Основният метод за диагностика на криптоспоридиоза е микроскопска откриване на патогена. За този живот се използва и диагностични методи постмортални.
Vivo диагностика на криптоспори млади селскостопански животни с цел откриване на паразити в изпражненията.
Получаване на лекарства от изпражнения. На обезмаслено плъзгащ се прилага няколко капки течни изпражнения на инфектирани животни (за предпочитане слуз бучки) и се тънка намазка. Продуктът се и се суши, след което се фиксира с алкохол-етер или метанол в продължение на 10 минути, изсушава се и се пропуска през пламък дух лампа няколко пъти.
За да се увеличи количеството на Cryptosporidium в материала могат да се използват различни методи за обогатяване. Един от тях е комбиниран метод на центрофугиране използване флотационни решения. Тъй като последният може да се използва с разтвори на амониев нитрат плътност от 1,3 (1500 грама вещество в 1 литър вода), цинков сярна киселина с плътност 1,24 (400 грама сол в 1 литър вода) натриев нитрат с плътност от 1,38- 1.40 (1 000 грама вещество в 1 литър вода), магнезиев сулфат, с плътност от 1.26 (920грама на сол в 1 литър вода) и други.
Проба от 3 г изпражнения се поставят в бехерова чаша и се разбърква непрекъснато, 50 мл вода се излива. Суспензията се филтрира в центрофужна епруветка и се центрофугира за 1,5-2 минути при 3000 об / мин. След това супернатантата се изхвърля, се излива в тръбата един разтвор на флотация, разбърква със стъклена пръчка и утайката се рецентрофугира. След това, тел линия се отделя супернатантата от центрофужни тръби бяха прехвърлени към капки и обезмаслено стъкло предварително покрити с албумин или плазма, и правят намазка. Намазки са добре изсушени, фиксирани и оцветени.
Покритие формулировки на Ziehl-Neelsen. Първоначално се подготвят карбол фуксин. За целта се вземат 2 грама основния фуксин, етилов алкохол (96 °) 12 мл карболовата киселина и 5 г дестилирана вода до 100 мл.
Полученият боята се прилага лекарството, без подгряване и се поддържа в продължение на 25-30 минути. Тогава намазка се промива с вода, се прилага за получаване на 8-10% разтвор на сярна киселина и се нагрява до 40-60.
Многократно се промива с вода и лекарства за 3- 5 мин оцветени неговия 5% воден разтвор на зелен малахит в 10% етанол. Препаратът се промива с чешмяна вода, суши се и mikroskopiruyut използване потапяне система.
В резултат на това оцветяване Cryptosporidium ооцисти диаметър 4-5 микрона има ярко червен цвят, и цитонамазка микрофлора е оцветен в зелено. Получава се и се оцветяват с метод добре консервирани формулировки.
Оцветители Romanowsky-Giemsa. Формулировка се прилага към 10% разтвор на фиксиран багрило Romanowsky-Giemsa. След 30 минути, тя се промива с вода, суши се и mikroskopiruyut препарат. В този случай, Cryptosporidium ооцисти оцветяват слабо. Вътре те са понякога могат да се намерят и удължени извити спорозоите, които са разположени в периферията на ооцисти.
Покритие формулировки на Kester. Подгответе шафранинов решение. За тази цел, 2 части наситен воден шафранинов добавят 5 части 5,6% разтвор на калиев хидроксид.
На фиксираната намазка се прилага сафранин приготвената багрило. След 5 минути, препаратът се промива с вода и се покриват с 0.1 до 10% разтвор на сярна киселина. Препаратът се многократно се промива с вода и dokrashivayut в продължение на 12 до 5% разтвор на зелен малахит, промива се с вода, суши се и се изследват под микроскоп със система за потапяне.
метод на Wilson. Тръбата за центрофуга 1 мл получат фекалиите се прибавя 2 мл 2,5% разтвор на калиев бихромат А и 5 мл разтвор на захароза (1.26 грама в 1 мл) в дестилирана вода. Съдържанието се разбърква със стъклена пръчка епруветки и се центрофугира за 10 минути при скорост 800 об / мин. От горните менискуса на линия на тръбата за облекчаване на някои решения капчици и ги носят на стъкло и ги покрийте с увеличаване mikroskopiruyut X 400. зрителното поле на микроскопа-ооцистна-пълзене tosporidy ярък от на тъмен фон на други структури.
Откриване на Cryptosporidium помощта на флуоресцентен микроскоп. фекални петна третирани с ауламин разтвор с карбол киселина. След това те се промиват с вода и се оцветяват за 8-10 минути с разтвор на карболовата фуксин а. Re препарат се промива с вода, суши се и се наблюдава чрез флуоресцентен микроскоп с потапяне система. В същото време откриват Cryptosporidium ооцисти под формата на ярко флуоресциращи диск на тъмно червен фон.
За следкланичен диагноза криптоспоридиоза вземе съдържанието на част от тънкото черво и илеума или да направите останки от лигавиците им. Материал прилага обезмаслени стъкло направи намазка се суши, фиксирани и обагрени чрез методите, описани по-горе. Възможно е също така да се съдържанието на 1 г от илеума, или илеума и се изследва по метода, описан по-горе Уилсън.
