Диагностичната стойност на изучаване на дейността на СК изоензими
Методи за определяне на СРК
Стандартни клинични и лабораторни параметри
Ролята на креатин в метаболизма на мускулната тъкан
Кинетиката на действие на СК
Трансфер на енергия от митохондриите в цитоплазмата на миокардните клетки чрез изоензими СРК
СРК активност в миокардни саркоплазмени ретикулум мембрани в експерименталната коронарна недостатъчност
Влияние на алкохолна интоксикация и процеса на стареене на активността на креатин киназа и неговите ензими
Историята на изучаването на креатин фосфокиназа (СРК) е интересен и необичаен: независимо от факта, че тя е започнала преди повече от 80 години (с откриването на креатин през 1927), както и отговора на креатин беше отворена полилиния и Леман в 1934 1936 г., изследователите все още са отворени нови функции на системата и на проблема с креатина остава далеч не е решен. Развитието на идеи за физиологичната роля на системата на креатин от самото начало е бил тясно свързан с успехите в областта на мускулна физиология и биоенергетика. От своя страна, креатин научноизследователски системи да имат съществен принос за формирането на идеи за общите принципи на организация на обмяната на веществата и метаболитен контрол в клетката.
Цел: Да се изследва съвременните подходи към структурата и биологичната роля на креатин.
Креатин киназа (ЕО 2. 7. 3. 2) - отнася се до фосфотрансфераза с азотна група като акцептор.
Този клас трансферази включват ензими, които катализират превръщането на различни, е радикал промяна от донорната молекула на молекула акцептор и процес не-хидролиза. Името на техните съставни части във формата: "донор - транспортирани група - трансфераза."
През 1964 г. са открити креатинфосфокиназа изоензима: Цитоплазматичното BB-CK (портманто на мозъка - на мозъка.) MM-CK (портманто мускули - на мускулите.) И форма хибрид - MB-СК и митохондриалната изоензим - МТ-СК.
В сърцето на цитоплазмата съдържа половината от MM-форми, както и на целия ± MW и BB-СК; общата им дейност е 40-50% от общата дейност.
Диагностичната стойност на изучаване на дейността на СК изоензими
Серум СРК изоензимите- дейност следствена има голям диагностичен значение. Изозим на креатин киназа, особено важно да се изследва в остър миокарден инфаркт, тъй като CF-формата в значителни количества, съдържаща почти изключително в сърдечния мускул. Повишена активност на MV-форма в серума показва поражение на сърдечния мускул е.
Методи за определяне на СРК
Еднакво метод за определяне на креатин киназа активност с използване на метода служи като субстрат реакция на креатин. Ензимната активност е пропорционална на количеството на неорганичен фосфат, произведен чрез киселинна хидролиза на реакционния продукт на креатин - креатин фосфат. Неорганичното фосфорно определят от цветната реакция с амониев молибдат. Обикновено, активността на креатин киназа в кръвния продукт открити по този метод е 100 нмол / (C * п), или до 6 IU. Активността на креатин киназа, MB-форма е по-малко от 2% от общата ензимна активност. Втори метод за определяне на активността на креатин киназа, както и приема като стандартизиран е метод, използващ като креатин на субстрата. Ензимната активност е пропорционална на количеството на креатин образувани в резултат на ензимната реакция. Креатинът се определя от цветна реакция с а-нафтол. Обикновено, активността на креатин киназа в кръвния серум на продукта открити по този метод, е от 0 до 220 нмол / (C * п), или 0-13 IU [международна единица = 16.67 ммол / (C * п)]. (Lehninger A. Biochemistry, М. 1976, стр. 382).
Стандартни клинични и лабораторни параметри
Креатин фосфокиназа (СРК) нива
Норма: 10-50 IU / L при 30S0 (варира в зависимост от метода на определяне).
А. предпазни мерки по време на експеримента: Ензимът е нестабилен, съдържанието на еритроцитите потиска активността на ензима. Серумът трябва бързо да се отделя от съсирек. Когато разследването не може да се извърши веднага, серум трябва да бъдат замразени.
Б. Физиологична Основа: СРК разцепва фосфокреатин (включващи ADP) за образуване на креатин и АТР. СРК мнозина в скелетните мускули и сърдечни, в мозъка.
Б. Анализ на данните:
Увеличаването индекс се случва, когато мускулни заболявания (инфаркт на миокарда, мускулна травма), мускулна дистрофия, полимиозит, тежко мускулно напрежение (бягане), хипотиреоидизъм, инсулт. След инфаркт на миокарда CK нараства бързо (в рамките на 3-5 часа) и остават повишени в продължение на 2-3 дни.
Оценка не се увеличава в миокардни заболявания на белия дроб или на черния дроб паренхим.
Изоензими на серумния креатинин фосфокиназа (Таблица №1)
А. предпазни мерки по време на експеримента: същите като в СК казус (виж по-горе.).
Б. Физиологична Основа: СРК се състои от три изоензими, разделими чрез електрофореза. За скелетните мускули характеристика изоензим ММ, инфаркт MB, за мозъка - BB.
Таблица №1. СРК изоензими
Нормално ниво (% от общия брой)
Превключва открити от активността на СК, тясно свързани с структурни промени в мембраните на IDB, по-специално тяхната липид състав. Така че, от гледна точка на коронарна недостатъчност е известно намаляване на мембранно свързан холестерол, както и рязък спад в нивото на фосфолипиди (40%),
С въвеждането на антиоксидант лекарството AV-156Na наблюдава еднопосочен промяна на изследваните параметри в посока на тяхното нормализиране. Този ефект показва, че нивото на изтичане на пероксидни реакции в миокарда до голяма степен определя поведението на отделните метаболитни процеси в мембрани.
