Наследствеността, гени, ДНК # 133; Изглежда, че тези думи отдавна са престанали да бъдат научни термини, във всекидневния живот, а сега са познати на всеки старши, да не говорим за учениците. Но без ДНК, повечето от нас никога не са виждали, въпреки че, за да го видите - това е нещо истинско, дори и в домашни условия. В един от генетичните лаборатории на стената, например, така че това е инструкцията:

Как мога да се възползват максимално от ДНК

1. Намерете нещо. че съдържа много ДНК. Например, зелен грах (но може пилешки дроб, далака selodochnye или се поклонят).
2. Поставете в миксера около 100 мл (половин чаша) на този продукт, се добавя 1/8 чаена лъжичка сол и 200 мл (чаша) от студена вода. Смесете в продължение на 15 секунди. Миксер "готви" си грах-клетъчна супа.
3. Щам смес през цедка или парче найлон (Събиране доста подходящо). Полученият пулп се добави 1/6 от неговото количество (това ще бъде около 2 супени лъжици) на течни детергенти (миене на съдове. Например) и разбъркайте добре. Оставете за 5-10 минути.
4. Излива течността в тръби или други стъклен съд, който е изпълнен във всяка не повече от една трета от обема.
5. Към всяка тръба за малко, или сока изцеден от ананас, разтвор за контактни лещи и внимателно се разклаща, превръщайки и огъване на тръбата (ако ще се разклаща прекалено енергично, счупи ДНК и няма да видите нищо).
6. Наклон на тръбата и бавно се излива в това малко етилов алкохол, че да се образува слой върху смес грах. Лейте и алкохол, докато сместа не ще еднакво. ДНК се появява под формата на люспи.
7. Дървена пръчка (молив) ги хване и да изследва под микроскоп.

Разбира се, за тази научна работници обучение - до известна степен е шега и никой от тях по такъв начин ДНК на не произвежда, и ако е така между наистина се възползва от него, вие ще успеете! възстановяване на ДНК, обаче, е малка, и веществото - не особено чисти, но се вижда през микроскоп дълги тънки нишки - ДНК кристали - това е напълно възможно.

Какво се случва с зелен грах или пилешки дроб по време на манипулации описано и защо крайния резултат ДНК е отделена от всички други вещества в клетката са една голяма част?

1. Изберете Object

ДНК е известно да съществува във всяка клетка, което означава, че можете да го изберете от всеки плат - дори от кости на животни, рибени люспи или дърво, когато клетките не са толкова много в сравнение с обема на извънклетъчната матрица.

По принцип, ако предната част на изследователя не си струва всеки специален проблем, той се опитва да изберете за тъканта, в която извънклетъчната малко вещество и много от самите клетки. Освен това, желателно е, че тъканта е лесно да попаднат в тези компоненти и клетките не бяха залети от протеини (като мускул). липиди (като мазнини) или полизахариди (като мозъчни клетки).

2. Фракциите тъканни клетки

тъканта на смесителя, от които ние ще извлече същността на наследственост, се разделя на отделни клетки: механично да се прекъсне наличие на връзка между тях, като правило, много по-малко усилия, отколкото вредите на самата клетка. И тъй като с нашия метод за подбор, ДНК повече, отколкото се изисква или по-малко, отколкото цяло, неповредени клетки, ясно е, че консерви грах или солени херинга за такива експерименти не работят - това е по-добре да се вземе нещо прясно замразена, ако сте сигурни, че продуктът се размразява в няколко времето за съхранение.

Малко необходимо да се добави сол към разтвора, за да не разрушаване на клетките преди време: вътрешното налягане на съдържанието вътре в клетъчната мембрана се уравновесява с физиологичен разтвор външен натиск.

3. макромолекула пресата

Както за филтриране, е необходимо за механично да се отстрани от клетката сортира суспензия замърсители, включително парчета голям плат - всички същите вещества, които ще се обработват сместа не ще бъде в състояние да проникне дълбоко в тези конгломерати, и за извличане на ДНК те ще бъдат безполезни.

В резултат на такава обработка, цялото съдържание на клетката и ще бъдат изхвърлени навън в разтвора ще стане, че е много вискозна и жилав значително по-прозрачен, отколкото на клетъчната суспензия. Промяна на последователността на разтвора - сигурен знак, че лизирането е била успешна.

не прекалено много, разтворът се излива в резервоара, все още ще се изсипва в много, освен това, ако сместа е в излишък, ще бъде трудно да се разбърква.

