Агробактериален трансформация - метод за получаване на трансгенни растения чрез въвеждане Agrobakteriuma (Agrobacterium) - почвени бактерии. образуване на тумор в растителна инфекция.

Въвеждането на живота на биотехнологията насочени производство на трансгенни растения ускорено методи докинг за получаване на ембрионални тъкани на растителни клетки и тъкани чрез използване на изкуствени среди за култивиране. витамини, хормони и микроелементи и отглеждане тези тъкани на зрели растения с постиженията на генното инженерство.

Основният недостатък на класическия метод на генетична промяна наследственост се състои в това, че в пресичането на две организми с различни генотипове настъпва тяхното взаимно рекомбинация на не икономически ценни гени. В резултат на това новосъздадената клас ще отиде, с изключение на тези гени, които са желателни за генетика изследовател, както и гени, влошават свойствата на сортовете.

При прилагането на метода на Agrobacterium-медиирана трансформация, този проблем е решен лесно.

Инфекция с Agrobacterium

Растителната клетка, клас, които искат да подобрят и въведе ценен ген от зрял растителната клетка отглежда. За прилагане към клетка на определен ген в молекула плазмиден вектор са почвени бактерии Agrobakterium. В природата, този тип инфекция с бактерии растения са повредени. В резултат на това безразборно делящите се клетки, заразени растения се развива тумор, който причинява TDNK сегмент (ДНК, причинявайки тумор) геном Ti-плазмид. В основата на появата на тумори лежи TDNK вграждането в генома на растителна клетка и промени своите клетъчни свойства (фиг. 11). Тази функция TDNK използва широко в генното инженерство.

векторни конструкции

Доста висока резолюция Agrobakteriuma Ti-плазмида (над 20 tysyach нуклеотидни двойки) малко усложнява използването му в генното инженерство. Следователно, за регулиране на наследственост растения чрез генно инженерство, използвайки рестрикционни ензими, получени TDNK сегмент, който свързва плазмида с плазмид PBR 322 (пи-би-ER 322) и се клонира. Създаване на изкуствен плазмид е малко по-малък от Ti-плазмид, и да го използвате, е много по-лесно и по-ефективно. Такива молекули (по изкуствени плазмиди) се наричат ​​векторни конструкции. В сегмент TDNK векторна конструкция се трансплантират растителен ген. В резултат TDNK губи способността си да предизвика тумор, защото вече е разделена на две части на чуждия ген.

Вектор конструкт, включващ TDNK дисекция и чужд ген се въвежда в безвредни за растения специални щамове Agrobakteriuma, Ti-плазмид, който не съдържа TDNK. При заразяване на растенията от тези бактерии Ti-плазмид Agrobakterium с си специален апарат трансформация изгражда чужд ген в растителния геном. Наскоро разработени методи за въвеждане в растение или животинска клетка на чужд ген като част от вектор конструкт чрез тежкотоварни електрическо поле или генни пушки. Въпреки това, тези методи се използват само в специални случаи се дължи на техническа сложност и цена.

Продукция на трансгенни растения

Чрез Ti-плазмид, съединение (1), получен от Agrobakteriuma, плазмид (2) с уникален рестрикционен сайт е създаден векторна конструкция (3). TDNK вектор сегмент конструиране чужд ген рекомбинирано (4) и вектор на (5), базирани на Ti-плазмид, който не е в състояние да образува тумор. Този вектор се въвежда в специален щам Agrobakteriuma в Ti-плазмид, съдържащ не TDNK част (6). Когато се отглежда в изкуствени условия, установени рекомбинантен агробактерията (7) заедно с протопласти вектор (8) е рекомбиниран в генома на растението.

мазол тъкан

В резултат на разделяне на трансформираната растителна клетка произвежда набор от клетки, които се развиват конкретна програма. Такъв пакет се нарича мазол тъкан. Отделните клетки калус тъкани под действието на растителни хормони или други регулаторни вещества започват да се разделят дадена програма. В резултат на тези етапи клетки, получени растителна тъкан ембриони и нормално във всички отношения зрели трансгенно растение. Във всеки един от своите хромозоми трансплантирани клетки, съдържащи ген. Следователно, когато разплод трансгенни растения, произведени сексуално трансплантиран чужд ген е наследствено.

метод трансформация Agrobacterium-медиирана, например, отглеждани сортове памук и сортове картофи, които са устойчиви на bollworms и колорадски бръмбар.

Снимки (снимки, снимки)