен серуми. Предназначен за идентифициране на P. Aeruginosa на ниво на O-серогрупа.
Упражнения
1. Прочетете биологични продукти за серологично и Ал lergicheskoy диагностика на сап.
2. Разглеждане на морфологични, багрилни, културни и ензимните свойства на P. Aeruginosa.
3. Прочетете биологични към конкретно про-профилактика и диагностика pseudomonosis норка.
1. Какво е значението на бактериологични изследвания, за лабораторна диагностика на сап?
2. Какви са имунологични методи се използват за диагностициране на сап?
3. Какви са биологичните характеристики на норка на патоген pseudomonosis?
4. Какви са биологични продукти, използвани за специфични превенция pseudomonosis норки и серологична идентификация на патогена?
5. Каква е бактериологично изследване на melioidosis?
Свързани статии