Един от най-добрите, но в същото време най-времеемка метод за диагностика на хламидия е чрез изолиране на патогена в култивирани клетки, третирани с различни анти-метаболити ( "златен стандарт"). За тази цел обикновено се използва култура на чувствителни клетки, третирани с циклохексимид. Чувствителността на метода за култура в сравнение с PCR е 70-80%, но в същото време тя е по-високо в молекулярната биология диагностични техники на специфичност. В литературата са описани случаи откриване на Chlamydia трахоматис чрез PCR с отрицателни резултати от тест култура, и обратно.
- Бременност с обременени акушерска история.
- Оценка на ефективността на антибиотичното лечение.
- чувствителността на откриване и антимикробната резистентност.
- Откриване на Chlamydia сред HIV-инфектирани хора с или вторична имунна недостатъчност (пациенти с рак след курс на облъчване и химиотерапия, трансплантация на костен мозък, които получават имуносупресивни лекарства, пациенти с вирусен хепатит и туберкулоза).
- Неизяснен стерилитет.
- Установяване етиологията на хронична инфекция на урогениталния тракт.
Културата се посев референтен метод за оценка на ефективността на лечение с антибиотици. В проучването на биологичен анализ PCR след химиотерапия в някои случаи може да се получи "фалшиво положителен от клинична гледна точка," резултатите. Това се дължи на факта, че е невъзможно да се представи оценка на жизнеспособността и патогенността на микробни клетки въз основа на откриване на фрагмент от своя геном, като се използва само молекулярни биологични методи данни. В този случай, изучаването на клиничен материал чрез посяване на културата на микробните клетки, които са загубили тези важни от клинична гледна точка на свойствата на, няма да ви позволи растеж в клетъчна култура.
За транспорт и съхранение на клиничен материал с помощта на специална хранителна среда (транспортна среда). Той се пълни в ампули от 1 мл и се съхранява при + 4 0 ° С (в хладилник общ вътрешен камера) в продължение на 2 месеца. Състав транспортна среда: MEM среда, допълнена с 10% телешки серум и антибиотици гентамицин при 50 мкг / мл.
Клинична материал след прехвърляне на транспортната среда се съхранява в обща отделение на хладилник при + 4 0 ° С и в продължение на два дни, за да бъдат доставени в лабораторията.
засяване процедура- Обработка на ден McCoy клетъчна култура, 1% разтвор на DEAE декстран в продължение на 30 минути.
- Инфекция на клетки, третирани материал, получен от пациенти.
- Центрофугиране на инфектирани клетки при 2500 грама за 45 минути.
- Измиване средата на клетъчната култура.
- Добавяне на среда за растеж на клетките, в който описва циклохексимид.
- Инкубирането на клетките за два дни при 36 0 С
- Откриване на Chlamydia в клетките чрез имунофлуоресценция или директно PCR.
Действителната дата на получаване на резултатите от този метод - седем дни.
В момента, в литературата е увеличаване на броя на съобщените случаи на резистентност към антибиотици, хламидия (еритромицин, тетрациклин, доксициклин, флуорохинолони). Стойността на метода на културата е, че досега единственият метод, който позволява да изберете антибактериално лекарство за лечение на хламидиоза и за оценка на ефективността на антибиотична терапия.
метод на управление от откриване на Chlamydia резистентност към антибиотици трахоматис- Хламидийна изолати от пациента при сеитба зарази чувствителни клетки.
- Инфектираните клетки бяха добавени към растежната среда, съдържаща антибиотик.
- Инфектираните клетки се инкубират в продължение на 5 дни при + 36 0 С
Чувствителността на хламидия към антибиотик се определя за подтискане на инфекция в инфектираните клетки. дълга процедура отнема две седмици време.
Свързани статии