Използване иновативен метод за генна терапия. известен като редактиране геном (редактиране геном), което позволява да се отрази на добре дефинирана мутирала ДНК част. учените са излекувани болест на кръвосъсирването - хемофилия - при мишки. Това е първият пример за редактиране на генома - Метод Основната точно на определена целева ДНК молекула и специфична корекция на генетични дефекти - се използва за животни и показват клинично значими резултати.
Това е важна стъпка напред в дългосрочен историята на развитието на терапията генни - Методи за третиране въз основа на корекция ДНК последователност. което е причина за заболяването. Новото изследване, учените са използвани два варианта генетично модифицирани адено-свързан вирус (AAV), една от които е носител на ензими, които режат ДНК молекула е точно на мястото си, и от друга - за коригиращи ген. което трябва да бъде включена в ДНК последователността за по-нататъшното синтеза на нормален протеин. Всички тези учени са успели да се направи в клетки на черния дроб, живеещи мишки.
В д-р Hai проучване, проведено в сътрудничество с учени в Sangamo BioSciences, Inc. Те са били използвани генетично модифицирани ензими - нуклеазни "цинкови пръсти» (цинкови пръсти нуклеази, ZFNs), един вид молекулни дума процесори, редактиране мутирала ДНК последователност. Учените са се научили как да се създаде на ZFNs, взаимодействие с гените, които имат добре дефинирана място. За възстановяване на нормалната функция на гена, загуби в хемофилия, тя е била използвана за ген-специфичен фактор 9 (F9) ZFNs в комбинация с нормална ДНК последователност.
По същия начин, получаване на целевата си, специфичен хромозома, нуклеаза "цинков пръст" демонстрира ясно предимство в сравнение с традиционните методи за генна терапия, които могат да доставят небрежно коригиращи ген в нежелано позиция на заобикаляйки нормални биологични регулаторни механизми. Такова насочване отклонява носи риск от така наречения "инсерционна мутагенеза» (инсерционна мутагенеза), където коригиращи ген може, например, за откриване на развитието на левкемия.
В хемофилия наследствена мутация в един ген лишаване на организма може да се произведе една от кръвосъсирването протеини, което води до спонтанно, понякога животозастрашаващи кървене. Двете основни форми на болестта, които се срещат почти изключително при мъжете - хемофилия А и хемофилия Б - е липсата на съсирващи фактори VIII и IX, съответно. Лечение на пациенти често е интравенозна инфузия съсирване протеини - скъпи и, в допълнение, понякога организма стимулиране производството на антитела, които правят по-нататъшно използване на този метод невъзможно.
Използването на генното инженерство, учените имат миши модел на хемофилия при хората. Преди лечението на коагулационен фактор IX в кръвта на животните не е определена.
Предишни експерименти други изследователски групи показват, че ZFNs може да редактира ген отглежда в култура на стволови клетки, които след това са въведени в модела на тялото на мишката за сърповидно-клетъчна анемия. Въпреки това, като екс виво подход не е възможно за много човешки генетични заболявания, които засягат цялата система на тялото. Ето защо, в това изследване, проверка на ефективността на редактирането на генома се извършва ин виво. т.е. директно ин виво.
Д-р Hai и нейните колеги са създали две версии на вектор, или ген доставка на превозното средство, с помощта на адено-асоцииран вирус. Един AAV-вектор, носещ ZFNs за редактиране, а другата - да достави необходимата версия на функциониране на F9 ген. Тъй като причината за хемофилия могат да бъдат различни мутации на същия ген, се заменя със седем различни кодиращи последователности, обхващащи 95%, причиняващи мутации хемофилия В.
Мишките, които получи комбинация от ZFNs / коригиращи ген започва да произвежда кръвосъсирващ фактор IX в количество, достатъчно да намали времето за съсирване на кръвта до почти нормални нива. При контролните мишки, третирани с или без вектори ZFNs или без F9, значително увеличение в нивото на фактор на кръвосъсирването или намаляване на времето на съсирване не се наблюдава.
Подобряване се поддържа в продължение на осем месеца на наблюдение, изследователите не показват никакви токсични ефекти върху височина, тегло или функция на черния дроб на животни - индикация, че лечението се понася добре от жив организъм.
"Установихме, че концепцията за редактиране геном прекарва директно ин виво. Тя осигурява стабилни и клинично значими резултати, "- д-р Обобщавайки Hai. "За да се постави тези резултати по безопасен и ефективен метод за лечение на хемофилия и други човешки моногенни заболявания, са необходими допълнителни изследвания, но стратегията на генна терапия е обещаващо. Преходът от миши модели на клиничното използване на генна терапия е дълъг процес, който се калибрира почти две десетилетия, но сега ние виждаме положителни резултати в редица заболявания -. От наследствени ретинални лезии на хемофилия "
Образуване на редактиране виво геном като ефективен и безопасен терапевтичен метод ще отнеме време, но това е - друг важен момент в развитието на генна терапия.