A61K39 / 012 - антигени Coccidia

Собствениците на патента RU 2312890:

Българска академия на селскостопанските науки, държавна научна институция Vsebolgarsky научноизследователски ветеринарномедицински институт Птицевъдство (GNU VNIVIP ОССЗ) (RU)

Изобретението се отнася до биотехнологията и ветеринарна паразитология. Прецедете L-1-23 Eimeria тенела депозиран в колекцията Vsebolgarskogo научноизследователски ветеринарномедицински институт Птиче на руския Селскостопанска академия под номер ЕО №1. Щамът се изолира от пиле пациент, пиле, заразени с един щам на ооцисти L-1 Eimeria тенела. Щамът е специфично само за кокошките, паразитът може да премине един пълен цикъл на развитие в кокоши ембриони. Щамът има имунобиологични свойства, които позволяват използването му за експериментални изследвания, и за да се получи имуногенен и антигенен материал, използван за диагностика и профилактика на специфичното заболяване. Таблица 2.

Изобретението се отнася до биотехнологията и ветеринарна паразитология, и по-специално до производството на диагностика и ваксини срещу кокцидиоза пилета, предизвикана от Eimeria тенела (Е. тенела), и могат да се използват за изследователски цели.

Кокцидиозите на пилета, причинени от 'E.tenella, е широко разпространена във всички страни и да причини значителни икономически щети на индустрията за домашни птици.

Много изследователски центрове се обучават както паразита и причинява заболяване при птиците. Основната цел на изследването е да се осигурят средства и методи за диагностика, химиотерапия и специфична превенция на болестите.

Важен метод за борба с кокцидиоза пиле е специфични имунопрофилактика. Ваксина производството и използването на технологията е такава, че се използва за производствените щамове трябва да притежава висока имуногенна активност, репродуктивна, да са устойчиви на различни антикокцидиални лекарства (химиотерапия и йонофорен антибиотик).

Редица щамове на Е. тенела, използвана за производство на ваксини [1, 2, 3, 4]. Тези изолирани щамове в други страни и се използват за научни изследвания и ваксина производство. Въпреки факта, че не са установени антигенни различия между различните щамове, към днешна дата, това е възможно, че те съществуват. Това наложи изолиране на такива щамове на Е. тенела, които могат да се използват за тези цели.

Както се използва прототип щам Е. Tenella А-1, изолирани от пациенти тор на пилета с кокцидиоза на птицеферми аудио област Ленинград [5]. Щам L-1 при доза от 5000 и по-горе ооцисти върху главата причинява заразените възприемчиви пилета остра perebolevanie с характерна клинична (натиснат тип, разрошена перушина, бледо миди и лигавиците, жажда, загуба на апетит, кървави изпражнения) и пато-анатомични характеристики (от мъртви птици наблюдава силно подуване и хеморагични лезии на лигавицата на слепите процесите на червата). Бях болни пилета, произведени имунитет към повторно заразяване.

Таблица 1
щам L-1 Характеристики Е. тенела

Чувствителност към кокцидиостатици

Чувствителен към ампролиумът, nikarbazinu, farmkoktsidu, himkoktsidu, klinakoksu, всички йонофор антибиотици

Въпреки това, L-1 щам на Е. тенела е висока вирулентност са били ваксинирани птици срещу кокцидиоза се основава на прилагането на строго дозирано количество на ооцисти на паразита и следователно възможни нередности в ваксинацията може да предизвика появата на кокцидиоза при пилета имунизирани.

Задачата на изобретението е да се осигури ваксина щам на Е. тенела, ниска степен на вирулентност, има високо имуногенни свойства в комбинация с възможност за висока степен на възпроизвеждане в тялото на пилетата.

Тази цел се постига чрез щам на L-1-23 Eimeria тенела за производството на ваксини, диагностика и изследвания. Щам A-1-23 Eimeria тенела извлича чрез инфектиране податлив пиле единична ооцисти на щам L-1 Eimeria тенела.

Щам L-1-23 Eimeria тенела депозиран в колекцията Vsebolgarskogo изследвания ветеринарен институт на ОССЗ в № 1 домашни птици.

щам характеристика L-1-23 Eimeria тенела

Систематично положение. A-1-23 щам Е. тенела отнася до Eimeria род, семейство Eimeriidae, отлепване Coccidiida.

Морфологични характеристики. Той има широко ооцисти 19,0-26,0 мм дължина, ширина 16,0-22,0 mm (среден 22,6-18,8 mm).

Биологични свойства. Prepatentny период на развитие на паразита е 130 часа. Поставете ендогенен развитието на паразита в червата заразено пилетата - слепи процеси.

Вирулентни свойства. При инфекция на 15 еднодневни пилета ооцисти, не се съхранява в продължение на повече от 2 месеца, в доза 800,000 ооцисти на главата е 50% смъртност (LD50).

