Методи за диагностика
Вирусни инфекции.
Грипният вирус. ТОРС
Суриков EV - MD dots.kafedry
микробиология, имунология и вирусология,
методически указания
Откриване на вируса или нейните компоненти
директно в клиничен материал,
взети от пациента (бърза диагностика);
Изолирането на вируса от клинични материали
и неговата идентификация;
Serodiagnosis вирусни инфекции;
Изборът на метод за лабораторна диагностика
Това зависи от:
Естеството на болестта;
Предполагаемият патогена;
От периода на заболяването;
Изисквания за събиране, съхранение и доставка
материал за анализ
Оптималното време за вземане на проби от материал;
Избор на проба зависи от патогенезата на заболяването;
Изисква се взема кръв в острата фаза на болестта;
Подбор зависи от проба предварително клинична диагноза;
Пробите бяха взети асептично в стерилни флакони
с винтова капачка;
Пробите се съхраняват на студено и мокро (не замразени); мога
стабилизиращ среда, използвана (Hanks 'среда и другата.);
Доставката се извършва в най-кратки срокове. Ако времето
предоставяне на повече от 30-40 минути, а не веднъж ще се проведе
проучване, проби се замразяват при -80 ° С в сух лед или
поставен в течен азот при -180 ° С;
Пробите са етикетирани и те издават спътник
документ;
Методи за диагностика на вирусни инфекции
1.
2.
3.
4.
Цитологични (бърза диагностика);
вирусологичен
серологично
молекулярно-генетични
Методи за бърза диагностика
Бързи методи;
ускорено
методи;
Бързите диагностични методи за вирусно
инфекции
Malospetsificheskie
♦ Телец
• Paschen
• Aragão
Телец Бабеш-Негри
♦ вътреклетъчни включвания
• ядрен (напр. По време на аденовирусни инфекции)
• цитоплазмената (напр. Бабеш-Негри)
♦ Определяне вирионни проби
• EM (дава отговор в рамките на 1 час);
• EIM (отговори за 2-3 часа);
Подходящ за Rota, адено, gepadna, Paranix,
ортомиксовирус и сътр.
Бързите диагностични методи за вирусно
инфекции
много специфична
Откриване на вируса в проби AG: RIF,
IFA, IHA, RIA, реакционната утаяване
гел (2 до 24 часа);
Откриване на началото на антивирусни антитела IgM:
Phragmites, Ронг, ELISA, RIA, и др.;
Откриване на вирусни ензими в тесто MG;
Идентификация NC: PCR;
RIF болезнено
материал
Бързите методи
Откриване на вируса в клетъчни култури чрез AG
След 24 съхранение.
методи ретроспективен
Вирусологичен метод;
serodiagnosis;
вирусологичен метод
етапа:
Култивиране (натрупване) на вируса;
Индикация (откриване) на вируса;
Типичен (идентификация на вируса);
Използвайки метода за вирусологично
пилешки ембриони
5-7 дни, най-малко - 10-11 дни
основните начини на заразяване:
индикация:
на Chorio-алантоична мембрана
в Chorio-алантоисно
в кухината на жълтъчната торбичка
в кухината на амниона
в тялото на ембриона
смърт на плода
морфологични промени ембриона / кожи
WGA с течност от пилешки ембрионални кухини
идентификация:
RN (включително HAI)
РСК
Използвайки метода за вирусологично
клетъчни култури
Често - трансплантиран монослой
индикация:
CPE (цитопатичен ефект на вируси - всяко
промените монослой от клетки, включително плака образуващи
и цвят проба)
haemadsorbing активност монослой (RGAds)
RIF (= идентификация)
идентификация:
RN (включително RTGAds)
РСК
RIF
грипен вирус
ortomiksovirusov -
Гр. orthos - Добре,
myxa - слуз
Ortomiksovirusov: класификация
Orthomyxoviridae
Influenzavirus
Вирус на инфлуенца А
грипен вирус
грипния вирус тип C
Ortomiksovirusov: характерен
семейство
спирален тип симетрия
цитоплазмени включвания
наличност на етапи ядрени репликация
Ortomiksovirusov: основният начин
култивиране
пилешки ембриони
амнион
алантоиса
показ
RGA
идентификация
РСК
ХИТ
Ортомиксовируси: вириона структура
сърцевина (нуклеокапсид)
РНК (А и С - 8 ° С - 7)
структурен протеин
(Нуклеокапсид) - А, В или С.
