Bordetella

Bordetella - FK черкезки

Глава 31. коклюш и parakoklyusha

агенти причинители на тези заболявания принадлежат към рода Bordetella.

1. Bordetella коклюш - коклюш е описано Bordet и Генгоу през 1906 г.

2. Bordetella parapertussis - патоген parakoklyusha описано Eldering и Kondrikov през 1937 г.

3. Bordetella bronchiseptica - причинява заболяване при животните. При хора, тези бактерии причиняват бронхопневмония с магарешка кашлица. За първи път човек има заболяване, описано от Браун през 1926 г. (рядко).

Морфология. Коклюш бактерии - малки пръчици яйцевидна, 1-1,5 х 0,3-0,5 микрона. Патоген ал коклюш малко по-голям мащаб. И двата микроби не разполагат спор, все още. Когато специален цвят се вижда на капсулата. Грам-отрицателни. По-интензивно рисувани върху полюсите.

На ultrasrezah видима капсулата черупки зърна valyutina в нуклеотиди - вакуолата.

Отглеждане. Коклюш и parakoklyusha - аеробика. Съчетани с хранителната среда. Като среда за култивиране използва Bordet - Генгоу (глицерин-картофен агар с кръв). В момента се намира между AMC (казеин-агар въглища) - полу-синтетична среда без кръв. източник на аминокиселини е казеин хидролизат. AMC среда се различава от средата Bordet - Генгоу по-прост и достъпен метод на производство.

За инхибиране се прибавя растежна среда външни флора на пеницилина от 0.25 - 0.5 МЕ на 1 мл среда или метицилин - 2.5-4 г на 1 мл. Пеницилин може да се прилага към повърхността на средата в плаките.

Инокулираната среда се инкубира в термостат при температура от 35-36 ° С, рН 6,8-7,4. Културите трябва да бъдат защитени от изсушаване, за да го поставя в термостат съд с вода.

Колониите от Б. коклюш появяват след 48-72 часа и Б. parapertussis - 24-48 часа.

В сряда AMC колония Б. коклюш малък 1-2 mm в диаметър, Б. parapertussis са малко по-голям. Колонии на двете микроби блестящи, сиво-крем цвят (на казеин-агар въглища те напомнят живак капки). При отстраняване на колониите остава вискозен, кремаво пътека. Когато изучават колонии стереоскопичен микроскоп видима светлина конус (колония сенките). При промяна на позицията на светлинен източник (крушки) променя позицията на присъствието на сянка на светлинния конус (опашка) има диагностична стойност.

Б. parapertussis образува тирозиназа ензим, така че в среди, съдържащи тирозин, е разделен и средата е оцветен кафяво. Промяна на цвета на средата е диференциално-диагностичен функция.

течна среда и parakoklyusha коклюшни бактерии образуват единна мътност и дъното утайка. Агар с кръв те дават зона на хемолиза.

Прясно изолирани култури често имат гладка S-форма (I фаза). Когато култивира при неблагоприятни условия или в материала, взет в по-късните стадии на заболяването, могат да се дисоциират форма (II-IV фаза).

Ензимните свойства. Коклюш не се разграждат въглехидратите и протеините не са ферментирали. Parakoklyusha бактерии продуцират ензими, уреаза и тирозиназа.

И коклюш бактерии произвеждат ензими parakoklyusha патогенност: хиалуронидазниен plazmokoagulazu и lecithinase.

Токсин. В животински експерименти са идентифицирани четири вида пръчки пертусис токсин протеин характер: 1) топлинно лабилен токсин dermonecrotic; 2) термично стабилна ендотоксин; 3) leykotsitozostimuliruyuschy фактор (стимулиране левкоцитоза); парентерално приложение е причината за смъртта на експериментални животни; 4) gistaminsensibiliziruyuschy фактор - когато се прилага на мишки повишена чувствителност към хистамин.

Първите два вида токсин и патоген присъщ parakoklyusha.