Имуногенични свойства. Инфекция на пилета ооцисти причини образуване на специфичен имунитет (хуморален и клетъчен).

Култура и биохимични свойства. Щам L-1-23 Е. тенела не се култивира в хранителна среда. Подкрепа от пренасяне при пилета, причинявайки 72-96 часа характерни лезии в червата с освобождаване на ооцисти, като се излиза от 130 часа след инфектирането.

Щамът е чувствителен към антикокцидиални лекарства - ампролиум, nikarbazinu, farmkoktsidu, himkoktsidu, klinakoksu, всички йонофор антибиотици.

Специфика. Щам L-1-23 Е. тенела е специфично само за пилета. Паразитът може да премине един пълен цикъл на развитие в кокоши ембриони.

Пример 1. Използване на L-1-23 щам Е. тенела Coccidia за производство култура за immunohimioprofilaktiki пиле кокцидиоза.

За имунизация на домашни птици използва специално подбрани щамове от кокцидии, имащи слаба висока вирулентност и имуногенност в дози, които не причиняват клинично perebolevaniya кокцидиоза. Такива свойства притежават A-1-23 щам на Е. тенела. Имуногенният материал се получава както следва. 14 еднодневни пилета, свободни от кокцидиеви ооцисти орално се инокулират с щам A-1-23 Е. тенела rasplodki от матрицата в доза от 2-3 хиляди на една глава. 6-10 дни след инфекция на пилешки тор, събрани от отделените ооцистите чрез флотация в наситен разтвор на натриев хлорид. Формирането на малки спори на ооцисти извършват в 2% разтвор на калиев бихромат с температурата и показалеца на мишката 26 # x000B1 2 # x000B0 С в продължение на 3-5 дни. Спорулирали ооцисти A-1-23 щам на Е. тенела се използват в производството на култура кокцидии предназначена за ваксинация на пилета.

Културата кокцидии е хомогенна смес от стерилна сиво оранжев цвят без примеси, плесен, без отделяне на утайка безвреден за пилета. Перорално кокцидии култура причинява субклинични пилета perebolevanie последвано от изолиране на ооцисти в околната среда, което създава възможност за природен reinvazirovaniya гостоприемник и формиране това имунитет, чиято интензивност може да бъде определена с ELISA тест-система, базирана на A-1-23 щам Е. Tenella.

Пример 2. Изследване при експериментални условия противококцидиален активност на препаратите.

Понастоящем основен метод за предотвратяване на кокцидиоза пилета е да се използва антикокцидиални агенти. Първата стъпка в изучаване на ефикасността (противококцидиален активност) новосинтезирани лекарства е да се провежда опити с интактни пилета, заразени с кокцидии лабораторни щамове известни вирулентност. Тези щамове включват щам N-1-23 Е. тенела.

Цялостни ооцисти орално инокулирани пилета A-1-23 щам Е. тенела в LD50 доза и веднага започват да се хранят с изследваните агенти. Наблюдение на птици се провежда в продължение на 10 дни. За да се оцени противококцидиален активност на усилването на медикамент, използван смъртност / оцеляване и тегло, което служи да се определи антикоки индекс (LOI).

Таблица 2
Сравнителна оценка на различни кокцидиостатици когато заразяване пилета кокцидии A-1-23 щам Е. тенела

В този експеримент установено, че himkoktsid nikarbazin и притежават противококцидиален активност, изразена след инфекция на пилета кокцидии A-1-23 щам на Е. тенела.

По този начин, A-1-23 щам Е. тенела имунобиологични има такива свойства, които позволяват използването му за експериментални изследвания, и с цел да се получи имуногенен и антигенен материал, използван за диагностика и профилактика на специфичното заболяване.

1. P.L.Long. Допълнителни изследвания на patogenicity и имуногенността на ембрион адаптиран щам на Eimeria тенела. Птичият патология, vol.3, №4, 1975.

2. T.K.Jeffers. Затихване на Eimeria Tenella чрез селекция за precocciousness. J. Parasitol. vol.61, №6, 1975.

3. J. Johnson, W.M.Reid, T.K.Jeffers. Практически immunizatin на пилета срещу кокцидиоза, използващи отслабен щам на Eimeria тенела. Птици sciense, vol.58, №1, 1979.

4. T.C.Ivore, P.L.Long, M.Kogut и Джойс Джонсън. Затихване на Eimeria necatrix и Е. тенела на САЩ произход от серийни пасажи ембрион. Заболявания по птиците, vol.27, №3, 1983 година.

5. ТУ 10-07-445-87 "културата за immunohimioprofilaktiki кокцйдиа кокцидиоза пиле", утвърден от началника на Ветеринарния комитет на СССР държавна аграрно-промишлен 20.07.1987.

Прецедете L-1-23 Eimeria тенела (събиране Vsebolgarskogo научноизследователски ветеринарномедицински институт Птици, CE №1) за производство на диагностикуми и ваксини и за научни изследвания.