Общи методи за сключване препарати

Парафинови срезове се оцветяват с мастно-разтворими багрила. За идентифициране на някои липиди, които не се промиват от тъкани по време на дехидратация, изчистване на, изливане, депарафиниране и прехвърляне на вода, частите трябва да бъдат затворени в среда, в която мазнини и багрила не се разтварят. Достатъчно е да се отстрани излишният йод и сключва съкращения в смола сироп, glihrogel глицерол - желатин и затова ..

Заключение смола.

След избелването в ксилен филийки оцветяват чрез конвенционални методи за тяхното приложените обикновено в смолата. По-рано, като се използват носители за подписване разтвори Канада балсам или дамарова смола, кондензирано кедрово масло, euparalya и сътр., Ксилен и хлороформ. В Канада балсам сключи секции след оцветяване с хематоксилин и еозин.

За приключване на срезове, оцветени с анилиново синьо и киселина фуксин, Къртис препоръчва Подкисли балсам салицилова киселина. Част от разтвора в ксилен балсам разрежда до последователност на течен сироп, наситен кристали на салицилова киселина, филтрира се през филтърна хартия и се третират с равен обем на изходния разтвор. Ако разтворът е пренаситен, в препарати често действат кристали на салицилова киселина.

Всички тези смоли са подходящи за въвеждане на филийки, оцветени по метода Романовски, тъй като синята компонент на багрилото в средата постепенно изчезва.

Заключение смола и сиропи, както следва. Избрани капаци е подходящ размер, че те покриват секции, взети в България размери 18x18, 20x20, 24x24, 24X36, 24X76 мм и др.

В стъклото на покритие се прилага, капка пазител или ако дълго стъклото, две капки течност смола в ксилен разтвор. Стъклото на капака се поставя капка до филтърна хартия. Ако секции сключват в разтвор на смола в ксилен, а е възможно да се подготви стъклен капак 6, но влиза в замразени секции, за да се подготвят по-добре сироп едно стъкло. плъзгача на стъкло се отстранява от оцветени секции от ксилол или вода (в зависимост от проводниците), суши се и се държат надолу върху наклонено изрязани капак стъклото, така че една от неговите съответната филтърна хартия в близост до капака мине дългия край. Тогава плъзгачът се понижава леко, докато частта докосва капка разтвор на смола или сироп върху стъклото на покритие. Спад се разпространява към краищата на покривното стъкло. Ако стъклен капак падне въздушни мехурчета, те могат да бъдат отстранени чрез леко натискане на капака стъклото на с върха на игла дисекции или леко повишаване на неговата единия край; Понякога е достатъчно само да се добави смола или сироп. След това излишната смола отделя, задържане на предметното стъкло намали под ъгъл от около 30 °, и се притиска към нея покривно, obsushivayut краищата на филтърната хартия. След това, препарати се поставят върху плочата и поставени на топло да изсъхне.

Ръбовете на покривното стъкло не се избърсва с памук или с марля, напоена с ксилен, като тази част от смолата може да се разпростре върху чиста повърхност на покривното стъкло. Zasyhaya образува нередности, които пречат на наблюдение под микроскоп и които са много трудно да се отървете от.

Ако секции съдържат целулоза трикапрат, след това изсушава над около ръбовете на стъклото на покритие под формата на малки твърди гранули, които могат лесно да бъдат отрязани с малък нож или премахване на нокътя.

В края на големи части от релефния изследване, например, на гърдата, мозъчни полукълба, човешки кости, и така нататък. P. Между разреза и капак стъклото след приключване често се натрупва въздух. За да се избегне това, се препоръчва да се използва по-концентрирани разтвори на смоли, които се нагряват до намаляване на вискозитета. Полистироли не са подходящи за тази цел, тъй като техните решения имат висок вискозитет при относително ниски концентрации.

По-удобно канадски балсам, неутрална етер смола и някои цикло-парафинови и терпенови смоли; филии могат да бъдат затворени в малко нагряват 60-80% разтвори на тези вещества в ксилен.

В резултат на непълно дехидратация в оцветени препарати затворници често се образуват непрозрачен или мътен зона. Под микроскоп, в разрез разрез и над нея открити множество малки капчици вода, цветът избледнява. За да се избегне това, отстраняване на покривното стъкло, промива се с ксилен синтетична смола или балсам, нарязани дехидратирани в 100% алкохол, ацетон или изопропилов алкохол, ксилен осветяване в смес с дехидратиращо средство и 2-3 промени на прясно ксилен и отново се заключи.

Ако цветът на обезцветени участъци могат да бъдат боядисани отново. За този препарат се съхранява в ксилен (до няколко часа, докато отделената стъклен капак) и след това се извършва чрез 100% етилов алкохол и съответните решения, както обикновено.

По същия начин получи, ако има на разположение само на изследователи боядисана парче които би било желателно да се рисува върху друг метод. Ако е необходимо, първичен петното може да потъмнява подкислен алкохол; След това срезите са старателно измити с вода и се оцветяват с новия метод. Обикновено срезове, оцветени с хематоксилин първия желязо вече неподходящи за взаимодействие с калиев ферицианид до желязо, тъй като това ще реагира и желязо ноктите.

Ако двете отрязани блок, монтиран върху предметно стъкло, понякога повторно цвета на само едно парче, оставяйки другата под покривния плъзгач.

Участъци от нитроцелулоза, напоена в тъканта може да се спазват стъклени слайдове преди да се оцветят или или след него. Секции са били уловени от кораба върху чисто стъкло и го изправи; където стъклото стопанство косо половин потопени във вода, и след това нарязани внимателно се блотират с филтърна хартия.