Таблица 47. Диференциални признаци род Bordetella бактерии

Антигенни структура. В бактерии от рода Bordetella antirennaya сложна структура. Най-важните антигени за лабораторна диагностика, са аглутиногемм. 7. Общи аглутиногени е видове специфични аглутиногени на Bordetella коклюш е 1 до Bordetella parakoklyusha - 14 до Bordetella bronhoseptika - 12.

Моноспецифични серум 1, 14, 12 се използват за диференциране видове (серум освобождава институт по епидемиология и микробиология. Гамалея).

Освен видово-специфични антигени са представители на Bordetella и други аглутиногени различна комбинация от тях, която определя серовар (таблица. 48).

Таблица 48. Схема състав аглутиногени род Bordetella

Чрез комбинация от трите основни аглутиногени 1,2,3 определени в аглутинация с моноспецифични серуми, Б. коклюш разграничат три серовар: 1,2,3; 1,2,0; 1,0,3.

Устойчивост на факторите на околната среда. Коклюш и parakoklyusha малко устойчиви. При температура от 56 ° С те са убити след 20-30 минути. Ниските температури също вредно влияние върху тях. Директна слънчева светлина ги убива в рамките на 1-2 часа; Ултравиолетова светлина - след няколко минути. Сухият храчките тези бактерии продължават няколко часа. Традиционните решения дезинфектанти ги унищожават бързо.

И двата вида бактерии са чувствителни към антибиотици, не са чувствителни към пеницилин.

Възприемчиви животни. При естествени условия животни, които не са податливи на патогени от този вид. При експериментални условия, не може да играе коклюш с маймуни и млади кучета, причини смъртта на мишките.

Източници на инфекцията. Болен човек. Особено инфекциозни пациенти в катарален период.

път предаване. Airborne път. Ролята на различни предмети е малко вероятно поради нестабилността на коклюшни бактерии в околната среда.

Патогенеза. Коклюш и parakoklyusha причина остро заболяване, с конвулсивно кашлица. След като на лигавицата на горните дихателни пътища, бактерии се размножават и там са частично разрушени. Отделените токсин действа върху централната нервна система, дразни нервните рецептори горната лигавицата на дихателните пътища, което задейства кашлица рефлекс. В резултат на това има пристъпи на магарешка кашлица. В хода на заболяването има няколко периода: катарален, спастичен кашлица и процес резолюция.

Имунитет. След това заболяване, произведени силен имунитет, което се причинява от хуморален и клетъчен фактори.

Предотвратяване. Идентификация и изолиране на пациентите. Проблемни деца, е в контакт със заразен, приложен имуноглобулин. Основните мерки за специфична профилактика - дете имунизация на DPT (дифтерия-тетанус коклюш-ваксина). Ваксината се прилага три пъти до 6 месеца, последвано от реваксинация.

Лечение. В ранните етапи на болестта коклюш имуноглобулин използва. За използване лечение на еритромицин и ампицилин.

Тестовите въпроси

1. Опишете морфологичните свойства на коклюш и parakoklyusha.

2. Какви са медиите и характера на растежа и parakoklyushnyh коклюш микроби?

3. Стабилност на коклюш и parakoklyusha във външната среда.

4. диференциални характеристики и parakoklyusha коклюш.

5. Източници на инфекцията, начина на предаване, патогенеза на магарешка кашлица.

микробиологично изследване

Цел: Да се определи патогена и диференциацията на коклюш от parakoklyusha.

Материал за изследване

Освобождаване от отговорност на назофаринкса лигавица.

Първият ден на изследването

Вторият - на третия ден учебни

Култури са отстранени от фурната и сърфиране, с помощта на лупа или стереоскопичен бинокулярен микроскоп. В присъствието на съмнителни колонии от тяхното освобождаване на AMC: в петриеви панички, разделени на сектори, или в епруветки. Култури, поставени в инкубатор. Ако много колонии, като част от тях може да направи удара, боя и погледнете под микроскоп. Ако има малки грам-отрицателни пръчки поставени пробен аглутинация с моноспецифичен родово 7. Положителни серум аглутинационен показва, аксесоари, посветени на културата на Bordetella род. За да се определи вида Bordetella получаване аглутинация реакция с моноспецифични серуми илюминатори 1 и 14. Реакциите пуснати на предметно стъкло. Положителният резултат от реакцията на аглутинация ни дава възможност да се произнесе с предварително отговор.