ензими
superkapsid
М протеин
bilipidny слой
ток (гликопротеини - GP)
хемаглутинин (Н) - индукция
virusneytraliziruyuschih Ig,
адсорбция
невраминидаза (N) - разликата в
напъпил
Серотипове на вируса на грип А
(Според класификацията на СЗО 1980)
формула
период
циркулация
забележка
H1N1
1918 - 1957
до 1947 - H0N1
H2N2
1957 - 1968
азиатски
H3N2
1968
Хонконг
H1N1
1977
руски
Ortomiksovirusov: антигенна промяна
и неговите последици
антигенен
дрейф
(1 - 2 години)
изместване
(10 - 15 години)
?
А
(И Н и N)
Най-
(Н)
точкови мутации в гена
C
(Не)
натрупване
дрейф
рекомбинация на две
пълен заместител ген
натрупване
промяна GP
подтип промяна GP
Чувствителност към фактори
външната среда на вируса на грип А
56 ° С
UV-лъчи
дезинфектанти
перилни препарати
Отличителни черти на вируса
С грип
1.
2.
3.
4.
Той има 7 РНК фрагменти
не невраминидаза (един вид шипове)
грубо разположени върху повърхността
вириона не случайно, но със строг
шестоъгълна ориентация
адсорбция към клетката с помощта на различни
рецепторен тип
Грип: епидемиология и природата
заболеваемост
клиника
хора
асимптоматични
аерозол
пандемия
А
епидемия
Най-
местен
флаш
C
спорадичен
заболеваемост
Грип: патогенеза
дихателните пътища епител
кръв
алергия
отравяне
nodulus
ендотел
капиляри
кървене от вътрешните
тела
лимфоцити
имунодефицит
бактериални усложнения
Грип: имунната система
интензивен и продължителен, но
тясно специфичен
хуморален
клетъчен
IFN
NK
Ig
макрофаги
Игаш
T
- местна
неутрализиране на анти-Н
анти-М -
разпространение
к
Грип: имуно- и химиопрофилактика
имунизация
ваксина
живея
мъртъв
химически
имуноглобулин
IFN
химиопрофилактика
римантадин
грип А
начален етап
диагностика вирусологични грипни
1.
2.
3.
бърза диагностика
RIF: Ag в епитела
Вирусологично Метод (ранните дни)
насофаренгеално измиване
пилешки ембриони
RGA - Дисплей
RAC - тип
HI - подтип
метод антитяло
антитяло "сдвоени серуми" (C / о 8-14 дни), - средно нови, HAI
ВИРУСИ, предавани от VOZDUSHNOKAPELNYM (SARS)
ТОРС
а. Paramyxoviridae
N / A Paramyxovirinae
стр. Respirovirus (VPGCH -1, -3)
стр. Rubulavirus (VPGCH -2, -4А, -4Ь)
N / A Pneumovirinae
стр. Pneumovirus (RS - вирус);
а. Coronaviridae
стр. Коронавирус (повече от 10 вида)
а. Reoviridae
стр. Orthoreovirus (3 srotipa)
а. Picornaviridae
стр. Риновирус (2 вида, 100 серотипа)
стр. Ентеровируси (коксаки вирус и еховирус);
а. аденовируси
стр. Mastadenovirus (80 вида)
а. Paramyxoviridae
N / A Paramyxovirinae
стр. Rubulavirus (вирус
заушка);
стр. Морбиливируси (морбили вирус);
а. Togaviridae
стр. Rubivirus (рубеола вирус)
прояви на SARS
ТОРС
горна дивизия
дихателни пътища
Ринит (Reno и коронавируси)
фарингит (корона, Paranix,
аденовируси)
-долна дивизия
дихателни пътища
Бронхит и бронхиолит
(RS -virusy)
пневмония (грип
парагрипен)
морфология
• Голям черупка
вируси (150-300 нм)
• тип спирала
симетрия
• нуклеокапсида
усукани в спирала
• едноверижна
несегментен
минус - РНК
Парамиксовируси: характерни
гликопротеини (superkapsida шипове):
- HN - и невраминидаза
нахемаглутиниращия дейност
- F - мембранно сливане (symplasts,
синцитиум), хемолиза
Репликация се извършва изцяло в
цитоплазма
може да се образува
цитоплазмени включвания
Протеини и гликопротеини
• хемаглутинин
невраминидаза (в VPGCH и
заушка, в РС -
не)
• Глюкопротеин F (Fusion -
сливане)
• М-протеин
• Протеини полимеразна
комплекс (L, Р)
Парагрипен вирус: свойства
5 серотипове (доминирани
VPGCH-3)
нахемаглутиниращия
дейност
CPP
Това зависи от серотип
Парагрипен: патогенеза
насофаренгеално епител
кръв
пневмония
(Деца до една година)
ARI
Парагрипен: имунитет
тип-специфични
кратко
(налично
повторно заразяване с едни и същи
серотип)
парагрипен:
вирусологичен диагноза
1. Бърза диагностика
Ag в клетки на носните проходи (IFA, ELISA)
2. Метод Вирусологично
насофаренгеално измиване
▼
biocytoculture
▼
RGAds, CPP
▼
RSK, HI, RN
3. Серологично
антитяло "сдвоени серуми" (HI, DGC, RN)
Pneumovirus: свойства
характеризиращ се чрез образуване синцитиум
пълна липса на:
-
-
повърхностни гликопротеини:
-
-
хемаглутинационната и haemadsorbing
дейност
невраминидаза дейност
G - адсорбция
F - мембранно сливане (проникване) и
синцитиевото образувание
Серотип 2 (Ph)
Респираторен синцитиален вирус:
епидемиология
• Това е патологията на по-долните дивизии
дихателните пътища при деца до 3 години.