5. освободен от протеини

Което е не само в нашия микс! Въпреки това, протеини са - най-вече с тях е най-добрата форма силни комплекси с ДНК. Има техники където протеини се отстраняват от разтвора на няколко етапа. Например, някои от тях са лесно денатуриран и се утаява чрез прибавяне на концентрирани разтвори на соли. В лабораторни условия, такива методи работят добре, и от грунта, изследователите са освободени, епруветката чрез поставяне на няколко минути в центрофуга. След всичко това, повече или по-малко големи клетъчни фрагменти, денатурирани протеини и други примеси са в долната част, които са много гъста утайка, и супернатантата се излива в друга епруветка течност, съдържаща главно нуклеинова киселина - ДНК или РНК - не работи. Въпреки това, условията в етапа на почистване на дома, ние ще трябва да пропуснете тази част ние се интересуваме от даряването материал - така тя ще остане # 132; в протеин плен # 147.

Веднага ще пристъпи към пречистването на ДНК от остатъчни протеини с помощта на специални ензими, способни да унищожат тези молекули. Той съдържа вещества като сок от ананас. Те се - същия протеин, така че ананасът, от която изцедения сок трябва да бъдат свежи: ензимът не е най-малък шанс да останат без промяна в компот или консервирани храни. Какво се отнася до решение за почистване на обектива, ако ще да го използва - не забравяйте да сложите хапче за отстраняване на протеинови отлагания! На собствените си решения за съхранение на контактни лещи не са активни вещества не съдържат - в противен случай нашите очи, а не да бъде слаб.

Фактът, че ензимите са разположени, може да се съди от намаляване на вискозитета на разтвора. Ако това не се случи, сместа се поставя на топло място (около 37 ° С) в продължение на половин час, понякога може да отнеме по-дълго добавете сок от ананас или за почистване на обективи решение.

6. ДНК се утаява от разтвора

ДНК сега е плаващ в свое собствено решение. Протеините не се придържат към него, въпреки че останките на различни молекули в сместа е все още много. При лабораторни условия, отстранени тези нежелани части, старателно разбъркване на разтвора с фенол и / или хлороформ. Органични разтворители, които могат да пикап протеини # 132, на # 147;, по-тежки от водата и следователно последващото смес в пакета те се центрофугира до дъното. След центрофугиране, на дъното на епруветките са фенол и / или хлороформ с разтворени в него протеини и по-горе - водна фаза, съдържаща ДНК. Водната фаза се събира в отделна епруветка и допълнително вече работи с относително чист разтвор.

Поради липса на центрофуга и органични разтворители, работата, която изисква освен специални мерки за сигурност, на този етап на лечение в дома попада под прескачане и утаяване на ДНК директно от # 132; мръсно # 147; разтвор.

Забележка веднъж - да замести етилов алкохол водка или алкохол не може да: ако концентрацията на алкохол е ниска и пада, когато се смесва с водната фаза до 60-65%. ДНК в кристално състояние няма да отида. Отчасти поради тази причина, изсипва алкохол в епруветка със сместа ДНК-съдържащи трябва да бъде внимателно наслояване върха. Тогава слоеве нисш алкохол смесва частично ДНК разтвор ще започне процеса на кристализация на нуклеинови киселини, и те се издигат към повърхността (където по-концентриран алкохол) под формата на люспи.

Ако алкохол се излива отгоре няма да работи и всички безнадеждно смесват, след което броят на малките етанол разполагаш с нищо не работи, но когато голяма започва да кристализира не само ДНК: в утайката ще падне и протеинови остатъци, и нещо друго от източника на клетките.

7. Какво имаме?

Чистите кристали от ДНК наподобяват топки от оплетени влакна, но не забравят, че може да се види на кристалите е вещество, не макромолекулата, и казват от външния им вид, който съдържа гените ви изолирана нуклеинова киселина, е, разбира се, е невъзможно. За да разберете това, е необходимо да се разтворят ДНК. Въпреки това, # 132, # 147 да се чете; нуклеотидната последователност, като у дома си, уви, е невъзможно: тя изисква не само специално оборудване, но също така и скъпи реагенти.

Все пак, ако вече сте се счита добри кристали и те са имали време да изсъхне, можете да наблюдавате как се разтваря ДНК. Тя започва да се подува и става подобна на желе медузи, а няколко дни по-късно, решението е хомогенна. Процесът може да се ускори, ако тръбата често се разклаща.

Пожелаваме Ви успех за начинаещи генетика и молекулярна биология!

Членове-близкия обект:
Dezoksiribonu. и още. Е. Kotin.
Всеки - генома! Георги Победоносец.
Прочетете ДНК: сто пъти по-бързо, хиляди пъти по-евтино. Е. Cleşcenco.