нокаут ген метод позволява линия нокаут мишки (мишки, мишки) - мутантния мишки, в които специфични гени са изключени. Този метод позволява да се изследва ролята на всеки конкретен ген в организма в неговото развитие и нормална или ненормална работа и да проучи различни човешки заболявания, използващи мишки като модел обекти. Cut ген води до някои нарушения. Естеството на тези заболявания дава възможност да се съди за функциите на ген. Тъй като е разработена тази техника, неговото използване е възможно да се създаде хиляди линии на мишки, на които няколко стотин са моделни системи за изследване на човешки болести, по-специално заболявания на сърдечно-съдовата и нервната система, и злокачествени тумори.
Методът се основава на явлението на хомоложна рекомбинация - обмен на съответните части между двойки на хомоложни хромозоми. Марио Capecchi и Oliver Smithies независимо изобретил начин от (избиване) на гени, дължащи се на хомоложна рекомбинация, включващи изкуствено синтезирани ДНК фрагменти със специфична последователност от нуклеотиди, съответстващи на част от един от гените но модифицирани по някакъв начин. Такива фрагменти се въвеждат в отглежда в култура (т.е. в изкуствена среда се отдели от тялото) клетки чрез електропорация - през порите в клетъчната мембрана, или изкуствено създадени от електрическо поле. Чрез рекомбинация в някои от култура на клетки въведената последователност се въвежда в хромозомата на мястото на нормалното.
Ако модифицирана последователност се въвежда по определен начин, въз основа на така развали гена са получили тази клетка ще бъде синтезиран ген нефункционален (не извършване на неговата функция) протеин, или изобщо няма да бъдат синтезирани чрез всеки протеин. Ако модифицираният оригиналната последователност, не само уврежда определен ген, но също така и добавяне на друг ген, който не е характерен миши клетки и ги прави резистентни към някои антибиотици, рекомбинантните клетки могат лесно да бъдат отделени от останалите чрез въздействие върху културата съгласно антибиотик, и по този начин получаване на култура на рекомбинантна клетки. Kapekki и Смитис научих, като използвате този метод, гените в клетъчни култури, но те са разработили технология все още не е възможно да се получи нокаут многоклетъчни организми.
След Evans модифициран този метод за получаване на трансгенни мишки (т.е., мишки, имплантирани с изкуствени гени), гени в хромозомата добавяне инжекционни в стволови клетки, използвайки ретровируси (вируси, чиито гени са интегрирани в хромозомите на клетки-гостоприемници). Потомци химери, получени по този начин, ако тези химери гамети прекурсори образувани от инжектират в ембриони стволови клетки оказаха носители вградени в гена на стволови клетки.
Evans напредък направи възможно създаването на мишки, в които специфичен ген ще бъдат изключени от избиване поради хомоложна рекомбинация, включваща изкуствено синтезирани ДНК фрагменти, т.е. комбиниране метод от Evans и Smithies Kapekki - nokautiruya гени инжектира в ембриони стволови клетки. Това Kapekki в лаборатории и Smithies (отново независимо в различните изпълнения), като модифициран метод и се използва за първи път в практиката, което води до множество операции с нокаут мишки.
Миналата година Нобеловата награда за физиология или медицина са получили Андрю Fire (Andrew Z. Fire) и Крейг Мело (Craig C. Mello) за откриването на още един начин за изключване на гени - РНК интерференция. които могат да настъпят дори в по-късните етапи на развитие на организма под действието на двойноверижна част от РНК нуклеотидна последователност, съответстваща на фрагмент, който, когато е изключена ген. В това разстояние не се дължи на увреждане на гена в хромозомата, и поради това unichozheniya чете от иРНК. Тяхното унищожаване не е възможно да се синтезира, кодиран от гена протеин.
Свързани статии