Наблюдаваното намаление на СРК SPR мембрани в експериментална исхемия може да бъде показателно за определено нарушение на нормалното енергоснабдяването транспорт на Са-АТРаза SPR мембрани. Промяната в активността на СК се случва на фона на значително намаляване на мембранните фосфолипиди на сърдечни PRL нива зайци. Може би, СРК изоензим. Мембранни свързан PRL е lipidzavisimym ензим и да проявяват пълна запазване на нормалната активност на структурата на липидната мембрана - важен и необходимо условие. (Frolkis RA Воронков GS Dubur GY Tsiomik VA Gomon IV - Някои аспекти на изследването на креатин киназа активност в мембраните на саркоплазмения ретикулум на миокарда в експерименталната коронарна недостатъчност // Бюлетин на експериментална биология и медицина, М. 1983, №5, стр. 53, 54).
Ефект на алкохолна интоксикация и процесите на стареене на активността и неговите изоензими СРК
В Министерството на Pharmacology на Института по експериментална медицина, Академия на медицински науки на СССР (Ленинград) провежда експерименти за идентифициране на свързани с възрастта промени на СК активност в кръвния серум на интактни животни възраст 4 и 24 месеца, а също така изследван ефекта на остра алкохолна интоксикация от активността на креатин киназа и неговите изоензими в тъкани и телесни течности на плъхове 2 групи: 1) животните на възраст 4 месеца, което в продължение на 3 часа преди експеримента бяха инжектирани интраперитонеално с 25% етанол в доза от 3 и 5 г / кг; 2) контрола - плъхове третирани със съответните обеми от физиологичен разтвор. Преди обезглавяване в тези животни по лека анестезия с етер взе алкохол. Мозъкът екстракти от кората на главния мозък, цереброспинална течност и в кръвния серум СК активност и изоензим профил. общата ензимна активност се определя чрез колориметричен метод. Изозими се разделя чрез колонна хроматография върху Sephadex DEAE А50. Количеството на протеин се определя mikrobiuretovym метод. Статично обработка се извършва от Student.
Анализ на данни за общата активност на СК в кръвния серум на плъхове с остра алкохолна интоксикация, както и в интактни плъхове на различна възраст, можем да заключим, че интактни животни на възраст 4-5 месеца на дейност на СК и изозим спектър са много различни от интактни плъхове на възраст от 24 месеца (таблица №3).
Таблица №3.Obschaya активност на СК в кръвния серум на различни възрастови плъхове и плъхове с остра алкохолна интоксикация
СРК активност в кръвния серум IU / L
Цялостни плъхове на възраст 4 месеца. (П = 12)
При доза от 5 г / кг (п = 12)
Наблюдаваната факта, свързано с възрастта намаляване на общата активност на СРК в кръвта, може да бъде в резултат на общи промени в метаболизма ниво, забавяне обработва актуализирани тъкани намаляване на двигателната активност и така нататък. D.
С въвеждането на етанол в доза от 3 г / кг, общата активност в кръвта, се увеличава значително чрез повишаване на активността на всичките три форми на ензима. Наред с това, е налице рязка промяна в процента на изоензими (фиг. 1).
Изоензим спектър на СК в кръвния серум на плъхове на различна възраст и плъхове с остра алкохолна интоксикация
Тези данни показват, че етанолът причинява структурно увреждане на нивото на целия организъм клетъчни мембрани, мозъка и миокарда страда по този начин по-вероятно, тъй като абсолютни ползи за активност ± MW-BB изоензими, и най-голямата. (4 и 10 пъти, съответно), докато активността на MM-CK се увеличава от само 1.4 времена. Може да се предположи, че източникът на серумната активност на BB-СК е мозъчна тъкан. CSF - - кръв (таблица №4) За да се изследва тази хипотеза, динамиката на активността на СК в системата на мозъка е проучена.
Таблица №4. СК активност в мозъка, гръбначно-мозъчната течност и серума на плъхове в остра алкохолна интоксикация (п = 12)
Мозъчна IU на 1 мг протеин
Креатин - ключов ензим в биосинтеза на високите енергии субстрат - креатин, играейки заедно с изключителната роля на ATP в сърдечния мускул биоенергетиката и тялото на.
Определяне на креатин киназата, е ценен диагностичен тест на инфаркт на миокарда и други патологии. Въз основа на последователни измервания на серумен креатинин киназна активност може да се прецени степента на миокардна некроза процес и оценка на ефективността на терапията.
Но не всички аспекти на креатин функции проучени. Важна информация може да бъде получено чрез изучаване система креатин в мозъка, СРК цитоплазмата и митохондриите на която е представена от друг от мускули, изоформи, както и мускулни клетки от различни животински видове са в различни етапи на развитие; в различни патологични състояния.
2. М. Dixon, Е. Webb, ензими, том 1, М. 1982.
4. А. Lehninger Biochemistry, 1976 М..
7. Frolkis RA Воронков GS Dubur GY Tsiomik VA Gomon IV Някои аспекти на изследването на креатин киназа активност в мембраните на саркоплазмения ретикулум на миокарда в експерименталната коронарна недостатъчност // Бюлетин на експериментална биология и медицина брой 5, М. 1983.
Дори и да работи в областта на биологията
Обобщение на биологията
Свързани статии