Богата на хранителна среда - идеален субстрат за развитието на микроорганизми в него. като се използва химичен ефект (дезинфекция), температурата и други физически средства (ултразвукови, ултравиолетови лъчи, ултрафилтрация) за дезинфекция на хранителни среди. Всеки от тези методи е много селективен за прилагане.

В методи биотехнологични широко използван термична дезинфекция (автоклавиране, стерилизация, кипене, пастьоризация и т.н.).

Както е известно, на отделните компоненти на хранителната среда и реагират различно на термичния ефект. Особено термонестабилните органични съединения: витамини, въглехидрати, хормони, и други сложни захари и полизахариди са частично хидролизирани чрез автоклавиране .. Степента на хидролиза зависи от въглероден източник, температурата и продължителността на автоклавиране. При високи температури карамелизационната на захари.

Разтвори, съдържащи аминокиселини и редуциращи захари по време на топлинна експозиция придобиват кафяв цвят поради saharoaminnyh реакции.

За да се избегнат нежелани разрушителни промени на културата компоненти на средата (субстрати), използвани евентуално меки режими на стерилизация (таблица. 4.4) или отделен стерилизация на компонентите. Високите но преходно температурни условия инактивират бактериални спори, осигурява минимален ефект върху биологично активните компоненти на средата. В лабораторията стерилизация на хранителни среди и някои други обекти се извършва в автоклав с пара под налягане, поддържане на желания режим. В някои случаи се прибягва към суха топлинна стерилизация.

Таблица 4.4. стерилизация на хранителни режими медийни

Беше установено обаче, че температури над 121 ° С могат да бъдат причина за нарушаване на качеството на носители и, следователно, слаб растеж култура. Освен това, по принцип желания стерилизация в автоклав на малки обеми от културална среда, че при равни други условия, позволява да се намали времето за стерилизация, след загряване период се скъсява проби (таблица. 4.5).

През последното десетилетие тя придоби широко филтруване мембрана за стерилен въздух и различни течности. Този вид студена стерилизация, която е в сила за стерилизация на термолабилни вещества.

Индустриалното производство на мембранни филтри стартира в края на 40-те години. на миналия век. Според RE Kesting (1971), най-честите процеси са конвенционални филтруване (makrofiltratsiya -1-10 микрона), микрофилтриране (20 -10 m), ултрафилтруване, диализа (10 m-1 пМ).

Ако makrofiltratsii прилага конвенционален хартия или стъклен филтър, след това се използва за останалата част от нитроцелулоза, целулозен ацетат, поливинил, полиамид, дебелина флуоровъглерод мембрана на по-малко от 0.1 микрона, с висока степен на порьозност и диаметър на порите в рамките на 04/10/10 микрона. За целите на стерилизация в областта на биотехнологиите достатъчно микрофилтрация.

Основни изисквания за условия на културата

Всички манипулации с културата на изолирани растителни тъкани се извършват в стерилни условия. Комплексни мерки за осигуряване асептика биотехнологични процеси включват механично, физико-химичен защита bioobject и неговото местообитание, и ако е необходимо - и на крайния продукт.

Асептика осигурява мокро почистване, третирането им с ултравиолетови лъчи, антисептични, като се използват стерилни инструменти, медии обработка облекло, стерилен подаване на въздух (таблици ламинарен поток на стерилен въздух в опаковка области, доставка в ферментатор стерилен въздух през разпръсквателните - от френски барботаж. - смесване) и така нататък.

За защита на механичното отстраняване на механични примеси включват, например, въздух, култиватори; запечатване оборудване, изолация възли и връзки; физически - въздух и обработка на повърхността устройства и устройства с ултравиолетови лъчи, кипене, стерилизация с пара под налягане, ултразвук; до химикала - Лечение на работни повърхности и биопроби химически антисептици.

В производствена среда, източници на микробни замърсявания могат да бъдат почвата, водата, въздуха, хората. От почвата в областта на биотехнологични процеси попадат спорообразуваща бацил, Bacillus, конидии на гъбичките, актиномицети; Същите тези микроорганизми с прах може да се във въздуха, от където те са в състояние да проникнат в средата за култивиране bioobject или крайното производство продукт

Култивиране на изолирани растителни тъкани възниква в светлината. Faktorostatnoy осветление (светлина) на помещението трябва да бъде в зависимост от културата на една 000-10 000 лукса. Необходимо е да се вземат под внимание излагане на светлина, която се изисква за култивирани обекта.

Влажност в светло помещение трябва да бъде 60-70%. Освен това, сух въздух спомага за сушене от хранителната среда в епруветки и колби, особено ако те са затворени с тапи памук, промяна в концентрацията му, а оттам и смущения на условия на култивиране. Можете да използвате тавите с вода, за да се увеличи влажността в помещението.

Оптималната температура за по-голямата част от култивираната тъкан -25-26 ° С, културата на тропически растения тъкан - 29-30 ° С. В случай на индуциране на морфогенеза температура се понижава до 18-20 ° С

За успешното отглеждане на изолирани клетки и тъкани на растения трябва да бъдат изпълнени някои условия. Повечето от новообразувана тъкан не се нуждае от светлината, тъй като той все още няма хлоропласти и храни heterotrophically.

Изключение правят някои зелен мазол тъкан, като например тъкан мандрагора. Колъс тъкан са на тъмно или при дифузна светлина, и за успеха на тяхната морфогенеза прехвърлен в райони с интензивно осветление 1 000-4 000 лукса.

Леки и температурни режими, както и други условия, в зависимост от задачите. Най-доброто от техните параметри, както и оптимални условия на влага може да бъде създаден с помощта на екологични камери.

NA Warriors, TG Volova