Това е един от най-важните етапи на гръбначна течност, проучвания, въз основа на който данните често се потвърдена или опровергана диагнози.
Преброяване на броя на образуваните елементи се извършва в рамките на 30 минути след отстраняване на цереброспиналната течност с последваща клетъчна диференциация. За да брои препарат левкоцити оцветени един от реагенти:
O 5 мл 10% разтвор на ледена оцетна киселина + 0.1 метил виолет оцетна + вода 50 мл А - време оцветяване на 2 минути;
Самсон Ø реагент: 2,5 мл алкохолен разтвор фуксин 1:10 + 30 мл оцетна киселина + 2 г + карболовата киселина, дестилирана вода до 100 мл, докато оцветяване за 10-15 минути.
Рисуван лекарство поставя в Fuchs-Rosenthal обем камера от 3.2 мл. Белите кръвни клетки се преброяват на малко увеличение на всички 256 квадрати, с висока плеоцитоза 200-1000h10 6 / л смятат половината от мрежата, и резултатът се умножава по 2, плеоцитоза над 1000h10 6 / л Брой на брой големи квадрати, и резултатът се умножава по 4. нормалните стойности изброени брой клетки в таблица 1, с различни видове патология - в таблица 2.
Cytosis в лумбалната цереброспинална течност
Броя на червените кръвни клетки в CSF Goryaeva преброени в броячна камера. За тази CSF смесва с кръв се разрежда в 10 пъти - 9 части изотоничен разтвор на натриев хлорид и 1 част CSF се смесва в епруветка. Получената течност се разбърква старателно, изпълнен Goryaeva броячна камера и, в съответствие с правилата на преброяване на броя на червените кръвни клетки, определя броя на червените кръвни клетки в пет големи квадрати. Броят на еритроцити в 1 л CSF се получава от:
където А - брой на еритроцитите в 5 големи (80) ниски квадрати 1/400 - обемът на малък квадрат, 10 - алкохол разреждане, 80 - броят на малки квадрати.
При изчисляване на Fuchs-Rosenthal камера фуксин оцветени клетки и образуваните елементи са разгледани ядрото и цитоплазмата структура, която дава възможност за тяхната диференциация. Оценка на поведението им като същевременно увеличава 7h40. Регистрация броене резултати или проценти могат да имат цифрово изражение (likvorogramma). Като се има предвид, че оформените елементи и клетката могат да претърпят дегенеративни промени с продължително присъствие в CSF, е необходимо да се оцени и броя на образуваните и клетъчни елементи в оцветени препарати.
ОСР клетки имат напълно различен афинитет към оцветител от червени кръвни клетки, и затова изборът на бои трябва да бъде различен. Добри резултати дават следните видове оцветители:
1. Боядисване на Росина. CSF се центрофугира в продължение на 7-10 минути. Супернатантът се отдекантира, пелетата се поставя на обезмаслено стъкло, лесно разклащане го разпространява върху стъклената повърхност на 1-2 минути и течността се отдекантира. Стъкло поставен във вертикално положение, и се суши в пещ при температура 40-50 ° С, след което се фиксира с метанол в продължение на 1-2 минути и цвят Романовски: препарати, оцветени 6-12 минути, в зависимост от дебелината на намазка. Препаратът се промива с дестилирана вода и се суши. Ако ядрата имат бледо син цвят, brushstroke dokrashivayut още 2-3 минути.
2. Покритие на шум. Получената утайка чрез центрофугиране, се излива върху стъклото леко разклащане го разпределя равномерно върху повърхността. Суши при стайна температура за един ден, фиксира на 5 минути с метанол. След това се оцветяват с разтвор лазур еозин (същото като за оцветяването на кръв, но се разрежда 5-кратно) в продължение на 1 час. Ако blednookrasheny клетки dokrashivaet неразреден боя под контрол микроскоп от 2 до 10 минути. Колкото повече образува елементи в разтвор, особено в присъствието на кръв, по-дългосрочен оцветяване.
3. Оцветяване Алексеев. Изсушеният но не фиксиран лекарствен прилага 6-10 капки багрило Romanowsky-Giemsa, същата пипетата внимателно я разпределя по цялата получаването и се оставя в продължение на 30 секунди. След това се добавя без източване мастило, 12-20 капки дестилирана вода, предварително загрята до температура от 50-60 ° С, в съотношение 1. формулировка 2. Swinging боя се разбърква с вода и се оставя да престои в продължение на 3 минути. Мастилено-струен промива с дестилирана вода, суши се с филтърна хартия и лекарство mikroskopiruyut. Методът е подходящ за спешно цитология.
Нормалните стойности на съдържанието на клетъчни елементи в разтвор са представени в таблица 3.
tsitotsentrifugirovaniya технологии (цитоспин). Получаване на оцветен разтвор от утаечни течност след центрофугиране не винаги е възможно да се получи тънък слой от клетки, подходящ за диагностициране. За да се реши този проблем tsitotsentrifugirovaniya технология е разработена, който е за производство на висококачествени хардуерни продукти. Към получения разтвор се приготвя за изследване и се поставя в tsitokameru, след което се дозира на вертикално отгледани в слайди ротор цитоцентрофугиране. Под действието на центробежната сила клетки разпределени равномерно върху стъклото, а по-леките течността се отстранява от повърхността на лекарството. Сушене, фиксиране и боядисване на лекарството също се проведе в цитоспинния. Устройството позволява до 8-диагностични области на един кадър.
Атипични kletki често са клетки от тумори на ЦНС или я черупката. Същото може да се случи с хроничен възпалителен процес (туберкулозен менингит, менингоенцефалит, множествена склероза, енцефаломиелит) - е ependyma клетки zheludochkovpautinnoy обвивка, както и лимфоцити, моноцити и плазмени клетки с ядра и промени цитоплазмата.
Модифицираните клетки и сянка клетки са намерени в dlitelnomih констатация в CSF. Най-често се подложи на автолиза неутрофилни гранулоцити, клетки арахноидните, ependyma стомахчета. Диагностична стойност на модифицирани клетки и сенките нямам клетки.
кристали ОСР се срещат рядко. В 4-5 дни след субарахноидален кръвоизлив, травматично увреждане на мозъка открити кристали хемосидерин в случай на разпад в съдържанието на тумор цистообразуващи могат да бъдат открити gematoidina кристали, холестерол, билирубин, холестерол кристали се също, образувани в центровете на мастна дегенерация, некроза на мозъчна тъкан и мозъчни кисти , За идентифициране на кристали в CSF, използвайки реакцията е показано в Таблица 4.
Реакциите използвани за идентифициране на кристали в цереброспиналната течност
Азотна киселина дава затихване син цвят
Разкрити реакция пруско синьо, клетките се оцветяват в синьо и сини цветове
Разтворим в алкохол, етер, се топи в концентрирана сярна киселина, за да се образуват съединения червено konedansatsionnyh
Разтворим в хлороформ и основи
Елементи ehinokokka- куки scolexes хитинови черупки фрагменти и Echinococcus мехурчета могат да бъдат открити в множествено ехинококоза менингите. Намерете ги изключително рядко.