На четвъртия ден от изследването

Културите се отделят от пещта и сърфиране, първо с невъоръжено око, като се обръща внимание на цвета на средата (дали кафяво оцветяване) и след проучване на растежа чрез стереоскопичен микроскоп.

В присъствието на съмнителни колонии от изолираните култури да намазки, Грам оцветени и изследвани под микроскоп. След това отново (от чисти култури) даде аглутинация реакция на стъкло с моноспецифичен антисерум аглутинация 1,2,3 и 14. Резултатите дават възможност да се разграничат Б. коклюш от В. parapertussis, и ако - Б. коклюш, след това се определя серовар: 1- минути серотип - (1,2,3), 2-ри серотип - (1,2,0), третата серотипа - (1,0,3). Определяне серотип има епидемиологично значение.

За окончателното идентифициране на избраната култура (положителен аглутинация с моноспецифични серуми) получаване на проба за присъствието на уреаза и се инокулира върху агарови наклонени съдържащ 0.1% на тирозин (вж. Фиг. 49).

Фиг. 49. изолиране на съединение и определяне на патогени и parakoklyusha коклюш (Bordetella коклюш и Bordetella parapertussis)

Тест за уреаза. В малка епруветка се излива 0.3-0.4 мл 2% разтвор урея въведена ухо и се прибавя 2-3 капки фенолфталеин. Епруветката се разклаща и се поставят в инкубатор. Оставя се за реакцията след 2 и 24 часа. Бактериите коклюш не променят цвета на средата. Бактериите притежават ензима уреаза parakoklyusha който разцепва урея да се образува амоняк. Амоняк променя индикатора и средата е оцветен в червено.

Тест с тирозин. На скосеният IPA в епруветки с 0.1% тирозин инокулира култура избрани и поставени в термостат. На следващия ден на тръбата се отстранява от фурната и го сърфиране. За растеж ин витро и ин оцветяване среда кафяво това показва увеличение на патогени parakoklyusha. Коклюш в тази среда не расте.

На петия ден от изследването

При липса на предполагаеми колонии даде отрицателен отговор.

Бактериологични метод отговор за изследване може да бъде получена в 3-4 дни.

1. Използване на имуно-флуоресцентно метод позволява да се отговори на няколко часа след улавяне на материала чрез директно откриване на бактерии в намазки, взети с тампони.

2. От култури върху околната среда на AMC при липса на видим растеж може да бъде намазка-отпечатък: за тази стерилен гумена запушалка докосва посев място и носи отпечатък върху предметното стъкло. проучване Smear марка чрез имунофлуоресценция. В намазки открити бактерии Б. коклюшни или Б. parapertussis.

1. Какво е материалът за разследване на съмнения за магарешка кашлица?

2. Какви са методите за събиране на материал се използва само за определяне на патогена в случаите на съмнение за магарешка кашлица?

3. Какво е добавен към средата, за да потисне растежа странична микрофлора?

1. Вземете 10 плочки с AMC среда пеницилин флакон, съдържащ 300,000 IU. Направи пеницилин разреждане, така че 0.1 мл, съдържащи 7.5 единици. Извършване на изчисление на общата сума на средата.

2. Събиране на назофарингеален секрет един от друг и да направи реколта в сряда AMC.

3. Вземете чиния учител култура или коклюш бактериите parakoklyusha изучава характера на колонии като се стереоскопичен микроскоп. Съмнителни колонии сеят на сектор AMC среда (избор на чиста култура).

4. Обърнете учител чиста култура коклюш или parakoklyusha отглеждат върху среда сектор на AMC, и да аглутинация диагностичен коклюш серум.

В присъствието на положителен тест за аглутинация на уреаза място и да култура на средата с тирозин (0.1%).

AMC. Сряда подготовката институт по епидемиология и микробиология. NF Гамалея. Получава среда AMC черен кондензация вода не трябва да съдържа въглищни частици. Готовите околната среда може да се съхранява в продължение на дълъг период от време (до един месец или повече), той предотвратява изсушаването.