За оценка на физико-химичните свойства на еритроцити изследва устойчивост (резистентност) от еритроцити на различни влияния. Най-широко се използва в клиничната практика, получените проучване на осмотична устойчивост на еритроцитите.
Unified метод за определяне на осмотичната устойчивост на еритроцити
в модификация I. L. Idelson (1974).
Количествено определяне на степента на хемолиза на еритроцитите в хипотоничен разтвори zabufernyh натриев хлорид.
Основният разтвор (за неговото осмотично концентрация съответства на 10% разтвор на натриев хлорид) има рН от 7.4, съставът на разтвор: двуосновен натриев фосфат (Na2 НРО 4) г -27.31 (или Na2 НРО 4 * 2Н2 О- 34,23, ж) натриев дихидроген фосфат (NaH2 РО4 * 2Н2 О) -4,86 гр, natriya- хлорид 180 грама дестилирана вода - до 2 литра. Разтворът може да се съхранява в запечатан контейнер в хладилник в продължение на няколко месеца.
Алкалният разтвор се разрежда с 10 пъти, за да се получи разтвор, подходящ за неговото осмотично концентрация от 1% разтвор на натриев хлорид. От този разтвор се приготвя работен разтвори на натриев хлорид, следните концентрации: 0.85; 0.75; 0.70; 0,65; 0.60; 0.55; 0.50; 0.45; 0,40; 0,35; 0,30; 0.20; 0.10%. Възможно е да се получи 100 мл на работните разтвори и ги съхранява в хладилник. Той е подходящ за 2 седмици.
Специално оборудване
- Photoelectrocolorimeter.
- Термостатът при 37 ° С
Напредъкът при определянето
Празна проба - супернатанта в епруветка, съдържаща 1% разтвор на натриев хлорид.
100% хемолиза хемолиза вземат в епруветка, съдържаща 0.1% разтвор на натриев хлорид. Изчислява се процентното хемолиза във всяка епруветка, сравняване на стойността на екстинкцията на супернатанта изчезването като 100%, по следната формула:
Процентът хемолиза = Ex * 100 / Е1, където
Е1 - изчезване на супернатантата в епруветката с 0.1% натриев хлорид;
EX - изчезване на пробата за изпитване;
100 - Процентът хемолиза ин витро с разтвор на 0.1% натриев хлорид.
На следващия ден, изследването се повтаря с кръв се инкубират 24 часа при 37 ° С
нормални стойности
При здрави свежа кръв хемолиза започва точка при концентрация от 0,50-0,45% натриев хлорид, и цялото хемолиза - при 0,40-0,35% разтвор на натриев хлорид.
Клиничното значение на
Изследване, проведено в случаите на съмнение за хемолитична анемия. Понижаването на осмотичната устойчивост, т.е.. Е. вид на червени кръвни клетки хемолиза при по-висока от нормалната, концентрацията на натриев хлорид (0.70-0.75%) се наблюдава в наследствен и microspherocytosis nesferotsitarnyh някои наследствени хемолитични анемии и понякога с автоимунна хемолитична анемия. В някои случаи, намаляване на осмотичното съпротивление се открива само в изследването на инкубирана кръв. Увеличаването на осмотична устойчивост характеристика на таласемия, разстройства на хемоглобина.
Литература.
LI Idelson В :. Наръчник на функционална диагностика / Ed. IA Kassirskogo.- М. Medicine, 1970, стр. 401.
Свързани статии