Съществено в процеса на усвояване на въглеродни съединения има концентрация в хранителната среда. Най-голямо количество лизин, произведени в среда, съдържаща 10-12% захароза. При по-високи концентрации на захароза, произвеждащи специфични намалява скоростта на растеж и намалява съотношението захар превръщане (YP / S).
4.2 Приготвяне на инокулум
Инокулумът се получава в два етапа: първо в колби, и след това култивирани при аериране апарати (11 / мин) и енергично разбъркване и автоматичен контрол на температурата (30 0 ° С) и рН 7, в съответствие с изискванията.
Ако източникът на въглерод е оцетна киселина (амониев ацетат) се дължи на инхибиторното действие на ацетатни йони на клетъчен растеж при концентрация от над 2%, субстратът се извършва фракционна смола като неговата консумация.
Индустриални производители на лизин се gomoserindefitsitnye ауксотрофни мутанти на бактерии Бревибактериум родове. Микрококус. Corynebacterium.
Клетките Brevibacteriumsp. 22 култури са Грам-положителни пръти фиксирани дължина 1.2-2.5 микрона, но понякога могат да имат овална или кръгла форма.
Клетките имат максимална дължина в логаритмична фаза на растеж. В бързо растящи клетки е добре изразен рибозомна апарат протеин-синтезиране, докато бавно се увеличава, но интензивно синтезира лизин - мембрана система. Клетките интензивно синтезират лизин, най-активни са ензими и цикъла на Кребс, много от които са свързани с мембрани.
Допълнителни източници на азот най-често се използва амониева сол и царевичен мацерат (получени чрез третиране на царевични питки сярна киселина при 90-100 ° С), киселинни казеинови хидролизати или дрожди. Последните съдържат необходимите щам ауксотрофни аминокиселини и витамини. Оптималното съотношение на въглерод и азот в средата е 11 1 (когато добивът на увеличение лизин намалява с намаляване на аланин натрупаната). Хранителната среда трябва да съдържа соли на калий, магнезий и фосфор (таблица. 2).
Съставът на хранителни среди за отглеждане на лизин производителя (%)
4.3 условия Култура
Общият добив на схема лизинови лекарства е показано на фиг. 2
Процесът на производство на лизин изисква стриктни асептични условия.
Култивиране на производство лизин производствена култура обикновено се извършва на порции в ферменторите, обемът на което е 50, 63 или 100 m 3. Семена в количество от 5-10 об. % От обема културална среда подава във ферментатора. Веднага след засяването, тя е снабдена с въздух се загрява до 50 ° С, в размер на 1 обем въздух на един обем хранителна среда за минута при налягане 0,12-0,13 МРа.
Времето за ферментация е 55-72 часа, процесът се провежда при енергично разбъркване на средата, температура от 28-32 ° С, рН = 7,0 ÷ 7,5 (поддържана чрез добавяне на амонячна вода в околната среда) и периодично подаване на стерилен антипенител.
процес на култивиране се състои от два етапа. На първия ден клетките консумират около 25% въглехидрат и азотни вещества; По това време тя се натрупва почти всички биомасата. Във втория етап скоростта на натрупване на биомаса е рязко намалява, но QL е натрупване на лизин. В края на процеса вече не консумира чрез титруване агент (амонячна вода), и концентрацията на лизин е 60-100 г / л биомасата се натрупва 10-15 г / л (СВ), скорост на захар консумация на лизин е 25-35%.
5. Получаване на лизинови препарати
В зависимост от целта на качеството на живот могат да се получат различни микробни препарати (фигура 2): Концентрира течност лизин (ZHKL), сух фураж концентрат на лизин (CCL), кристална лизин.
5.1 концентрирана лизин
За ZHKL и CCL културален бульон, съдържащ 10-13% DM, подкислява се със солна киселина до рН 5,0 и се прибавя 0,15% разтвор на натриев сулфит, за да се стабилизира лизин. стабилизиран културална течност се изпарява под вакуум до 35-40% DM.
5.2 Химическо концентрат на лизин (CCL), получен чрез изсушаване ZHKL в сушилни спрей за съдържание на влага 5-6%. Суха DLBCL е много хигроскопичен, така че веднага след изсушаване са пакетирани в полиетиленови торби.
По-малко хигроскопичен CCL получен чрез изсушаване ZHKL заедно с ексципиенти (кост брашно, фуражни дрожди, пшенични трици, и т.н.).
Съставът на хранителни препарати включват добавяне на лизин и други аминокиселини, витамини, макро- и микроелементи (таблица. 3).
Химически състав на фуражните препарати лизин
5.3 Кристална лизин се изолира от QOL след отделяне на биомасата.
В нормалния ход на процеса съотношението на страничната амино киселина не надвишава 3% от съдържанието на лизин, делът на микробните клетки - 1.5%. За отделяне на биомасата от QOL на хопера използване сепаратори, и филтриране с грунд слой в барабан вакуум филтър, или рамка филтърни преси, последвано от промиване на утайката с вода.
Разтвори, съдържащи лизин след подкиселяване със солна киселина (рН = 5,0 ÷ 5,2) и стабилизатор (NaHSO3) се концентрира чрез изпаряване във вакуум до 45-50% DM. Полученият концентрат се подлага на кристализация, която се провежда при 5-12 ° С в продължение на 1-2 дни. Утайката се отделя от матерния разтвор в потока на промишлени центрофуги и допълнително се суши в сушилня разпръскване или кипящ слой. Готовият продукт е обикновено цвят кафяв и съдържа най-малко 70% от основното вещество.
Друг метод за изолиране на лизин е процес йонообмен. Към този продукт се подкислява с H 2SO 4 разтвор до рН = 1,6 ÷ 2,0, при което дикатион аминокиселини. След хемисорбция на катионния обменник (CS-2x8), използвани в Н + форма iliNH4, неутрални и разделени примеси на киселинен характер. Аминокиселините се елуират от катионен обменник 0.5-5% разтвор на амониев хидроксид се изпарява, подкислява се със солна киселина до рН = 4.9 ÷ 5.0, и концентратът се кристализира при 5-12 ° С до получаване на кристали от лизин монохидрохлорид светло жълт или светло-кафяви цвят, което след изсушаване съдържа 90-95% от основното вещество и 1,0-12,5% пепел. За получаването на по-висока чистота в схемата на пречистване включва етапа на третиране на разтвора с активен въглен, След прекристализация из 50% етанол, и др.
Вашият сайт е много добър! Починете си, студент се забавляваме: Диплома - документ, удостоверяващ, че от вас най-накрая се отърва от. Между другото, анекдот е взета от chatanekdotov.ru
Свързани статии