• Максимална от сериозни заболявания, отчетени
възрасти 6 седмици - 6 месеца (бронхиолит, пневмония)
• Повторни инфекции губи своята
агресивност
• Основният начин - щифт, aerogenic
Патогенезата на RSV-инфекцията (респираторен синцитиален
вирусна инфекция)
аерозол път
ARI (възрастни)
епител на лигавицата на горния
дихателни пътища
пневмония (деца)
имуносупресия
имунни комплекси
бактериални усложнения
имуннапатология
Коронавирус: класификация
Coronaviridae
мъж
животни и птици
ТОРС
(SARS)
ентерално
дихателен
(Силно заразни)
етимология
ТОРС - тежък остър
респираторен дистрес синдром
(ТОРС - Тежък остър респираторен
синдром)
Короновирусите: Имоти
• slozhnoorganizovannyh
размер 100-150 нм
• тип спирала на симетрия
• гликопротеини Е2 - и peplomer
Е1 - трансмембранен
• едноверижна
плюс не-сегментиран РНК
• 4 серогрупи (рН) - няма
кръст имунитет
• На практика култивира
короновирусите:
роля в човешката патология
дихателен
б / симптоматично
ARI
бронхит
пневмония (деца под 2
години)
ТОРС (SARS)
ентерално
гастроентерит (децата)
Диагностика на ТОРС, причинени
короновирусите
• Бързо диагноза: (RIF за откриване на хипертония при
VAR епителни клетки)
• Серологично (РСК, HI, RN, с оглед
serodiagnosis)
• Molecular Genetics (PCR), за да се определи
присъствието на вирусна РНК
Аденовируси: съставът на семейството
аденовируси
• Aviadenovirus - птичи вируси
• мастаденовирусна - вируси бозайници
• серотипове (HI)
аденовируси:
общи характеристики
• Обикновено ДНК вириони маркетинг
• 252 капсомер
• От 12 върховете на icosahedron - фибри
(Тема)
• антигени:
• групово специфично
(Нуклеокапсид) - RAC
• конкретен тип
(= Хемаглутинин резба) -
HAI, RN
Аденовирусно инфекция: патогенеза
първичен репродукция
мукозни епителни клетки
• дихателни пътища
• червата
конюктива
лимфоидната тъкан
• сливици
• мезентериалните лимфни възли
▼
кръв
▼
съдов ендотел
▼
ексудативна възпаление на лигавиците
▼
фибринозен филм, некроза
Аденовирусно инфекция: клинични форми
• ARI
• pharyngoconjunctival треска
• пневмония (деца, възрастни хора)
• (kerato-) конюнктивит
• гастроентерит
• рядко аденовирус поражение
• менингоенцефалит
• хеморагичен цистит
Аденовирусно инфекция: разследване
трансплацентарната инфекция
вътреутробно заболяване
аномалии на плода
смъртоносни пневмония новородени
Аденовирусните инфекции: вирусология
диагностика
1.
2.
3.
Откриване на Ag в респираторния епител (RIF).
изолиране на вируса
секрети от носа, фаринкса, конюнктивата, фекалиите
▼
biocytoculture
▼
РСК
▼
PH, HI
Откриване на нарастване на титър на антитяло (RSK, HI, RN)
Благодаря ви за
внимание
Свързани статии