Токсоплазмоза се диагностицира с помощта на различни методи на изследване, включително epizootologicheskie, клинични и лабораторни. Ehpizootologicheskij проучвания показват животни с неясен етиология на заболяването: .. Появата на мъртвородени фетуси, аборт, различни деформации и др Токсоплазмоза може клинично се проявяват под формата парализа, пареза, конюнктивит, пневмония, повишена температура, заболявания на сърдечно-съдовата система и органите на стомашно-чревния тракт ,
Лабораторни тестове включват намазки или микроскопия на хистологични секции на различни органи и тъкани: мозъка, черния дроб, бъбреците, далака, белите дробове, лимфни възли, сърце. Токсоплазмоза, която се намира в цереброспиналната течност, плодови води, урина, фекалии.
За диагностика на токсоплазмоза се представя за биологични проучвания при лабораторни животни, и прекарват immunoserologicheskpe koproskopicheskie изследване на изпражненията на котки за откриване на ооцисти.
От горните органи не по-късно от 2-3 часа след смъртта на животните се подготвят намазки, фиксирана им метилов алкохол (етилов алкохол може да бъде смес или Никифоров) за 8-10 минути, оцветени с Romanowsky-Giemsa продължение на 45 минути. Препаратът се промива с вода, суши се и mikroskopiruyut със система за потапяне.
Най-типичният вид на извънклетъчния Toxoplasma е дъгообразна или с форма на полумесец паразит, в което единият край на удължен и остър, а вторият - широк и заоблени. Toxoplasma тъкан обикновено е кръгла или овална форма, най-малко те имат форма на полумесец. Техните размери достигат 4-7h2-4 микрона.
Откриване на Toxoplasma ооцисти във фецеса на котки се провежда koproskopicheskim метод се използва центрофугиране и флотационни решения. За целта се вземат 1 г изпражнения се поставя в порцеланов хаван, се прибавя 8,10 мл вода, 3 капки 1% карболовата киселина и се стрива и пестик. Сместа се филтрува през разтвор от метал или Capron цедка в центрофужна епруветка и се центрофугира при 2500 об / мин за 10 минути. След това супернатантата се отдекантирва, към остатъка се излива разтвор на амониев нитрат с плътност 1.3 (или друг флотация разтвор с плътност по-голяма от 1.15), утайката се разбърква със стъклена пръчка с физиологичен разтвор и отново се центрофугира при 1500 об / мин в продължение на 5 мин ,
След повърхностен слой покриваща течност центрофужна епруветка метал контур се отстранява 5-6 капки се прилагат върху тяхната слайд и обезмаслено mikroskopiruyut.
Биоанализ е също един от основните методи за диагностициране токсоплазмоза. За да се вземе проба от неговото прилагане в 1 g мозъчни срезове, черен дроб, далак, лимфни възли или органи на неуспешен плода, който се поставя в стерилна порцеланов хаван, се прибавят 3 мл физиологичен разтвор и се стрива. Получената суспензия се прилага vnut-ribryushinno 0.5 мл 4-5 бели мишки. В присъствието на Toxoplasma в храната има 5-7 дни след прилагане на суспензията се появява тежко заболяване. Така в коремната кухина на мишки, образувани трансудат до 3 мл, съдържащи голямо количество endozoitov. За откриване на Toxoplasma вземат трансудат от коремната кухина подготви намазки да намазки от мозъка. Получените препарати са фиксирани и оцветени с Giemsa Романовски-, суши се и след това присъствието mikroskopiruyut endozoitov използване потапяне система, наличието на кисти препарати разглеждащи с увеличаване 7H20 микроскоп.
Immunoserological диагноза на токсоплазмоза извършва чрез използване на Toxoplasma антиген.
Това се извършва въз основа на епизоотичния, клинични, серологични и микроскопски изследвания, съгласно патологичното аутопсията.
метод за идентифициране на компресора sarcocyst. За тази цел проби мускул на различни органи - хранопровода, диафрагма, сърцето, скелетната мускулатура и от всяка проба по мускулните влакна се нарязват от граничната стойност от 4 овес (II Vershinin, 1982). Секциите бяха поставени върху стъкло kompressoriuma, втора стъклена покривка и се пресоват посредством винтове. След това, с увеличаване на mikroskopiruyut 7x8.
Формулировките могат нюанс с боя разтвор Romanowsky-Giemsa (2 капки мастило за 1 мл дестилирана вода) в продължение на 1 час. След тази подготовка, се обезцветява с воден разтвор на амоняк.
Багрилни препарати, като е възможно и по друг начин. За тази цел първо получаване на мастилото: към 30 мл 10% разтвор на метиленово синьо се прибавят 30 мл 0.01% разтвор на калиев хидроксид и получената смес се разрежда с равни части дестилирана вода. Получените формулировки бои могат да бъдат оцветени в продължение на 10 минути, последвано от избелване с 25% разтвор на амоняк (GV Кононенко, 1968).
За откриване на мерозоити е най-удобният метод на М. Козар (1971). Вземете 2-5 грама на мускулна тъкан се поставя в порцеланов хаван, се прибавя 1- 2 мл физиологичен разтвор и се стрива. След това се вземат спада на получената суспензия се поставя в обезмаслено слайд, се покрива с покривно стъкло и mikroskopiruyut затъмнена област. Мерозоит-можете да видите във формата на банан-формации.
За ин виво диагностика Sarcocystis месоядни използват техники, използващи центрофугиране флотационни решения.
Таблица 8. Характеристики sarkosporidy,
Свързани статии