Бактериологично изследване на водата
Водата е един от основните фактори на околната среда.
Необходимо е да се изгради в клетките на организма. Без вода в клетките обикновено не могат да се появят химически и физиологични процеси. Без вода е невъзможно да се проведе събитието на санитарно подобряване на населените места, поддържане на чистотата в домовете, за приготвяне на храна, и така нататък.
Освен това, водата може да бъде фактор в предаването на инфекциозни агенти.
Замърсена вода може да играе роля при появата и разпространението на чревни инфекции, туларемия, инфекциозен хепатит, Ку-треска, амебиаза, гъбични инфекции.
Водата трябва да бъде свободен от патогенни микроорганизми.
За да се оцени качеството на питейната вода се използва като количествените показатели, ако - титър, ако - на индекса, на общия броя бактерии.
Бактериологични питейна вода трябва да отговаря на следните изисквания: общият брой на бактерии в 1 мл неразреден вода от не повече от 100, ако - индексът (броят на колиформени бактерии в 1 литър вода) не повече от P3 индивиди коли - титър (брой на вода, съдържаща 1 бактериална клетка Е. коли) - 300 мл.
Coli - титър в питейна вода се определя от мембранния филтър и дву- или три-фаза ферментационен метод.
Изборът на метод се определя от количеството и качеството на водата в процес на разследване.
В проучването на чиста, добре вода филтър, по-удобно използване на метод мембранен филтър.
В проучване вода, съдържаща колоидни вещества и примеси, които пречат на филтриране, са ферментационен метод.
При определяне на титъра на Е.коли от мембранни филтри трябва да изпълнява три стъпки: приготвя мембранен филтър, за да се получи апарат филтър, за да филтриране и растат култури.
1. Получаване на мембранни филтри. За избран вода филтруване малък порите нитроцелулоза мембранни филтри №3 (без дефекти) и се поставя в огнеупорен химически стъкло затопля до 50-60 градуса по Целзий с дестилирана вода. След това водата в чашата се нагрява на слаб огън, докато кипи. филтри кипене направени три пъти за 15 минути. След първата и втора чаша вряща вода се отделя и се заменя с прясна. След окончателното врящата вода не се изпуска и филтрите останат в него, до използването им.
2. Получаване на устройството за филтриране. Фуния и филтър маса апарат Seitz стерилизира чрез кипене или чрез изгаряне. Охладен апарат маса, пожар суши и ostuzhennym съвети с гладки форцепс, мембранен филтър се поставя. На масата се задава с филтъра и фиксира горната част на инструмента - фунията.
3. Филтруване на вода и отглеждане на култури. Фунията се излива стерилно филтриране апарат количество вода и се анализира чрез помпата създава вакуум в приемния съд.
Бактерии в проба вода се задържат върху филтъра.
До края на филтрацията филтърната фуния се отстранява внимателно със стерилен форцепс филтърът се отстранява и прехвърля в петриево блюдо с културална среда.
Култивиране филтър за дадена среда позволява да изберете специфична група от микроорганизми.
За откриване на Escherichia филтър насложен върху Ендо агар или друг носител (Ploskireva среда) се използва за идентифициране на тази група от бактерии.
петриеви капаците блюдото се поставят в инкубатор за 24 часа при 37 градуса по Целзий. В края на отглеждане филтри разглеждащи с лупа.
Резултатът се счита за отрицателна ако агар Ендо не светло - червени колонии - което означава, че на E.coli в даден обем вода там.
В присъствието на червени колонии с метален блясък (характерно за колонии на Е. коли) от колониите и се оцветяват намазки от Грам им метод.
В присъствието на Грам-отрицателни пръти среден размер, които не са спори, колониите проверена произведени в тръбите в тръбата на glyukozopeptonnoy Ейкман среда. Културите се поставят в инкубатор за 24 часа при 43 градуса (температурата, при която покълнат индивиди разпределени топлокръвни).
Мътността на културална среда и наличието на образуване на газ показва наличието на E.coli, в даден обем на тест течност.
Определяне дали - ферментационен титър метод се извършва в три етапа.
В първия ден, в зависимост от степента на замърсяване засява различни обеми на течността за изпитване в сряда Bulira с поплавъци.
водни обеми са обратно пропорционални на степента на замърсяване.
Обикновено четири инокулира с десетократно намаляване на обема на вода (например, 1, 0.1, 0.01, 0.001 мл).
Културите се съхраняват в продължение на 24 часа при 43 градуса по Целзий.
На втория ден след отстраняване от култури на фурната на избран брой от колбата, в която промяната в цвета на индикатора в среда Bulira и плува в натрупаната газ образуван. От тези крушки направи прожекции в петриеви панички с агар Ендо. Културите се поставят в инкубатор за 24 часа при 37 градуса.
На третия ден, културите се отстранява от пещта и се изследват макроскопски отглеждат колонии. Наличието на ярко червени колонии с метален блясък показва наличието на вода в даден обем на Е.коли.
За потвърждаване на избрани колонии направи намазка скрининг и получаване в епруветка с Bulira среда.
Натривки оцветени Грам и mikroskopiruyut и посяване тръба се поставя в термостат за 24 часа при 43 градуса.
Наличието на грам-отрицателни пръти в стъклата, промяна в цвета Bulira среда и наличието на газ в поплавъка са доказателство за наличието на Е.коли.
При определяне на броя на микробен стерилна пипета и посяват в блюда на Петри с 1 мл IPA; 0,1 мл (или дори по-голямо разреждане) изследвани вода.
Получаване на различни обеми се постига чрез разреждане със стерилна вода изследва вода. От една проба инокулира малко две разреждания. По този начин всеки количество вода е показано в отделна стерилна пипета.
Културите се поставят в инкубатор при 37 ° в продължение на 24 часа. След получаване на брой колонии отглеждат върху хранителна среда, в една чаша. Колониите се броят с помощта на лупа на черен фон. За да се получи броя на колониите в 1 мл вода, полученият брой се умножава чрез разреждане. Всички резултати са обобщени и представени средната аритметична стойност.
В изследването на бактериална флора в отворен вода, за да се идентифицира всеки ефект - или замърсители могат да бъдат използвани метод разваляне плочи.
Методът се основава на способността на микроорганизмите да се прикрепя към повърхността на стъклото. Този метод позволява да се получи информация за отношенията на околната среда от микроорганизми, както и тяхната реакция към промените във външната среда.
За разваляне плочи, внимателно обезмаслени пързалки приложени някои - по никакъв начин, през равни интервали на кабела. Един кабел провеждане стъкло, с тегло в долния край и горния поплавък се спуска в резервоара.
Стъкло трябва да бъдат номерирани и трябва да бъде написан в списание кои номера отговарят на това, което стъклото на хоризонт.
Монтаж със стъкло в резервоара се поддържа 3- 4 дни, след което се отделя от водата и внимателно взети от стъклото. Стъкла се сушат и се фиксират със смес от Никифоров (равни обеми от етанол и етер) или метанол, оцветени с Грам, и други сложни методи за оцветяване за откриване на железни и серни бактерии и други микроорганизми.
Предметните стъкла се изследват с помощта на микроскоп потапяне, която прави възможно да се характеризира видовия състав на микрофлората на различни дълбочини на езерото.
При отчитане на физиологични групи бактерии инокулират върху хранителна среда за откриване сулфат намаляване на бактерии, бактериите, които участват в процесите на ammonification, нитрификация и денитрификация. Изработване култури за откриване на облигатни аероби и анаероби, участващи в азот фиксиране и разлагане на целулоза.
Свързани статии