Ако раната все още не е боядисана, може да се третира с етер пари; докато нитроцелулоза омекотява и здраво залепени на предметно стъкло. Възможно е също така да се пропусне стъкло в продължение на няколко секунди в 0.5% разтвор на нитроцелулоза в етер с алкохол подсушете долната повърхност на плъзгача и се потапя за запечатване на филма в хлороформ в продължение на 5-10 минути. Частите бяха след това последователно се извършват през 95 и 80% етилов алкохол във вода (тъканни срезове фиксирани в течности с живачен хлорид, преди да се прехвърли във водата се обработва с 0.5% разтвор на йод в 70% алкохол в продължение на 10-15 минути и след това 5% натриев тиосулфат 5-10 минути). Секциите могат да бъдат прехвърлени директно в разтвор на багрило, ако е получено във воден алкохол. След оцветяване багрило излишък се промива, както е обичайно за този метод.

Целоидинът - тип нитроцелулоза, комплекс от естер на азотна киселина целулоза. Lilly призовава целоидин продукт с относително ниско молекулно тегло, и нитроцелулоза - по-вискозен продукт с високо молекулно тегло. На практика, националните лаборатории бяха решили да използват един-единствен термин - целоидин.

На "безплатни" раздели на нитроцелулоза.

Някои изследователи предпочитат да tselloidinovye и нитроцелулозни секции боя, за да ги монтирате на пързалки. Това е особено полезно, когато лабораторните изследвания, когато трябва да се подготвят голям брой филийки с един блок.

В този случай, 80% алкохол, при което срезовете се съхраняват, те се прехвърлят в алкохолни разтвори на оцветители или веднага или извършват чрез предварително 70 и 50% етилов алкохол и вода. Ако е необходимо за отстраняване на живак утайка резени пренесени 0.5% йоден разтвор в 70% алкохол, тиосулфат разтвор на натриев и вода. Трансфер филийки леко извита шпатула, холдинги, ако е необходимо, игла, дисекции.

Дехидратацията iprosvetlenie нитроцелулоза секции.

След оцветяване, секциите се дехидратира наличност, осветяване провеждане последователно през същите разтвори, които се използват за нитроцелулозни секции залепени стъклени слайдове. Последно третират по същия начин, както и парафиновите срезове и парафин секции tselloidinirovannye.

Срезовете се оцветяват с най-устойчиви багрила, дехидратира се в 95% алкохол, за осветяване карболфуксин-ксилен Weigert [8], който е смес, състояща се от една част от стопената кристален фенол и три части ксилол, промива се с 2-4 промени ксилол и приложат depeks, permaunt, канадски балсам или друга подходяща смола като парафинови срези.

Промяна на цвета на нитроцелулоза в секции.

Ако е необходимо, оцветен основни анилинови бои могат да обезцветят нитроцелулоза с 2% етанолов разтвор на смоли, след дехидратирани и нарязани освети както е описано по-горе, или един от методите, описани по-долу.

Просвещението срезове, оцветени лесно се извличат багрила.

Срезите са оцветени с основни анилинови бои, които се екстрахират карболфуксин-ксилен Weigert [8] препоръчва освети в няколко промени ксилол; преди да издържи филии в следващата смяна на разтворителя, се изсушава с филтърна хартия.

Замразени срези се оцветяват за откриване на мазнини, уловени на чисти стъклени плочки. Един ръб на срязване, докато проведе на частично потопен в чаша вода, която след това се отстранява внимателно, така че границата плосък върху стъклената повърхност. Гънките на разреза Изправяне потапяне във вода. Понякога секции са изправени с игла дисекции, особено ако те са счупени или имат неправилна форма. Разширената част на obsushivayut, внимателно попиване гладка му филтърна хартия. След това частта е затворено в подходяща среда, Кал описано по-горе. глицерин може да се използва, за да се регистрирате по време на подготовката. Съставите могат да бъдат получени за дългосрочно съхранение, внимателно podsushivaya на съединителни стъкла и покривни стъкла и техните разтвор okantovyvaya Канада балсам в ксилен или толуен, и нитроцелулоза лепило. Заключителни част от една малка капка от глицерин, които не достигат приюта на стъклото на капака, за да okantovyvaya край на полистирол могат да бъдат получени в продължение на дълъг период от време се съхраняват наркотици.

Свързващите агенти полистирол.

Съставите затворени в глицерин-желатин или arleks -zhelatin, okantovyvayut 20% разтвор на полистирол в ксилен, който се прилага със стъклена пръчка в краищата на покривното стъкло. След 1 час, лекарството изсъхва и престава да се придържаме, и може да се постави на следващата сутрин, заедно с други лекарства, без да се страхува, че те ще се държим заедно. Също така е възможно за тази цел popolzovavshis смес от ксилен и целулоза капрат.

Lanolic Romeysom смола се препоръчва като най-подходящо средство за кант секции затворени в водоразтворим носител. За да се подготви двайсетграма безводен ланолин суши чрез нагряване при разбъркване в порцеланова чиния 15 или 20 минути. След това, без спиране на разбъркването, постепенно се прибавя 80 г смола, докато се получи бистър бледо кафява течност. По-добре да се нагрява на котлон със затворена спирала да се избегне запалване. Получената смес се излива в малки чашки и се оставя да се втвърди. Стъклена пръчка или метална шпатула силно нагряване отделя от тях чрез малко ланолин смола и да определи ъгъла предпазно стъкло. След това стъклото ръба okantovyvayut много гореща смола стопилка.

За постоянни лекарства често се използва среда, съдържаща гума арабика или желатин. Гума арабика след известно време изсъхва до твърдо състояние и желатин се топи преди употреба. Състав използва успешно няколко носители е показано в таблица.