Първи фаги. Практическото използване на фагите
Ниска ефективност се компенсира fagoprofilaktiki phagotherapy и широко използване на фагите да се идентифицират и infraspecific диференциация на бактерии при диагностицирането на инфекциозни болести и епидемиологично проучване огнища дизентерия, салмонелоза, дифтерия и други стафилококови инфекции, където с тяхна помощ е възможно да се идентифицират източниците и трансмисионен път инфекциозен произход. Като илюстрация как да се идентифицират фаг и определяне на тяхната активност, методи за индуциране на лизогенен бактерии и фаги писане.
Изолиране на вирулентен фаг. За изолиране на фаг се анализира течен материал се центрофугира. Супернатантата в количество от 1 мл се прехвърля в 30 мл бульон месо-пептон но то (ВСН), засява с 1 мл от 6-18-часова култура на организма участва.
Засяването се поставя в термостат при 37 ° С в продължение на един ден, след това преминава през филтър Seitz и филтратът беше разреден 1:10 и 1: 100, 1: 1000 и се прибавя към 0,05 мл култури. Контрол е бульон култура филтрата без. След 18-20 часа епруветката се отстранява от пещта. Наличието на фаг съди по избелване на средата (в контрола имат нормалния растеж на бактерии).
Индуциране на лизогенен бактерии с ултравиолетови лъчи. Svezhevyrosshuyu 8 часа бактериална култура се разрежда 1: 20-1: 30 веронал буфер и 5 мл се разпределят в две петриеви панички. Един от тях (пилот) е отворена и за 30-180 облъчен с бактерициден Luvs за лампи и втори (контрола) - съхраняват в UV област на покритие затворен. След това двете суспензии от бактерии (3-3.5 мл) се инокулират в две тръби с 5 мл от подходяща културална среда, и след няколко часа инкубиране в инкубатор облъчени сеитба проявяват литична ефект на действие на вегетативни фаги.
Писането стафилококи наберете 23 fagovarov справка. Нощна култура на стафилококус ауреус 209 P се посяват в 2.5 мл Hottinger бульон, отглеждани в продължение на 3-4 часа и прясно посяват тревата и се изсушават предварително на Петри блюдо с 1.2% агар-ти. В долната част на чашката на Петри се инокулира с молив разделен от 23 квадратни и във всяка от тях стандартен цикъл или Pasteur пипета прилага капка подходящ фаг. фаг действия да вземат под внимание резултатите от степента на лиза Staphylococcus култура, което показва предимства - от «±» до известна фаги дейност метод Appelman.
Определя фаг активност в ВСН. За целта се вземат няколко епруветки, съдържащи 4.5 мл бульон. Първата тръба е изработена от 0.5 мл от изпитваното фаг, той се смесва със средата и се пипетира в друга 0.5 мл епруветка и следващата т. D. По този начин фаг разрежда серийно 10-1 до 10-9 и по-горе.
Във всеки фаг разреждане допринесе 0.05 мл от осемнадесет часа бульон култура от бактерии от съответните видове. Две тръби с контрола ВСН трябва да бъдат: един инокулира бактерии култура (контрол на наличието в него на фаг) фаг се излива във втората (контролира стерилност). Анализ на резултатите се извършва след 18-24 часа на престоя тръби в инкубатор. Тигърът на фаг определяне на най-високото разреждане, при които има пълна лизиране на бактериите.
Препоръчано от нашите посетители:
Очакваме с нетърпение да ви въпроси и предложения:
Свързани статии