1.1. Feature-производствен щам лаказа.
Както се използва лаказа ензим производителя висока класовете Basidiomycete Trametes hirsuta култура 56 (Wulfen.) Piláт.
Производството щам се характеризира с висока скорост на растеж и синтез на извънклетъчен лаказа активен в условия на течна фаза дълбока обработка.
На жълт агар твърда среда за образуване на колонии с добре развити влакна вълнист въздушен мицелий. Зонирането на колониите не се изразява. На 3-тия ден на култивиране при 32 ° С в диаметър колония става равна на 6.7 cm. Въздушен мицелий бяло. Colony ръб е гладка, оптимистично. Reverzum непроменени, след избелва. Със застаряването на колонии с жълтеникав или kremovatam образуват наченки на овощни тела под формата на хълмчета 3-10 мм в диаметър. Миризма хубава гъба.
В потопена култура филаментозни агломерати космат сферична или неправилна форма с диаметър от 1 до 8 мм. дълбочина и повърхност култура обикновено не се образуват хламидоспори, артроспори и oidii. Хифите преградена, разклонена под прав ъгъл. Хифите могат да образуват подуване и сгъстяване в краищата. Хифите на три типа, в Потопени култура главно два вида: тънък (1,0-2,0 mm) и с дебелина 2,5-5,0 (микрона). Катарами единични, големи, Стръмен, често без лумена, понякога медальон.
Аеробика. Оптимална температура растеж (31 ± 1) ° С, рН оптимум 4,0.
1.2. Получаване на хранителната среда.
На хранителна среда, г / л:
екстракт от царевица разрежда самостоятелно (100 г / л) и се стерилизира отделно при 0,18 МРа в продължение на 40 минути.
Брашно в отделен контейнер се разтваря в малко количество студена вода, добавете към вряща вода с енергично разбъркване и се оставя в продължение на 10 минути, се добавя сол и стерилен царевичен мацерат. Охлажда се до 30 ° С рН се довежда до 5,7 чрез титруване с 10% H 2SO 4 или 10% КОН.
Получената среда се излива в 150 мл колби за разклащане на 750 мл капацитет и запушалка с капачки хартия.
1.3. Стерилизация на хранителната среда.
Приготвени колби с културална среда се поставят в автоклав и се стерилизират при налягане 0,18 МРа в продължение на 40 минути, след това се охлажда до температура (31 ± 1) ° С и използван в рамките на един месец. Да се съхранява при стайна температура.
1.4. Сеитба и култивиране на колби семена.
Всички работят с повторно засяване на културата и произвежда качулка за вземане на проби при стерилни условия в зоната на пламъка.
Получаване на инокулума колби се извършва на няколко етапа (преходи):
- първо преминаване - презасяване култура към средата на твърдата култура (касата) се извършва в размер на 1 до касата 1 чрез прехвърляне на разклащането в стъкленица култура заедно с парче от агар-агар от микробиологична калциниран кука.
- последващи пасажи (втори, трети и т.н.) се извършва в размер на 10% обем на инокулум от предходния канал (150 cm 3 15 см на хранителна среда културална течност 3 предишния пасаж) чрез прехвърляне на инокулум се използва стерилна пипета с разширен край Mora или със стерилна цилиндър.
Инокулатор за заразяване на семена изисква да подготви 0.44 литра посевен третата и следващите пасажи. Срок на годност 10 дни от семена. Съхранява семена в хладилник при 4 ° С
Инокулираните колба се запечатва със стерилен памучен тампон, поставен на държача в термостатна баня и се отглеждат в следния режим:
- Температура 30-32 ° С
- / Мин (180-240 об / мин) скорост кобилица 200
- време култивиране: първото преминаване - 3-4 дни (72-96 часа).
вторият - 2-3 дни. (48-72 часа).
трето и последващо - 2-3 дни. (48-72 часа).
Инокулумът се контролира (при 10% колби семена):
- липса на странична микрофлора чрез поставяне на месо-пептон агар;
- на оксидазна активност спектрофотометрично;
- от морфологични, физиологични показатели чрез микроскопия възрастен инокулум (съгласно т. 1.1.).
Както суспензия производство на семена култура се използва след 3-тия и последващи пасажи (до 10).
Поддържането на културата върху твърда среда и култивиране в колби се извършва в съответствие с инструкциите.
Готов колби семена се използва за инокулиране на среда в инокулатор (Поз. FD-10) в етап-2 TS.
Несъответстващ инокулум е насочено към стъпка КИ-1.
Свързани статии